Triton X-100-SD法與去垢劑-酶消化法脫豬主動脈瓣膜細(xì)胞的對比研究.pdf

1、目的：現(xiàn)階段治療心臟瓣膜疾病的主要治療手段是心臟瓣膜置換術(shù)。但現(xiàn)有機(jī)械瓣和生物瓣都不是理想的心臟瓣膜置換物，在相容性、抗感染、耐久性、生長潛力等方面有著顯著的缺陷。組織工程心臟瓣膜(Tissue Engineering Heartvalve，TEHV)作為一個活體器官，具有和天然心臟瓣膜同樣的生長、修復(fù)和重建能力，避免了常規(guī)置換物的缺點(diǎn)，是理想的心臟瓣膜置換物?，F(xiàn)階段構(gòu)建TEHV的支架材料主要有生物可降解高分子聚合物支架和脫細(xì)胞天然生物

2、瓣膜支架兩種。前者降解速率的控制以及后者機(jī)械性能等問題均為目前研究的熱點(diǎn)。
　　 本研究中，我們測試了不同脫細(xì)胞方法去除組織細(xì)胞的潛力及維持支架結(jié)構(gòu)的能力來比較不同方法的脫細(xì)胞效果，以尋求更好的方法來制備組織工程瓣膜生物支架。
　　 方法：健康成年豬宰殺后取出心臟，將主動脈瓣膜連同動脈管壁一并取出，生理鹽水反復(fù)沖洗后無菌條件下剪取主動脈瓣葉。隨機(jī)分為三組，分別為對照組(Ⅰ組)，Triton X-100-SD(Sodium

3、-deoxycholate)法脫細(xì)胞處理組(Ⅱ組)，去垢劑-酶消化法脫細(xì)胞處理組(Ⅲ組)，每組16個新鮮豬主動脈瓣葉。瓣葉處理完后對各組瓣葉進(jìn)行組織學(xué)觀察及DNA含量分析：①大體觀察各組瓣葉顏色、形狀等表面性狀；②光鏡、掃描電鏡下觀察未處理組瓣葉正常組織形態(tài)及脫細(xì)胞瓣葉的脫細(xì)胞效果和脫細(xì)胞支架纖維排列情況；③測定各組瓣葉DNA含量，與對照組對比分析細(xì)胞核酸成分殘留情況。
　　 結(jié)果：Ⅲ組瓣葉經(jīng)去垢劑-酶消化法處理可完全去除細(xì)胞，