版權(quán)說明:本文檔由用戶提供并上傳,收益歸屬內(nèi)容提供方,若內(nèi)容存在侵權(quán),請(qǐng)進(jìn)行舉報(bào)或認(rèn)領(lǐng)
文檔簡介
1、目的:
明確CyclinA,CDK2,BAG3在胃癌組織及癌旁組織中的表達(dá)情況及相關(guān)性,探討B(tài)AG3表達(dá)與胃癌患者臨床病理特征的關(guān)系,初步研究BAG3及其S291位點(diǎn)磷酸化對(duì)于胃癌細(xì)胞增殖及抗凋亡能力的影響。
方法:
收集福建醫(yī)科大學(xué)附屬協(xié)和醫(yī)院胃外科2012年12月-2013年07月期間手術(shù)切除的180例新鮮胃癌組織及其癌旁組織,采用Western blot法檢測(cè)CyclinA,CDK2,BAG3的蛋白質(zhì)
2、表達(dá)情況;利用半定量免疫印跡實(shí)驗(yàn)的灰度分析和統(tǒng)計(jì)學(xué)方法分析CyclinA,CDK2,BAG3之間的相關(guān)性及BAG3與胃癌患者臨床病理特征的關(guān)系;通過構(gòu)建BAG3過表達(dá)及沉默質(zhì)粒:BAG3-WT,BAG3-S291A,BAG3-S291D;BAG3-shRNA。采用瞬時(shí)轉(zhuǎn)染的方法將各個(gè)質(zhì)粒轉(zhuǎn)染入胃癌細(xì)胞株MGC-803內(nèi),分別用Neomycin和Puromycin篩選出過表達(dá)及沉默表達(dá)BAG3基因的穩(wěn)定轉(zhuǎn)染胃癌細(xì)胞株。通過CCK8和平板克
3、隆形成實(shí)驗(yàn)檢測(cè)細(xì)胞增殖,通過流式細(xì)胞儀及WB檢測(cè)c-PARP分析細(xì)胞凋亡,通過熒光素酶實(shí)驗(yàn)檢測(cè)FOXO1轉(zhuǎn)錄活性的改變,通過細(xì)胞免疫熒光及核質(zhì)分離檢測(cè)FOXO1的細(xì)胞內(nèi)定位變化。
結(jié)果:
1.BAG3在胃癌組織、癌旁組織中均有表達(dá),其主要定位在細(xì)胞質(zhì)。與癌旁組織相比,BAG3在胃癌組織中的表達(dá)明顯下調(diào),且 BAG3的表達(dá)量與CyclinA/CDK2的表達(dá)量呈負(fù)性相關(guān)。
2.CyclinA/CDK2可以磷酸化
4、BAG3的S291位點(diǎn)。
3.BAG3 S291位點(diǎn)磷酸化導(dǎo)致其蛋白質(zhì)穩(wěn)定性降低,即蛋白質(zhì)的半衰期變短。
4.胃癌細(xì)胞中BAG3發(fā)揮著抑制細(xì)胞增殖的作用,若S291位點(diǎn)持續(xù)磷酸化后抑制細(xì)胞增殖更為顯著。
5.過表達(dá)BAG3的胃癌細(xì)胞株對(duì)于奧沙利鉑誘發(fā)的凋亡更為敏感。
6.BAG3介導(dǎo)FOXO1入核并促進(jìn)其靶基因 P27,Bim的轉(zhuǎn)錄活性。
結(jié)論:
1.BAG3在胃癌組織中的表達(dá)
溫馨提示
- 1. 本站所有資源如無特殊說明,都需要本地電腦安裝OFFICE2007和PDF閱讀器。圖紙軟件為CAD,CAXA,PROE,UG,SolidWorks等.壓縮文件請(qǐng)下載最新的WinRAR軟件解壓。
- 2. 本站的文檔不包含任何第三方提供的附件圖紙等,如果需要附件,請(qǐng)聯(lián)系上傳者。文件的所有權(quán)益歸上傳用戶所有。
- 3. 本站RAR壓縮包中若帶圖紙,網(wǎng)頁內(nèi)容里面會(huì)有圖紙預(yù)覽,若沒有圖紙預(yù)覽就沒有圖紙。
- 4. 未經(jīng)權(quán)益所有人同意不得將文件中的內(nèi)容挪作商業(yè)或盈利用途。
- 5. 眾賞文庫僅提供信息存儲(chǔ)空間,僅對(duì)用戶上傳內(nèi)容的表現(xiàn)方式做保護(hù)處理,對(duì)用戶上傳分享的文檔內(nèi)容本身不做任何修改或編輯,并不能對(duì)任何下載內(nèi)容負(fù)責(zé)。
- 6. 下載文件中如有侵權(quán)或不適當(dāng)內(nèi)容,請(qǐng)與我們聯(lián)系,我們立即糾正。
- 7. 本站不保證下載資源的準(zhǔn)確性、安全性和完整性, 同時(shí)也不承擔(dān)用戶因使用這些下載資源對(duì)自己和他人造成任何形式的傷害或損失。
最新文檔
- PKCδ介導(dǎo)BAG3蛋白Ser187位點(diǎn)磷酸化的功能解析.pdf
- 星形膠質(zhì)細(xì)胞中CDK5磷酸化BAG3的作用與機(jī)制研究.pdf
- 鋅離子通過磷酸化酪氨酸15位點(diǎn)激活CDK-5介導(dǎo)缺血性腦損傷.pdf
- 潛在磷酸化位點(diǎn)對(duì)AGV2 VP3凋亡功能的影響.pdf
- TGIF對(duì)ATRA介導(dǎo)的胃癌細(xì)胞增殖和凋亡的影響.pdf
- AE2介導(dǎo)胃泌素抑制胃癌細(xì)胞增殖的研究.pdf
- Tau蛋白的PKA磷酸化位點(diǎn)突變體對(duì)其磷酸化的影響.pdf
- RASSF1A基因?qū)θ宋赴┘?xì)胞JNK磷酸化的影響.pdf
- 抑制Hsp90影響肝癌細(xì)胞蛋白激酶B磷酸化并抑制肝癌細(xì)胞增殖的實(shí)驗(yàn)研究.pdf
- CXCR4介導(dǎo)的胃癌細(xì)胞的抗凋亡機(jī)制的研究.pdf
- 磷酸化調(diào)控FUNDC1介導(dǎo)的線粒體自噬研究.pdf
- miR-96介導(dǎo)的FOXO3表達(dá)變化對(duì)肺腺癌細(xì)胞A549增殖和凋亡的影響.pdf
- 星形膠質(zhì)細(xì)胞通過CX47介導(dǎo)Ca2+-ERK1-2磷酸化通路促進(jìn)少突膠質(zhì)前體細(xì)胞增殖.pdf
- Mfn2基因PKA磷酸化位點(diǎn)的功能研究.pdf
- Bcl-2多位點(diǎn)磷酸化誘導(dǎo)肥大心肌細(xì)胞凋亡.pdf
- 口蹄疫病毒VP1抑制TPL2介導(dǎo)的IRF3磷酸化功能研究.pdf
- RACK1磷酸化MCM7促進(jìn)肺癌細(xì)胞增殖.pdf
- 骨髓基質(zhì)細(xì)胞來源的新型凋亡誘導(dǎo)分子LAPF的功能研究:LAPF募集磷酸化p53(ser-15)至溶酶體介導(dǎo)的細(xì)胞凋亡通路.pdf
- 羥基羥酸受體HCA3介導(dǎo)的ERK1-2磷酸化信號(hào)通路調(diào)控機(jī)制的研究.pdf
- sirna靶向抑制stat3對(duì)人胃癌細(xì)胞增殖和凋亡的影響
評(píng)論
0/150
提交評(píng)論