賴氨酰氧化酶在大鼠急性脊髓損傷修復(fù)過程中的作用.pdf

1、目的:本研究旨在探討賴氨酰氧化酶（LOX）能否在大鼠急性脊髓損傷（spinal cord injury，SCI）修復(fù)過程中起著重要作用。
　　方法:將96只成年雌性SD大鼠分為A、B、C、D四組，A組（n=30）為β-氨基丙腈組（β-Aminopropionitrile，BAPN，一種LOX活性抑制劑），B組（n=30）為氯化鈷組（CoCl2，一種LOX表達促進劑），C組（n=30）為單純損傷組（injury），D組（n=6）為正

2、常對照組（sham）。在采用Allen’s方法成功地復(fù)制大鼠急性脊髓挫傷模型的基礎(chǔ)上，設(shè)定相同打擊力度。在損傷后不同時間段[1、3、7、14和30天（d），每個時間點n=6]切取實驗脊髓段。采用免疫組化（IHC）和免疫印跡（Western blot）檢測LOX在脊髓損傷組織中的表達，并分析A、B、C與D組之間差異性。應(yīng)用BBB評分法評估損傷后大鼠后肢運動的恢復(fù)狀態(tài)，同時分析A、B、C組不同時間段LOX表達與肢體運動恢復(fù)狀態(tài)的相關(guān)性。

3、r>　　結(jié)果:BBB評分結(jié)果顯示氯化鈷組（B）后肢運動的恢復(fù)狀態(tài)分?jǐn)?shù)明顯高于β-氨基丙腈組（A）和單純損傷組（C），且A組最低。免疫組化結(jié)果顯示：在所有實驗時間段脊髓損傷組（A、B、C組）的LOX陽性細(xì)胞數(shù)顯著高于對照組。例如在損傷后1d，A、B、C組的LOX陽性細(xì)胞數(shù)/視野分別為27.46±3.5，64.67±3.0，和41.67±2.3，而對照組的LOX陽性細(xì)胞數(shù)只有6.04±0.2。進而，在所有實驗時間段的LOX陽性細(xì)胞數(shù)，氯化鈷

4、組（B）高于（A、C組），而β-氨基丙腈組（A）低于單純損傷組（C）。例如在損傷后3d，單純損傷組（C）的LOX陽性細(xì)胞數(shù)升達頂峰46.34±3.4，對應(yīng)之氯化鈷組（B）和β-氨基丙腈組（A）陽性值分別為74.81±4.9和37.64±3.6。免疫印跡結(jié)果顯示，與對照組（D）相比，氯化鈷組（B）在損傷后1d LOX表達增加，3d達到高峰，7d時有所下降，14d和30d時明顯減少；β-氨基丙腈組（A）與氯化鈷組（B）和單純損傷組（C）相比

5、，LOX表達曲線基本相同，但表達率卻比后者明顯低弱，氯化鈷組（B）LOX表達明顯高于β-氨基丙腈組（A）和單純損傷組（C）且β-氨基丙腈組（A）最低。相同時間段間兩兩比較都具有統(tǒng)計學(xué)意義（P＜0.05）。
　　結(jié)論:SCI放大脊髓LOX表達。氯化鈷強化 LOX表達加速脊髓損傷的愈合；而BAPN滅活LOX活性延緩損傷脊髓的恢復(fù)。BAPN和CoCl2引起LOX表達的改變與BBB大鼠后肢運動的恢復(fù)評分高低呈正相關(guān)，由此說明LOX作為重要