Shh信號通路對白藜蘆醇預(yù)處理在大鼠缺血-再灌注損傷后腦修復(fù)過程中的作用研究.pdf

1、目的：探討Shh信號通路在白藜蘆醇預(yù)處理對大鼠缺血/再灌注損傷后腦修復(fù)過程中的作用。
　　方法：構(gòu)建體內(nèi)大鼠大腦中動脈閉塞/再灌注（MCAO/R）模型和體外神經(jīng)元氧糖剝奪/再復(fù)氧（OGD/R）模型。大鼠或皮質(zhì)神經(jīng)元隨機分成假手術(shù)組(Sham)（體內(nèi)）或正常組（Nor)（體外）、缺血對照組(Con)、白藜蘆醇預(yù)處理組(Res)、白藜蘆醇預(yù)處理加環(huán)王巴明組（Res+Cyc）和環(huán)王巴明組(Cyc)。體內(nèi)研究每組16只大鼠，給與腹腔注射3

2、0 mg/kg白藜蘆醇或10 mg/kg環(huán)王巴明或無水乙醇預(yù)處理7 d，最后一次在缺血前30 min注射。體外研究給與40μmol/L白藜蘆醇和或5μmol/L環(huán)王巴明預(yù)處理24 h。缺血24 h、7 d、14 d采用Longa、Bederson和mNSS評分評價神經(jīng)功能缺損程度，免疫熒光檢測缺血半暗帶BrdU+/DCX+、 BrdU+/Nestin+、 BrdU+/NG2+、 BrdU+/MAP2+、BrdU+/CNPase+、Brd

3、U+/TUNEL+、NeuN+/Shh+、GFAP+/Shh+蛋白的表達(dá)和體外Gli-1蛋白的核移位，免疫組化法檢測星型膠質(zhì)細(xì)胞和突觸素的表達(dá)，RT-PCR檢測Shh、Ptc-1、Smo和Gli-1基因的表達(dá)，Western blot檢測體外Gli-1蛋白的表達(dá)。
　　結(jié)果：白藜蘆醇預(yù)處理較缺血對照組顯著改善大鼠神經(jīng)功能，促進神經(jīng)神經(jīng)干細(xì)胞增殖、分化、遷移及存活，抑制星形膠質(zhì)細(xì)胞活化，增強突觸素表達(dá)（P＜0.05），同時增強了Sh