OCT2、DRD2和DRD3遺傳多態(tài)性對普拉克索藥代動力和藥效學(xué)的影響.pdf

1、很多因素可以導(dǎo)致藥物反應(yīng)個體差異,例如年齡、性別、疾病狀態(tài)和遺傳等。遺傳藥理學(xué)研究發(fā)現(xiàn)藥物代謝酶、受體和轉(zhuǎn)運體的遺傳多態(tài)性是藥物反應(yīng)個體差異的決定因素。
　　 普拉克索是臨床用于治療帕金森病的多巴胺受體激動劑。它為新型的非麥角堿類多巴胺受體激動劑,對多巴胺D2類受體具有高度選擇性,對D2類受體的親和力依次為D3＞D2＞D4。目前對早期的帕金森病患者提倡首選多巴胺受體激動劑治療,晚期可與左旋多巴合用,這樣可以盡量延緩左旋多巴開始治

2、療的時間和減少左旋多巴的劑量,以避免由于長期使用左旋多巴導(dǎo)致的療效衰退以及引起癥狀波動、運動障礙和精神癥狀等不良反應(yīng),而且普拉克索對多巴胺神經(jīng)有保護作用,可大大延緩病情的發(fā)展。普拉克索的藥代動力學(xué)特點為吸收迅速,約2小時達到血藥濃度高峰,生物利用度高于90％,食物對普拉克索的吸收影響很小,其在體內(nèi)分布廣泛,表觀分布容積約為500L,與血漿蛋白的結(jié)合率約為15％,半衰期在健康的年輕人平均為8小時,在老年人大概為12小時。普拉克索的消除途徑

3、主要是通過腎臟,90％以原型從腎臟分泌排泄。研究表明普拉克索在腎臟的分泌主要由有機陽離子轉(zhuǎn)運體2(organic cation transporter2,OCT2)介導(dǎo)。但普拉克索在臨床實際應(yīng)用中存在顯著的個體差異。由于它不被酶代謝,所以有機陽離子轉(zhuǎn)運體2和它作用的靶受體DRD2和DRD3的遺傳多態(tài)性是導(dǎo)致它個體差異的重要因素。
　　 OCT2是腎臟表達最豐富的一種有機陽離子轉(zhuǎn)運體,其底物包括體內(nèi)多種生物活性物質(zhì)和多種藥物如:多

4、巴胺、二甲雙胍、金剛烷胺、西咪替丁等。近年來,OCT2基因上已陸續(xù)發(fā)現(xiàn)多個單核苷酸多態(tài)性(SNP),但很多SNP都存在顯著的種族差異性,例如Leabman的研究發(fā)現(xiàn)M165I和R400C兩種突變只出現(xiàn)在非裔美國人中,K432Q突變在非裔美國人和墨西哥裔美國人存在,而A270S突變在不同種族中都存在,并且頻率高達12.7％。進一步功能研究顯示,M165I和R400C兩種突變顯著降低了蛋白的最大轉(zhuǎn)運速率。R400C和K432Q突變顯示出對抑

5、制劑TBA的敏感性增強,而突變頻率最高的A270S突變對抑制劑TBA的敏感性減弱。韓國研究者IS Song的研究發(fā)現(xiàn)A270S突變導(dǎo)致轉(zhuǎn)運體最大轉(zhuǎn)運速率Vmax與野生型相比顯著降低,在健康受試者的臨床實驗發(fā)現(xiàn),該突變影響二甲雙胍的藥代動力學(xué)特征,突變后AUC和Cmax都顯著升高,CL/F顯著降低,并且呈現(xiàn)基因劑量效應(yīng)。
　　 多巴胺受體(DR)屬于G蛋白偶聯(lián)受體超家族。目前已知有五種DR(D1～D5),根據(jù)生化反應(yīng)和藥理生理特性

6、的不同,將五種DR分為D1類和D2類受體。D1類受體包括D1和D5,興奮時激活腺苷酸環(huán)化酶,使cAMP水平增加;D2類受體包括D2、D3和D4,興奮時抑制腺苷酸環(huán)化酶,使cAMP水平降低。圍繞DR和帕金森病的研究主要集中在D2和D3。多巴胺受體D2(DRD2)存在以下幾個突變:啟動子區(qū)-141C Ins/Del突變;Taq1ARFLP;內(nèi)含子2中的(CA)n二核苷酸短串聯(lián)重復(fù)多態(tài)性;及三個錯義突變:Ser311Cys,Pro310Ser

7、,Val96A1a。功能研究顯示,在Taq1A多態(tài)性位點攜帶A1等位基因的個體其紋狀體DRD2受體密度降低,并且影響與底物結(jié)合的特異性;DRD3基因位于3號染色體。目前已發(fā)現(xiàn)的突變有Ser9Gly和位于第5內(nèi)含子的MspI RFLP。Ser9Gly突變位于DRD3蛋白胞外的氨基端,對蛋白嵌入胞膜有影響,后又有研究表明9Gly突變增強受體與多巴胺的親和力。
　　 基于以上研究背景,本課題旨在查明OCT2808G＞T突變在健康人和帕

8、金森患者的分布特征,該突變是否與帕金森病的遺傳易患性相關(guān);通過嚴(yán)謹?shù)呐R床實驗設(shè)計查明OCT2808G＞T突變在健康受試者對治療帕金森病藥物普拉克索藥代動力學(xué)的影響;通過嚴(yán)謹?shù)呐R床實驗設(shè)計,研究DRD2和DRD3常見遺傳突變對普拉克索在帕金森病人藥效的影響。
　　 本課題的主要研究結(jié)果如下:
　　 1.在漢族健康志愿者,OCT2808G＞T突變的T等位基因頻率為11.4％;在原發(fā)性帕金森病患者,突變的T等位基因頻率為3.1

9、％,顯著低于健康人群。表明OCT2808G＞T突變與帕金森病的遺傳易患相關(guān),該突變對帕金森病來說可能是一遺傳保護因子。
　　 2.建立簡單、靈敏的LC-MS/MS方法檢測體內(nèi)鹽酸普拉克索血藥濃度。
　　 3.OCT2808G＞T基因多態(tài)性影響普拉克索的藥代特點。攜帶突變等位基因的受試者組普拉克索的Cmax和AUC顯著高于野生型純和子組,口服清除率則顯著低于野生型純和子組。
　　 4.在中國的帕金森患者中,DRD3

10、 Ser9Gly多態(tài)性和普拉克索的療效顯著相關(guān),突變后有效率顯著降低,DRD2 Taq1A多態(tài)性與普拉克索的療效無顯著相關(guān)。但需要更大范圍和多劑量的臨床試驗進一步驗證多巴胺受體遺傳多態(tài)性對普拉克索療效的影響。
　　 總之,本項目從分子水平、健康受試者和臨床病人水平對普拉克索的藥物反應(yīng)個體差異提供了遺傳藥理水平的解釋,為臨床合理應(yīng)用普拉克索提供了實驗依據(jù)和理論指導(dǎo),服用普拉克索的帕金森患者先行進行OCT2、DRD2和DRD3基因型