中華眼鏡蛇毒及神經(jīng)毒素通過抑制炎癥對(duì)急慢性腎病發(fā)揮保護(hù)作用.pdf

1、目的：急、慢性腎病因?yàn)楦咧虏÷屎退劳雎室殉蔀槿蚪】祮栴}。本研究主要探究中華眼鏡蛇毒粗毒（NNAV）及其組分神經(jīng)毒素(CTX)對(duì)急、慢性腎病的保護(hù)作用。
　　方法：將大鼠禁水24小時(shí)后，通過給予大鼠兩側(cè)肌肉注射8 ml/kg50％ v/v的甘油來構(gòu)建急性腎衰竭模型；并且通過給予大鼠一次性尾靜脈注射6 mg/kg的阿霉素來構(gòu)建慢性腎病綜合征模型。自甘油或者阿霉素造模前5天開始到實(shí)驗(yàn)結(jié)束，每日口服給予30,90,270μg/kg（或2

2、0,40,80μg/kg）的NNAV來進(jìn)行治療。自阿霉素造模前5天開始到實(shí)驗(yàn)結(jié)束，每日舌下給予5,15,45μg/kg的CTX口腔速溶藥膜來進(jìn)行治療。將大鼠放入飼料及飲水充分的干凈消毒后的代謝籠內(nèi)，收集24小時(shí)尿液用于尿蛋白檢測(cè)。血生化和腎功能相關(guān)的指標(biāo)通過全自動(dòng)生化分析儀進(jìn)行檢測(cè)，機(jī)體氧化應(yīng)激水平指標(biāo)使用相關(guān)比色酶試劑盒進(jìn)行檢測(cè)。腎組織的病理形態(tài)學(xué)檢查通過光學(xué)顯微鏡和透射電子顯微鏡來進(jìn)行觀察。炎性細(xì)胞因子、NF-?B相關(guān)信號(hào)通路激活、

3、TGF-β和 nephrin等相關(guān)蛋白的表達(dá)分別通過酶聯(lián)免疫法（ELISA）、免疫印跡法（Western blotting）或者免疫熒光技術(shù)進(jìn)行檢測(cè)。
　　結(jié)果：NNAV可以改善甘油誘導(dǎo)的急性腎衰竭以及阿霉素誘導(dǎo)的慢性腎病綜合征引起的尿蛋白溢出、低白蛋白血癥、高脂血癥、血清電解質(zhì)紊亂、機(jī)體氧化應(yīng)激反應(yīng)以及腎臟病理損傷。NNAV降低阿霉素誘導(dǎo)的腎病綜合征大鼠腎臟TNF-?和IL-1水平，上調(diào)IB-水平并抑制NF-Bp65的轉(zhuǎn)核。同時(shí)

4、，CTX對(duì)于改善阿霉素誘導(dǎo)的腎病綜合征大鼠的體重下降、高脂血癥、血清電解質(zhì)紊亂、機(jī)體氧化應(yīng)激水平、腎功能異常和腎臟病理損傷也起著一定的作用。CTX能夠恢復(fù)腎臟抗炎細(xì)胞因子 IL-10的水平，抑制I?B-?的磷酸化以及NF-?B p65的核轉(zhuǎn)位。CTX對(duì)于恢復(fù)足細(xì)胞相關(guān)的蛋白nephrin的作用較弱，但能夠明顯下調(diào)纖維化相關(guān)的TGF-β的表達(dá)。
　　結(jié)論：NNAV及其組分CTX對(duì)于急、慢性腎病具有一定的保護(hù)作用，這種作用可能與調(diào)節(jié)免