白介素-37抗對(duì)乙酰氨基酚誘導(dǎo)小鼠肝損傷的作用研究.pdf

1、目的:通過(guò)建立對(duì)乙酰氨基酚誘導(dǎo)小鼠急性肝損傷的動(dòng)物模型，初步探索白介素-37在肝損傷中的抗炎作用。
　　方法:將雄性昆明小鼠隨機(jī)分成4組(n=16)，即正常對(duì)照組（對(duì)照組）、對(duì)乙酰氨基酚肝損傷模型組（模型組）、IL-37干預(yù)組（預(yù)防組）、IL-37組，每組又按動(dòng)物處死的時(shí)間點(diǎn)(12h，24h)隨機(jī)分為2小組。對(duì)照組:生理鹽水腹腔注射，2小時(shí)后腹腔注射PBS溶液;模型組:生理鹽水腹腔注射，2小時(shí)后腹腔注射對(duì)乙酰氨基酚250mg/kg

2、;預(yù)防組:IL-37b溶液1ug/只腹腔注射，2小時(shí)后腹腔注射等量的對(duì)乙酰氨基酚溶液;IL-37組:腹腔注射等量IL-37b溶液，2小時(shí)后腹腔注射PBS液。分別于12h及24h摘眼球取血后行頸椎脫臼法處死小鼠取出完整肝組織。行以下檢測(cè):(1)采用賴(lài)氏法檢測(cè)小鼠血清中的ALT及AST水平;(2)采用ELISA法檢測(cè)小鼠血清中的IL-1β，IL-6，TNF-α表達(dá)水平;(3)用電子天平稱(chēng)取肝臟重量，并計(jì)算出小鼠肝指數(shù);(4)通過(guò)HE染色觀察

3、小鼠肝組織病理改變;(5)通過(guò)免疫組化的方法檢測(cè)肝組織TNF-α、iNOS蛋白的表達(dá)。
　　結(jié)果:(1)對(duì)小鼠ALT及AST的影響:模型組ALT水平(12h、24h)較對(duì)照組顯著升高（P＜0.01），而AST只有24h較對(duì)照組顯著升高(P＜0.01)，但模型組24h的ALT及AST較12h的都升高(P＜0.05);預(yù)防組ATL水平(12h、24h)與模型組相比顯著降低(P＜0.01)，而AST只有24h較模型組顯著降低(P＜0.0

4、1);IL-37組ALT及AST(12h，24h)與對(duì)照組相比無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)差異（P＞0.05），且24h與12h相比無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P＞0.05)。(2)對(duì)小鼠血清IL-1β、IL-6和TNF-α影響:與對(duì)照組相比，模型組12h及24h血清中的IL-1β、IL-6和TNF-α水平有升高(P＜0.05)，模型組24h的IL-1β、IL-6的水平較12h的顯著升高(P＜0.01);預(yù)防組12h和24h的IL-1β、IL-6、TNF-α水平較對(duì)照組

5、有升高(P＜0.05);IL-37組與對(duì)照組相比IL-1β、IL-6和TNF-α均無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P＞0.05)，且24h與12h相比無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P＞0.05)。與模型組相比，預(yù)防組的12h及24h的IL-1β、IL-6和TNF-αL水平顯著降低(P＜0.01)。(3)小鼠肝指數(shù)的比較:與對(duì)照組相比，模型組12h及24h的肝指數(shù)顯著升高(P＜0.01)，且模型組12h與24h相比有升高(P＜0.05);IL-37組與對(duì)照組比較肝指數(shù)無(wú)統(tǒng)

6、計(jì)學(xué)差異（P＞0.05），且24h與12h相比無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P＞0.05);與模型組比較，預(yù)防組肝指數(shù)顯著降低(P＜0.01);(4)肝組織TNF-α、iNOS的比較:與對(duì)照組相比:模型組12h及24h的iNOS、TNF-α蛋白的表達(dá)顯著升高(P＜0.01)，預(yù)防組與對(duì)照組相比有升高(P＜0.05)，IL-37組與對(duì)照組比無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P＞0.05)，與模型組相比:預(yù)防組iNOS、TNF-α蛋白的表達(dá)顯著減少(P＜0.01)。模型組iN

7、OS量24h與12h相比顯著升高(P＜0.05)，而TNF-α含量12h表達(dá)與24h相比有升高(P＜0.05)。
　　結(jié)論:(1)成功的構(gòu)建了對(duì)乙酰氨基酚肝損傷的動(dòng)物模型，并應(yīng)用IL-37干預(yù)了小鼠的肝損害。(2)模型組小鼠血清中的ALT、AST、IL-1β、IL-6和TNF-α水平升高，IL-37可降低上述指標(biāo)的表達(dá)水平。(3)模型組肝指數(shù)升高，肝損傷程度加重，肝組織TNF-α、iNOS蛋白表達(dá)升高，IL-37可改善組織學(xué)及降低