2023年全國碩士研究生考試考研英語一試題真題(含答案詳解+作文范文)_第1頁
已閱讀1頁,還剩122頁未讀, 繼續(xù)免費(fèi)閱讀

下載本文檔

版權(quán)說明:本文檔由用戶提供并上傳,收益歸屬內(nèi)容提供方,若內(nèi)容存在侵權(quán),請進(jìn)行舉報(bào)或認(rèn)領(lǐng)

文檔簡介

1、腦膠質(zhì)瘤是一種常見的侵襲性原發(fā)惡性腫瘤。腦膠質(zhì)瘤由于其膨脹性和浸潤性的生長特點(diǎn),造成患者發(fā)病率高、病死率高、治愈率低。目前,臨床首選手術(shù)治療,但由于浸潤生長和易擴(kuò)散的特點(diǎn),手術(shù)很難徹底切除腫瘤組織。因此,針對腦膠質(zhì)瘤需要多種治療方法相結(jié)合,其中包括藥物治療。但是,由于腦膠質(zhì)瘤與其他腫瘤疾病相比,由于血腦屏障(BBB)的阻礙,普通藥物很難進(jìn)入腫瘤組織、殺傷腫瘤細(xì)胞。所以,設(shè)計(jì)、制備出能穩(wěn)定攜帶藥物跨過BBB的靶向藥物遞送系統(tǒng)成為了腦膠質(zhì)瘤

2、藥物治療的關(guān)鍵。本研究旨在構(gòu)建、制備一種由T7介導(dǎo)的、用于siRNA遞送的核-殼結(jié)構(gòu)腦膠質(zhì)瘤靶向納米粒,并考察其內(nèi)外穩(wěn)定性、安全性、靶向性以及有效性。本研究主要內(nèi)容包括:
 ?、臢HS-PEG2000-DSPE與T7通過酰胺反應(yīng)生成具有靶向功能的修飾材料T7-PEG2000-DSPE。利用MALDI-TOF-MS、1H NMR和FTIR對產(chǎn)物進(jìn)行了結(jié)構(gòu)確證。制備包載siRNA的普通陽離子核殼結(jié)構(gòu)納米粒(LPC/siRNA)、PEG

3、修飾的納米粒(PEG-LPC/siRNA)、T7修飾的靶向納米粒(T7-LPC/siRNA)。所得納米粒平均粒徑在170-190 nm范圍內(nèi),分布均一,PDI均小于0.3,PEG化后的納米粒Zeta電位由38.63±1.75 mV降至10 mV左右。透射電鏡結(jié)果顯示T7-LPC/siRNA納米粒為圓球或橢球形結(jié)構(gòu)。通過瓊脂糖凝膠電泳實(shí)驗(yàn)證明,三種納米粒均能夠完全包封siRNA。血清保護(hù)實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明T7修飾的靶向納米粒對siRNA在血清中

4、的保護(hù)作用可達(dá)36 h以上。在血清穩(wěn)定性實(shí)驗(yàn)中,PEG化納米粒較未經(jīng)任何修飾的 LPC/siRNA納米粒在血清中穩(wěn)定存在,不易發(fā)生聚集現(xiàn)象。T7-LPC/siRNA納米粒在中性條件下,溶血毒性小,不會(huì)引起血細(xì)胞凝集,酸性條件下,容易破膜,提示其具有溶酶體逃逸能力。通過MTT實(shí)驗(yàn)發(fā)現(xiàn):PEG的引入明顯降低了陽離子脂質(zhì)復(fù)合載體的細(xì)胞毒性。
 ?、仆ㄟ^研究包載熒光標(biāo)記siRNA的T7-LPC/siRNA納米粒在單層腦微血管內(nèi)皮細(xì)胞(BM

5、VEC)及U87腦膠質(zhì)瘤細(xì)胞中的攝取情況,以及跨越體外BBB模型后在U87腦膠質(zhì)瘤細(xì)胞的蓄積能力,以評價(jià)制劑的靶向性;通過考察T7-LPC/siRNA納米粒不同時(shí)間在U87三維腫瘤球內(nèi)的分布情況,研究靶向納米粒對腫瘤球模型的穿透能力。考察T7-LPC/siRNA納米粒在U87細(xì)胞內(nèi)的入胞途徑、入胞速率以及溶酶體逃逸速率,解釋其細(xì)胞內(nèi)化行為。研究結(jié)果表明具有靶向功能的T7-LPC/siRNA納米??梢燥@著提高siRNA在BMVEC及U87

6、細(xì)胞中的攝取量;靶向納米??娠@著跨越體外BBB模型、并在U87細(xì)胞中迅速蓄積;T7-LPC/siRNA納米粒對于U87腫瘤球具有明顯的穿透能力。T7-LPC/siRNA納米粒通過網(wǎng)格蛋白介導(dǎo)的途徑快速進(jìn)入細(xì)胞后,可在較短時(shí)間內(nèi)實(shí)現(xiàn)溶酶體逃逸,降低siRNA被溶酶體內(nèi)RNA酶降解的幾率。
 ?、遣捎媚X立體定位技術(shù),成功建立了原位U87腦膠質(zhì)瘤裸鼠模型,通過活體成像技術(shù)考察載體與藥物雙熒光標(biāo)記的靶向納米粒在荷瘤裸鼠的體內(nèi)分布?;铙w成像

7、研究結(jié)果顯示:靶向納米粒 T7-LPC/siRNA,在血液循環(huán)中能夠穩(wěn)定存在、成功包裹siRNA跨過BBB、蓄積于裸鼠腦部;在腫瘤部位具有較長的滯留時(shí)間。以特異性沉默EGFR基因的siRNA(siEGFR)為模型藥物,通過PCR、ELISA、U87腫瘤球生長抑制實(shí)驗(yàn),對T7-LPC/siEGFR納米粒的轉(zhuǎn)染效率進(jìn)行了細(xì)胞水平的評價(jià)。結(jié)果顯示:靶向納米粒能夠增強(qiáng)EGFR編碼基因沉默效應(yīng);較非靶向納米粒具有更強(qiáng)的BBB穿透能力,引起更顯著的

8、EGFR蛋白下調(diào);能顯著抑制U87細(xì)胞球生長。
 ?、冉⒃籙87腦膠質(zhì)瘤裸鼠模型,分別通過尾經(jīng)脈注射5%葡萄糖、T7-LPC/siNC、PEG-LPC/siEGFR以及T7-LPC/siEGFR納米粒,以生存率、裸鼠體重變化、EGFR蛋白表達(dá)量為指標(biāo),考察納米粒對腦膠質(zhì)瘤的治療效果。并通過給藥過程中裸鼠的血象分析進(jìn)行初步體內(nèi)安全性評價(jià)。結(jié)果顯示靶向納米粒T7-LPC/siEGFR給藥后延長了荷瘤裸鼠生存期,下調(diào)了EGFR蛋白水

溫馨提示

  • 1. 本站所有資源如無特殊說明,都需要本地電腦安裝OFFICE2007和PDF閱讀器。圖紙軟件為CAD,CAXA,PROE,UG,SolidWorks等.壓縮文件請下載最新的WinRAR軟件解壓。
  • 2. 本站的文檔不包含任何第三方提供的附件圖紙等,如果需要附件,請聯(lián)系上傳者。文件的所有權(quán)益歸上傳用戶所有。
  • 3. 本站RAR壓縮包中若帶圖紙,網(wǎng)頁內(nèi)容里面會(huì)有圖紙預(yù)覽,若沒有圖紙預(yù)覽就沒有圖紙。
  • 4. 未經(jīng)權(quán)益所有人同意不得將文件中的內(nèi)容挪作商業(yè)或盈利用途。
  • 5. 眾賞文庫僅提供信息存儲(chǔ)空間,僅對用戶上傳內(nèi)容的表現(xiàn)方式做保護(hù)處理,對用戶上傳分享的文檔內(nèi)容本身不做任何修改或編輯,并不能對任何下載內(nèi)容負(fù)責(zé)。
  • 6. 下載文件中如有侵權(quán)或不適當(dāng)內(nèi)容,請與我們聯(lián)系,我們立即糾正。
  • 7. 本站不保證下載資源的準(zhǔn)確性、安全性和完整性, 同時(shí)也不承擔(dān)用戶因使用這些下載資源對自己和他人造成任何形式的傷害或損失。

最新文檔

評論

0/150

提交評論