哺乳動(dòng)物雷帕霉素靶蛋白(mTOR)基因多態(tài)性(rs2295080)與結(jié)直腸癌患者預(yù)后的關(guān)聯(lián)性研究.pdf

1、背景:
　　結(jié)直腸癌是嚴(yán)重危害人類健康的常見消化系統(tǒng)惡性腫瘤，僅次于肺癌和乳腺癌，居全球腫瘤發(fā)病率的第三位，死亡率的第四位。在我國(guó)新發(fā)病例約15萬，死亡9萬例，分別居常見惡性腫瘤發(fā)病率和死亡率的第三和第五位。而近年來，隨著食物結(jié)構(gòu)、生活方式的改變，我國(guó)結(jié)直腸癌的發(fā)生率和死亡率均呈逐年上升趨勢(shì)。結(jié)直腸癌是一個(gè)多因素和多階段的過程，是環(huán)境危險(xiǎn)因素和遺傳因素共同作用的結(jié)果。而影響結(jié)直腸癌預(yù)后的因素除了患者自身的臨床病理特征之外，在很大程

2、度上也與患者在手術(shù)治療、藥物敏感性方面存在著的遺傳差異有關(guān)。遺傳多態(tài)性，尤其是單核苷酸多態(tài)性，已經(jīng)被用于在對(duì)環(huán)境暴露因素、手術(shù)治療及藥物治療的個(gè)體間敏感性差異等方面的研究。截至到目前為止，已有大量研究顯示單核苷酸多態(tài)性與胃腸道腫瘤的發(fā)生、發(fā)展和預(yù)后相關(guān)。mTOR是哺乳動(dòng)物雷帕霉素靶蛋白，是一種絲氨酸/蘇氨酸激酶.在細(xì)胞中，mTOR以mTORC1和mToRc2的催化亞基形式存在。這兩種復(fù)合物參與細(xì)胞基因轉(zhuǎn)錄、蛋白質(zhì)翻譯起始、核糖體生物合成

3、、細(xì)胞凋亡等過程。目前研究表明，mTOR信號(hào)通路調(diào)控異常與腫瘤的發(fā)生和發(fā)展密切相關(guān)，但關(guān)于mTOR區(qū)基因多態(tài)性與結(jié)直腸癌預(yù)后關(guān)系的報(bào)道甚少。
　　目的:
　　本研究對(duì)mTOR區(qū)基因多態(tài)性(rs2295080)與結(jié)直腸癌患者預(yù)后的相關(guān)性進(jìn)行了分析，以期為結(jié)直腸癌預(yù)測(cè)預(yù)后和制訂個(gè)體化治療方案發(fā)現(xiàn)可能的生物標(biāo)志。
　　方法:
　　1、研究對(duì)象及隨訪:選取2011年2月～2013年10月于浙江大學(xué)醫(yī)學(xué)院附屬第二醫(yī)院腫瘤外

4、科行結(jié)直腸癌根治術(shù)的488例患者，術(shù)前均經(jīng)內(nèi)鏡檢查、組織病理確診為結(jié)直腸腺癌。采集結(jié)直腸癌患者靜脈血標(biāo)本，并準(zhǔn)確記錄所有患者的性別、年齡、臨床分期等臨床特征。通過門診復(fù)查、電話對(duì)結(jié)直腸癌患者術(shù)后生存狀況進(jìn)行隨訪，隨訪截止時(shí)間為2014年6月。
　　2、DNA提取及測(cè)序:用磁珠法純化DNA試劑盒提取結(jié)直腸癌患者靜脈血標(biāo)本的DNA，DNA鑒定合格后，采用real-time PCR反應(yīng)體系，運(yùn)用TaqMan實(shí)時(shí)熒光PCR法進(jìn)行基因分型。

5、
　　3、統(tǒng)計(jì)分析:采用SPSS17.0統(tǒng)計(jì)軟件對(duì)數(shù)據(jù)進(jìn)行統(tǒng)計(jì)學(xué)分析，P＜0.05被認(rèn)為有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。用Kaplan-Meier法繪制生存曲線，用Log-Rank法分析單因素生存期的差異，用COX風(fēng)險(xiǎn)回歸模型對(duì)多個(gè)預(yù)后影響因素進(jìn)行分析，并計(jì)算P值、風(fēng)險(xiǎn)比(HR)、95％可信區(qū)間(CI)。統(tǒng)計(jì)檢驗(yàn)均使用雙側(cè)概率檢驗(yàn)。
　　結(jié)果:
　　1、本研究發(fā)現(xiàn)，盡管mTOR rs2295080多態(tài)與總的結(jié)直腸癌生存預(yù)后間無明顯關(guān)聯(lián)，

6、但在對(duì)腫瘤不同原發(fā)部位的分層分析中發(fā)現(xiàn)mTOR rs2295080多態(tài)分別對(duì)結(jié)腸癌和直腸癌患者的生存有顯著性影響。在結(jié)腸癌患者中，以隱性基因模型作為最佳擬合模型時(shí)，rs22995080 GG基因型攜帶者的預(yù)后生存較TG/TT基因型明顯下降(Log-rank P=0.018，HR=3.07，95％CI=1.15-8.22)。同時(shí)發(fā)現(xiàn)該作用在中分化(Log-rank P=0.008，HR=3.74)，無淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移(Log-rank P＜0.

7、001，HR=11.87)和Ⅱ期(Log-rankP＜0.001，HR=14.74).的結(jié)腸癌患者中更加明顯。而在直腸癌患者中，以顯性基因模型作為最佳擬合模型時(shí)，rs2295080 TG/GG基因型較TT基因型可明顯提升患者的預(yù)后生存(Log-rank P=0.049，HR=0.48，95％CI=0.23-0.99)。該保護(hù)作用在無遠(yuǎn)處轉(zhuǎn)移(Log-rank P=0.011，HR=0.28)和Ⅲ期(Log-rank P=0.019，HR

8、=0.21).的直腸癌患者中更加明顯。
　　2、進(jìn)一步對(duì)兩亞組的臨床特征進(jìn)行單因素生存分析，結(jié)果顯示性別(男性與女性，P=0.377)、年齡（≤60歲與＞60歲，P=0.558）、分化程度（高分化、中分化與低分化，P=0.08）及浸潤(rùn)深度（T1、T2、T3與T4，P=0.163）與結(jié)腸癌患者預(yù)后無明顯相關(guān)性，而淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移(無淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移組與有淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移組，P＜0.001)、遠(yuǎn)處轉(zhuǎn)移（無遠(yuǎn)處轉(zhuǎn)移組與有遠(yuǎn)處轉(zhuǎn)移組，P=0.001）和臨床

9、分期(Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ與Ⅳ，P＜0.001)是影響結(jié)腸癌患者預(yù)后的相關(guān)因素。而對(duì)于直腸癌患者，性別（男性與女性，P=0.617）、年齡（≤60歲與＞60歲，P=0.928）及分化程度（高分化、中分化與低分化，P=0.179）與預(yù)后無明顯相關(guān)性，而浸潤(rùn)深度（T1、T2、T3與T4，P＜0.001）、淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移（無淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移組與有淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移組，P＜0.001）、遠(yuǎn)處轉(zhuǎn)移（無遠(yuǎn)處轉(zhuǎn)移組與有遠(yuǎn)處轉(zhuǎn)移組，P＜0.001）和臨床分期（Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ與Ⅳ，P＜

10、0.001）是影響預(yù)后的相關(guān)因素。
　　3、將單因素分析中差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義組納入COX模型多因素分析，結(jié)果顯示，淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移(P＜0.001)和rs2295080(P=0.021)是影響結(jié)腸癌患者預(yù)后的獨(dú)立因素。有淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移患者的死亡風(fēng)險(xiǎn)是無淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移患者的5.14倍;rs2295080GG基因型攜帶者的死亡風(fēng)險(xiǎn)是TG/TT基因型攜帶者的1.78倍。而臨床分期(P=0.006)、遠(yuǎn)處轉(zhuǎn)移(P=0.001)、rs2295080(P=0

11、.039)是影響直腸癌患者預(yù)后的獨(dú)立因素。Ⅲ+Ⅳ期患者的死亡風(fēng)險(xiǎn)是Ⅰ+Ⅱ期患者的1.45倍;有遠(yuǎn)處轉(zhuǎn)移患者的死亡風(fēng)險(xiǎn)是無遠(yuǎn)處轉(zhuǎn)移患者的3.72倍;rs2295080 TT基因型攜帶者的死亡風(fēng)險(xiǎn)是TG/GG基因型攜帶者的0.67倍。
　　結(jié)論:
　　1、rs2295080可作為結(jié)腸癌和直腸癌患者預(yù)后的獨(dú)立影響因素，攜帶mTORrs2295080 TG/TT基因型的結(jié)腸癌患者的生存預(yù)后較攜帶GG基因型者更好，而攜帶mTORrs2