Rad51基因多態(tài)性與結(jié)直腸癌發(fā)病風(fēng)險的關(guān)聯(lián)性研究.pdf

1、目的:本實驗采用病例-對照研究方法探討DNA修復(fù)基因Rad51兩個常見位點rs1801320G/C及rs1801321G/T多態(tài)性與我國河北地區(qū)結(jié)腸癌及直腸癌發(fā)病風(fēng)險的關(guān)聯(lián)性。
　　 方法:本實驗采用病例-對照研究方法，以51例結(jié)腸癌患者、78例直腸癌患者及74例健康者為研究對象，在無菌條件下抽取實驗對象外周靜脈血5ml，采用蛋白酶K消化-飽和氯化鈉鹽析法提取外周血DNA，并采用聚合酶鏈反應(yīng)-連接酶檢測反應(yīng)(polymerase

2、chainreaction-ligasedetectionreaction，PCR-LDR)方法分別對rs1801320G/C、rs1801321G/T兩個多態(tài)位點進(jìn)行體外擴增及基因型分析。
　　 應(yīng)用SPSS13.0軟件對實驗數(shù)據(jù)進(jìn)行統(tǒng)計分析，以P=0.05為檢驗水準(zhǔn)，P＜0.05有統(tǒng)計學(xué)意義。采用卡方檢驗對對照組基因型頻率進(jìn)行Hardy-Weinberg平衡分析。采用X2檢驗對實驗組與對照組之間的基因型頻率和等位基因頻率加以

3、分析比較。采用EH軟件和2LD軟件對單體型頻率及連鎖不平衡進(jìn)行分析。應(yīng)用非條件Logistic回歸法計算表示相對風(fēng)險度的比值比(oddsratio，OR)及95％可信區(qū)間(confidenceinterval，CI)。
　　 結(jié)果:
　　 1.對照組的rs1801320G/C及rs1801321G/T多態(tài)基因型頻率分布均符合Hardy-Weinberg平衡(P＞0.05)。
　　 2.Rad51基因rs18013

4、20G/C多態(tài)的G、C等位基因在直腸癌實驗組和對照組中的頻率分別為77.6％、22.4％和88.5％、11.5％，兩組相比，其P值為0.011，有統(tǒng)計學(xué)意義，說明攜帶rs1801320C等位基因可增加直腸癌的發(fā)病風(fēng)險。G/G、C/G、C/C基因型頻率在直腸癌組及對照組中分別為:65.4％、24.4％、10.3％和78.4％、20.3％、1.4％，兩組相比，其P值0.647，無統(tǒng)計學(xué)意義。但直腸癌患者C/C基因型頻率(10.3％)明顯高于

5、對照人群(1.4％)，與G/G基因型相比，C/C基因型可增加直腸癌的發(fā)病風(fēng)險(OR=8.659,95％CI=1.002～78.423)。
　　 3.rs1801320G/C多態(tài)的G、C等位基因在結(jié)腸癌實驗組和對照組中的頻率分別為87.3％、12.7％和88.5％、11.5％，兩組相比，其P值為0.763，無統(tǒng)計學(xué)意義。在結(jié)腸癌患者實驗組和對照組中，G/G、C/G、C/C基因型頻率分別為:76.5％、21.6％、2.0％和78.4

6、％、20.3％、1.4％，兩組相比，其P值0.350，無統(tǒng)計學(xué)意義。
　　 4.在結(jié)腸癌實驗組與對照試驗組中，rs1801321G/T的G、T等位基因頻率分別為95.1％、4.9％和97.3％、2.7％，兩組相比，其P值為0.359，無統(tǒng)計學(xué)意義。在直腸癌實驗組與對照組中，rs1801321G/T的G、T等位基因頻率分別為98.1％、1.9％和97.3％、2.7％，兩組相比，其P值為0.651，無統(tǒng)計學(xué)意義。在結(jié)腸癌實驗組和對照

7、組以及直腸癌實驗組和對照組中，G/T、G/G基因型的頻率分別為:9.8％、90.2％和5.4％、94.6％及3.8％、96.2％和5.4％、94.6％，分別對兩組進(jìn)行對比，其P值分別為0.350、0.647，均無統(tǒng)計學(xué)意義。與G/T基因型比較，G/G基因型與結(jié)腸癌、直腸癌的發(fā)病風(fēng)險均無明顯相關(guān)(OR=0.570，95％CI=0.128～2.539和OR=1.538，95％CI=0.286～8.270)。
　　 5在結(jié)腸癌與正常對

8、照試驗組中，Rad51rs1801320與rs1801321兩位點間存在連鎖不平衡(D'=0.165)，但結(jié)果顯示，rs1801320G/C和rs1801321G/T之間的交互作用與結(jié)腸癌發(fā)病風(fēng)險無關(guān)聯(lián)性。
　　 6在直腸癌與正常對照試驗組中，Rad51rs1801320與rs1801321兩位點間存在連鎖不平衡(D'=0.401)，最多見的單體型是rs1801320G-rs1801321G，在直腸癌實驗組及正常對照組中的頻率分

9、別為75.6％、87％，其次為rs1801320C-rs1801321G(22.4％、10.3％)、rs1801320G-rs1801321T(1.9％、1.5％)，rs1801320C-rs1801321T所占的比例最低(0.0％、1.2％)。實驗表明，rs1801320C-rs1801321G單體型可增加直腸癌的發(fā)病風(fēng)險(OR=2.514，95％CI=1.313～4.814)，而rs1801320G-rs1801321G單體型卻會降

10、低直腸癌的發(fā)病風(fēng)險(OR=0.465，95％CI=0.255～0.849)。rs1801320G-rs1801321T,rs1801320C-rs1801321T之間的相互作用與直腸癌的發(fā)病風(fēng)險無關(guān)聯(lián)性。
　　 結(jié)論:
　　 1.Rad51基因rs1801320G/CSNP與我國河北地區(qū)直腸癌的發(fā)病風(fēng)險具有關(guān)聯(lián)性，與G/G基因型相比，C/C基因型可增加直腸癌的發(fā)病風(fēng)險，攜帶C等位基因可加大直腸癌發(fā)病的風(fēng)險。rs18013

11、20G/CSNP與我國河北地區(qū)結(jié)腸癌的發(fā)病風(fēng)險無關(guān)聯(lián)性。
　　 2.Rad51基因rs1801321G/TSNP與我國河北地區(qū)結(jié)直腸癌的發(fā)病風(fēng)險不存在關(guān)聯(lián)性。
　　 3.在結(jié)腸癌與正常對照組中，Rad51基因5'端非編碼區(qū)rs1801320G/C與rs1801321G/T間存在連鎖不平衡(D'=0.165)，但其單體型與結(jié)腸癌的發(fā)病風(fēng)險無關(guān)聯(lián)性。
　　 4.在直腸癌與正常對照組中，Rad51基因5'端非編碼區(qū)rs