哺乳動物雷帕霉素靶蛋白(mTOR)信號通路對脂多糖所致急性肺損傷的影響.pdf

1、背景：哺乳動物雷帕霉素靶蛋白（mTOR）是細(xì)胞內(nèi)多種重要信號傳導(dǎo)通路的樞紐，具有調(diào)節(jié)細(xì)胞的生存、增殖和凋亡等重要生理功能。目前越來越多的研究顯示mTOR信號通路在炎癥反應(yīng)的起始和發(fā)展中也扮演了重要角色，但其在急性肺損傷（acutelung injury，ALI）中的作用尚不明確。
　　 目的：建立氣管內(nèi)注射脂多糖（LPS）誘導(dǎo)小鼠急性肺損傷模型。明確ALI時mTOR活性的變化，應(yīng)用雷帕霉素抑制mTOR活性，觀察雷帕霉素對急性肺損

2、傷的可能干預(yù)作用。
　　 方法：應(yīng)用單次氣管內(nèi)注入脂多糖（20mg/kg體重）的方法誘導(dǎo)小鼠急性肺損傷模型，并通過連續(xù)腹腔內(nèi)注射雷帕霉素（Rapa，4mg/kg體重）5天來實現(xiàn)對小鼠ALI的干預(yù)。在氣管內(nèi)注射LPS8小時后收集肺組織和灌洗液標(biāo)本，通過觀測小鼠的一般情況，肺部病理表現(xiàn)，肺泡灌洗液炎癥細(xì)胞和炎癥因子的表達(dá)，肺水腫的程度和ALI小鼠的生存預(yù)后等多項指標(biāo)，來評價雷帕霉素對ALI的干預(yù)作用。
　　 結(jié)果：肺組織中m

3、TOR的下游蛋白pS6在LPS誘導(dǎo)的急性肺損傷模型中表達(dá)明顯增強(qiáng)，而雷帕霉素的干預(yù)能夠顯著抑制pS6的過度活化。同時，雷帕霉素能夠顯著減少肺泡灌洗液中TNF-α（LPS vs LPS+Rapa：1672.74±193.73 vs539.17±140.47pg/ml，P<0.01）和IL-6（LPS+Rapa vs LPS：1672.74±193.73pg/ml，P<0.01）的表達(dá)水平；以及降低肺組織中IL-1β水平的上調(diào)（LPS vs

4、 LPS+Rapa：6394.20±904.59 vs3196.08±487.46，pg/mg protein，P<0.01），增加了ALI時MMP-9的水平（LPS vs LPS+Rapa：17.98±3.17 vs37.86±19.00，pg/mg protein，P<0.05）。但是，雷帕霉素不能改善ALI的嚴(yán)重程度。無論是中性粒細(xì)胞的浸潤、還是肺水腫程度或病理的改變，雷帕霉素組和賦形劑組均無顯著性差異。而且，雷帕霉素對ALI小鼠