STAT3蛋白水平表達的高低對慢性粒細胞白血病伊馬替尼治療敏感性的研究.pdf

1、目的：升高或者降低 K562細胞株中信號轉(zhuǎn)導(dǎo)因子與轉(zhuǎn)錄激活因子3(Signal transducer and activator of transcription, STAT3)的表達，分析其變化對于CML細胞的增殖分化及伊馬替尼的治療敏感性有何意義。
　　方法：將三組低表達和兩組高表達的重組質(zhì)粒真核表達載體siRNA-STAT3用脂質(zhì)體Lipofactamin3000轉(zhuǎn)染人慢性粒細胞白血病K562細胞株，通過嘌呤霉素持續(xù)單克隆篩

2、選，Western-blot印跡法鑒定，進而篩選出穩(wěn)定低表達組（sh-vector、shSTAT3-1、shSTAT3-2）和高表達組（Overexpression vector、Overexpression）STAT3細胞株。將處于增殖周期的細胞經(jīng)不同濃度的伊馬替尼（imatinib, IM)作用后，MTT法檢測細胞生長抑制率，繪制細胞增殖曲線。同時Western-blot法檢測轉(zhuǎn)染后細胞株BCR/ABL相關(guān)蛋白P53、HAUSP和P

3、TEN的表達變化。
　　結(jié)果：與其對照組（sh-vector）相比，低表達STAT3蛋白（shSTAT3-1、shSTAT3-2）的K562細胞組使用IM治療有著較高的抑制率，在0.1μM、0.25μM、0.5μM和1.0μM作用下，其抑制率達到了(76.3±1.84)%、(80.4±1.90)%、(84.4±2.61)%和(94.3±0.19)%，且差異均有統(tǒng)計學(xué)意義（p<0.05）。提高STAT3（Overexpression

4、）蛋白表達水平后，跟其對照組（Overexpression vector）相比，在相同濃度梯度 IM作用下，其抑制率在兩組平均下降到（58.2±1.27）%、（63.2±2.32）%、(67.9±1.00)%和(74.1±0.76)%，且差異均有統(tǒng)計學(xué)意義（p<0.05）。兩對照組中IM抑制率差異無統(tǒng)計學(xué)意義（p>0.05）。IM治療靶向基因酪氨酸激酶BCR-ABL相關(guān)蛋白表達中，P53、HAUSP和PTEN蛋白表達趨勢和STAT3基本