川木香與線葉旋覆花中倍半萜內(nèi)酯二聚體的研究.pdf

1、倍半萜內(nèi)酯二聚體(sesquiterpene lactone dimers，SLDs)是一類由兩個(gè)相同或不同的倍半萜內(nèi)酯片段組成的天然小分子化合物，大多數(shù)SLDs是兩個(gè)倍半萜內(nèi)酯通過Diels-Alder環(huán)加成反應(yīng)，或者M(jìn)ichale加成反應(yīng)，形成一個(gè)新的C30骨架的復(fù)雜結(jié)構(gòu)，因此這類化合物具有骨架類型多樣，連接方式多變，立體構(gòu)型復(fù)雜的特點(diǎn)。自第一個(gè)倍半萜內(nèi)酯二聚體苦艾素(Absinthin)從菊科蒿屬苦艾Artemisia absin

2、thium植物中被分離以來，到現(xiàn)在大約有200個(gè)倍半萜內(nèi)酯二聚體從自然界中分離得到。本課題前期已對(duì)菊科(Asteraceae)旋覆花屬Inula、兔兒風(fēng)屬Ainsliaea、天名精屬Carpesium中多種植物的倍半萜內(nèi)酯二聚體進(jìn)行了深入研究，共發(fā)現(xiàn)79個(gè)新穎的SLDs。同時(shí)活性研究也表明這些新穎的SLDs具有很好的抗炎與抗腫瘤活性。
　　基于前期研究基礎(chǔ)，本課題組為了發(fā)現(xiàn)更多結(jié)構(gòu)新、生物活性好的倍半萜內(nèi)酯二聚體，選擇菊科(Ast

3、eraceae)川木香屬Vladimiria川木香Vladimiria souliei的根與旋覆花屬Inula線葉旋覆花Inula lineariifolia為研究對(duì)象，運(yùn)用前期發(fā)現(xiàn)的SLDs非特異性的生物堿假陽性反應(yīng)的碘化鉍鉀顯色劑與硫酸香草醛顯色劑為指導(dǎo)，并結(jié)合LC-MS跟蹤，應(yīng)用多種色譜分離技術(shù)，分離鑒定45個(gè)化合物，其中從川木香中分離得到9個(gè)結(jié)構(gòu)新穎的C32型SLDs;從線葉旋覆花中分離得到4個(gè)新的C30型SLDs，并進(jìn)一步對(duì)所

4、分離的SLDs進(jìn)行生物活性檢測(cè)。下面重點(diǎn)對(duì)SLDs進(jìn)行歸納:
　　1.從川木香根中分離得到9個(gè)新型的C32型SLDs(VS-1～9)。它們的共同之處是由兩個(gè)相同或不同的倍半萜內(nèi)酯單體片段與一個(gè)乙酰基或乙醇基片段組成，乙酰基或乙醇基與其中一個(gè)倍半萜內(nèi)酯單體C-13位相連，構(gòu)成一個(gè)C17單元，再與另一個(gè)倍半萜內(nèi)酯單體C15片段通過一個(gè)C11-C13'單鍵相連形成C32型SLDs。這是一類與C30型SLDs完全不同的新的骨架類型。按倍半

5、萜單體的結(jié)構(gòu)類型，可分為愈創(chuàng)木烷-愈創(chuàng)木烷型SLDs(VS-1～3)、桉葉烷-愈創(chuàng)木烷型SLDs(VS-4～7)、吉瑪烷-愈創(chuàng)木烷型SLDs(VS-8，9)。
　　2.從線葉旋覆花中分離得到4個(gè)新的SLDs(IL-1～4)，它們起源于兩個(gè)不同的倍半萜內(nèi)酯單體通過Diels-Alder[4+2]環(huán)加成反應(yīng)，并通過兩個(gè)C-C鍵（1，3-鏈接，立體構(gòu)型:exo-/endo-構(gòu)型）相連，形成一個(gè)C30骨架的SLDs，其中化合物IL-1為罕

6、見的exo-構(gòu)型的4，5-裂環(huán)-偽愈創(chuàng)木烷-愈創(chuàng)木烷型SLDs;化合物IL-2～4為endo-構(gòu)型的蒼耳烷-愈創(chuàng)木烷型SLDs。
　　3.對(duì)所分離得到的SLDs進(jìn)行LPS誘導(dǎo)的NO生成抑制實(shí)驗(yàn)。結(jié)果顯示，這些SLDs具有較好的抑制NO生成的活性，其中C32型SLDs抑制活性強(qiáng)于陽性藥（氨基胍）。
　　4.對(duì)C32型SLDs進(jìn)行LPS誘導(dǎo)的NF-κB活性的抑制試驗(yàn)，采用雙熒光素酶報(bào)告基因分析方法和Western Blot方法進(jìn)