黃連、萸黃連標(biāo)準(zhǔn)飲片制備技術(shù)規(guī)范及其主要成分抗腫瘤活性研究.pdf

1、黃連是我國常用傳統(tǒng)中藥，其藥用部位為毛茛科植物黃連Coptis chinensis Franch.、三角葉黃連Coptis deltoidea C. Y. Cheng et Hsiao或云連Coptis teeta Wall.的干燥根莖，藥材分別稱為“味連”“雅連”和“云連”。味連主產(chǎn)于湖北、重慶等地，產(chǎn)量大、質(zhì)量好，其中湖北恩施利川味連年產(chǎn)量約占全國產(chǎn)量的50％。黃連始載于《神農(nóng)本草經(jīng)》，列為上品，收載于歷年版《中國藥典》一部，具有清

2、熱燥濕、瀉火解毒之功效，用于濕熱痞滿，嘔吐吞酸，高熱神昏，心火亢盛，心煩不寐，心悸不寧，癰腫疔瘡等病癥。黃連炮制時(shí)因加輔料不同有黃連、酒黃連、姜黃連和萸黃連4種飲片之分，并具有不同的其功效作用，但4種飲片標(biāo)準(zhǔn)主要借用黃連藥材標(biāo)準(zhǔn)，缺乏飲片專屬性質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)，導(dǎo)致其飲片質(zhì)量難以控制、嚴(yán)重影響了臨床療效和用藥安全。另一方面，由于中藥飲片成分和炮制機(jī)制的復(fù)雜性，當(dāng)前采用化學(xué)對照品、對照藥材等標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)的質(zhì)量評價(jià)方法無法反映中藥飲片的科學(xué)內(nèi)涵和特征屬

3、性，特別是對于熟飲片。中藥標(biāo)準(zhǔn)飲片是用來評價(jià)飲片質(zhì)量最合適的“標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)”，具有專屬性強(qiáng)、經(jīng)濟(jì)、獲取方便、應(yīng)用廣泛等優(yōu)點(diǎn)。因此，開展中藥標(biāo)準(zhǔn)飲片作為中藥飲片質(zhì)量評價(jià)標(biāo)準(zhǔn)體系中標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)的基礎(chǔ)研究具有非常重要的科學(xué)意義和實(shí)用價(jià)值。本學(xué)位論文通過對黃連和萸黃連標(biāo)準(zhǔn)飲片的制備工藝，質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)，指紋圖譜進(jìn)行系統(tǒng)研究，并對其主要有效成分抗腫瘤生物活性進(jìn)行了初步研究，以期規(guī)范黃連和萸黃連標(biāo)準(zhǔn)飲片的制備工藝，完善其質(zhì)量控制標(biāo)準(zhǔn)和闡釋其藥效物質(zhì)基礎(chǔ)，為黃連、

4、萸黃連標(biāo)準(zhǔn)飲片的生產(chǎn)及其應(yīng)用提供科學(xué)依據(jù)。
　　1.黃連、萸黃連原形飲片制備工藝研究
　　通過對黃連文獻(xiàn)調(diào)研和實(shí)地調(diào)研，選擇味連為制備黃連及萸黃連標(biāo)準(zhǔn)飲片的原料，確定了味連道地產(chǎn)區(qū)，考察了味連產(chǎn)地加工方法，制定了原料藥材的采集加工技術(shù)規(guī)范；在黃連和萸黃連飲片的傳統(tǒng)制備工藝基礎(chǔ)上，對其凈制、軟化、切制、干燥、篩選等工藝程序進(jìn)行了規(guī)范，確定了技術(shù)參數(shù)，進(jìn)行了批量制備，為制備黃連和萸黃連標(biāo)準(zhǔn)飲片提供了原料飲片。
　　2.黃連

5、、萸黃連標(biāo)準(zhǔn)飲片的均勻化技術(shù)規(guī)范研究
　　采用高效液相色譜法等現(xiàn)代分析方法對不同粉碎方式及粒度的黃連、萸黃連質(zhì)量進(jìn)行綜合分析，確定了其均勻化方法；采用薄層色譜法、高效液相色譜法等現(xiàn)代分析方法開展了環(huán)境因素對黃連、萸黃連標(biāo)準(zhǔn)飲片質(zhì)量的影響研究，為標(biāo)準(zhǔn)飲片的粒度選擇提供科學(xué)依據(jù)。
　　3.黃連，萸黃連標(biāo)準(zhǔn)飲片質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)研究
　　參照2015年版《中國藥典》一部收載黃連的質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)，對黃連和萸黃連標(biāo)準(zhǔn)飲片的性狀、薄層鑒別、檢查（

6、水分、總灰分）、浸出物、含量檢測等項(xiàng)進(jìn)行了研究，分別制訂較完善的質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)，能有效控制黃連，萸黃連標(biāo)準(zhǔn)飲片的質(zhì)量。
　　4.黃連、萸黃連標(biāo)準(zhǔn)飲片指紋圖譜研究
　　參照國家食品藥品監(jiān)督管理總局頒布的“中藥注射劑指紋圖譜”相關(guān)技術(shù)要求，分別制定黃連和萸黃連標(biāo)準(zhǔn)飲片的指紋圖譜。黃連的指紋圖譜標(biāo)示15個(gè)共有峰，萸黃連的指紋圖譜標(biāo)示了18個(gè)共有峰，能有效評價(jià)黃連、萸黃連的質(zhì)量。
　　5.擬定黃連、萸黃連標(biāo)準(zhǔn)飲片制備技術(shù)規(guī)范及質(zhì)量標(biāo)

7、準(zhǔn)草案
　　參照相關(guān)中藥飲片制備工藝和質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)的研究資料，對黃連和萸黃連標(biāo)準(zhǔn)飲片的制備工藝和質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)的研究結(jié)果進(jìn)行了總結(jié)。規(guī)范了黃連和萸黃連標(biāo)準(zhǔn)飲片的制備工藝、擬定了質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)草案，從而為兩種標(biāo)準(zhǔn)飲片的生產(chǎn)及推廣應(yīng)用奠定了良好基礎(chǔ)。
　　6.萸黃連中主要成分抗腫瘤活性篩選研究
　　采用現(xiàn)代分子生物學(xué)研究方法，對萸黃連主要有效成分小檗堿和吳茱萸堿進(jìn)行了抗腫瘤生物活性研究，表明兩者均具有抑制腫瘤細(xì)胞增殖作用，且小檗堿對Hep