巖黃連生物堿類化學成分及其抗腫瘤活性研究.pdf

1、中山大學博士學位論文巖黃連生物堿類化學成分及其抗腫瘤活性研究姓名：程軒軒申請學位級別：博士專業(yè)：生藥學指導教師：楊得坡20080606中山大學博士學位論文1 巖黃連的生物堿類成分研究采用傳統(tǒng)的提取分離手段：正相、反相柱層析、凝膠過濾層析等方法，對巖黃連中的化學成分進行了較系統(tǒng)的分離純化，從巖黃連全草的乙醇提取物中分離得到2 5 個化合物，經光譜( U V 、I R 、1 H ．N M R 、1 3 C 挑很、M S 等) 和化學方法鑒定

2、了其中2 1 個生物堿的結構，其中佗m 1 0 y l a g I m t i l l e 為雙子葉植物中首次得到的化合物，c a n a d k 、d e h y d r o d i S C r e t 鋤沁、s 哪渤r 沁、c o 帥a l l k 、p a l l i d m為該種植物中首次得到的化合物。2 高速逆流色譜法制備巖黃連中的生物堿采用高速逆流色譜法( h i g h ．s p e e dc o u 1 1 ：t e r

3、 C o u 玎e mc h r o m a t o g r 印h y ，H S C C C )進行巖黃連化學成分的制備分離。該法避免了傳統(tǒng)的柱層析分離方法耗時較長、步驟繁多，損失樣品，得率較低的缺點。本研究選擇生物堿富集的正丁醇萃取物作為樣品，先后經過四次H S C C C 分離，得到單體化合物s C o u l e r k 、i S o c o 州i 1 1 e 、d e h y d r o c h e i l a n t h i

4、硒l i n e 、d e h y d r o c a V i d i r l e 、p a l m a t i l l e 、b e r b e r i I l e 。從實驗結果來看，高速逆流色譜法( H S C C C ) 節(jié)約時間、節(jié)省溶劑，基本上實現了短時間內高純度、高得率產品的制備。3 巖黃連的抗腫瘤藥理活性篩選本部分研究包括兩方面內容：細胞毒性和D N A 拓撲異構酶I 抑制活性篩選。在細胞毒性篩選試驗中，采用M T T 法

5、檢測從巖黃連中分離得到的2 1 種生物堿對S 1 8 0 、H e p G 2 、A 5 4 9 、C a c o ．2 四個腫瘤細胞株增殖的抑制作用。實驗結果表明，巖黃連中的生物堿對上述四個腫瘤細胞株均具有不同程度的抑制作用，其中又以對S 1 8 0 和H 印G 2 細胞增殖的抑制較為顯著。經過比較發(fā)現，巖黃連中水溶性季銨堿對腫瘤細胞的抑制活性顯著高于脂溶性叔胺堿。因而預示了水溶性化合物是巖黃連抑制腫瘤細胞增殖的主要活性成分。在抗D