包瘡葉的化學(xué)成分及其抗腫瘤活性研究.pdf

1、包瘡葉[Maesa indica(Roxb.)A.DC.]系紫金牛科(Mysinaceae)杜莖山屬植物,主要分布在中國、.印度、越南等地,國內(nèi)主產(chǎn)于云南南部地區(qū).我國民間將該植物用于治療癌癥,我們經(jīng)流式細(xì)胞術(shù)活性篩選也發(fā)現(xiàn)包瘡葉的含水醇提物具有細(xì)胞周期抑制活性.但該植物的抗腫瘤成分以及相關(guān)活性至今未見研究報道,因此,本論文對其化學(xué)成分及其活性進(jìn)行了研究. 微量快速預(yù)實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明:80﹪含水乙醇適合作提取溶劑；經(jīng)液液萃取分離,可

2、通過用乙酸乙酯和正丁醇萃取,得到含水乙醇提取物的G2/M期抑制活性部位. 據(jù)此,包瘡葉莖皮粉末(4.5 kg)用80﹪乙醇室溫浸提,減壓回收乙醇至無醇味,依次用等量乙酸乙酯和正丁醇萃取,得到了有活性的乙酸乙酯萃取物48 g和正丁醇萃取物260 g.本論文著重對乙酸乙酯萃取物的活性成分進(jìn)行了研究,同時對正丁醇萃取物中皂苷類成分也進(jìn)行了分離和純化,從而得到了較純的包瘡葉總皂苷,并對其抗腫瘤活性作了初步評價. 乙酸乙酯萃取物用

3、硅膠、Sephadex LH-20等柱色譜和制備薄層色譜進(jìn)行分離,從中得到了化合物1～7(見Fig 1).化學(xué)結(jié)構(gòu)用現(xiàn)代波譜學(xué)方法進(jìn)行研究,并將這些化合物分別鑒定為:7,22-二烯-3β-羥基豆甾烷(1)、β-谷甾醇(2)、正十六烷酸(3)、杜莖山酚(4)、大黃酚(5)、1'-正十六烷酸甘油酯(6)和1'-(9順,12順)-十八碳二烯酸甘油酯(7). 采用SRB法結(jié)合細(xì)胞形態(tài)學(xué)檢測的方法,對化合物1～7以及包瘡葉總皂苷對人白血病

4、K562細(xì)胞的抗腫瘤活性進(jìn)行了初步評價.結(jié)果表明:化合物3～7和包瘡葉總皂苷對K562細(xì)胞具有細(xì)胞凋亡誘導(dǎo)以及細(xì)胞增殖抑制等抗腫瘤活性. 綜上,本論文從包瘡葉莖皮中分離鑒定了7個化合物,并經(jīng)實(shí)驗(yàn)初步證實(shí),其中5個化合物3～7具有抑制人癌細(xì)胞K562增殖的抗腫瘤活性.同時,經(jīng)對該植物皂苷成分的初步分離和活性測試,初步證實(shí)皂苷為該植物的另一類重要的抗腫瘤活性成分.在化合物1～7中,3和5～7為首次從包瘡葉以及杜莖山屬植物中分到,4和