豬圓環(huán)病毒2型吉林株的分離與鑒定及ORF2基因序列分析.pdf_第1頁
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文檔簡介

1、分類號：$8582826592密級：無y932437單位代碼：1D193學號；2003202嘻敞居案巖獸碩士學位論文豬圓環(huán)病毒2型吉林株的分離與鑒定及ORF2基因序列分析IsolationandIdentificationofPorcineCircovirusType2IsolatedinJilinProvinceandSequenceAnalysisofORF2Gene研究生：崔瞳垡指導專業(yè)研究所在教師：蛆掛堂煎援名稱：亟墮盞醫(yī)堂方向

2、：動物痘至生學院：一動麴抖鹽堂睦2006年6月IsolationandIdentificationofPorcineCircovirusType2IsolatedinJilinProvinceandSequenceAnalysisofORF2GeneAbstractAccordingtothepublishedgenesequenceofporcinecircovirus(Pcv)fromGenbank，apairofprimerspe

3、cifictoporcinecircovirustype2(PCV2)weredesignedandsynthesizedLymphnodesandspleenofaswinesuspectedPMWSbrokeoutinsomeporcinefarminJilinprovinceweredetectedbypolymerasechainreaction(PCR)Theresultshowedthat2PCV2positivesampl

4、esweredetectedin9samplesTheaveragepositiverateis222％ItapprovedthatPMWSexistedJilinprovinceThePCV2positivesampleswereabraded，sedimentedbycentrifugation，filteredandinoculatedtothePK一15cellline，whichwerenotcontaminatedbyPCV

5、lTheextractviralDNAinPK15cellsafter6passageswasdetectedwithapairofprimersofPCV2andobtainedpositiveresultTheresultshowedthatthePK15cellsfreeofPCVwereinfectedbyPCV2Thentheviralsampleswerepuredandobservedwithelectronicmicro

6、scopeTheywere17nmindiameterInthecytoplasm，thespecificfluorescenceparticleswereobservedinthefrozensectionstrainedbyindirectimmunofluorescencetestspecifictoPCV2Accordingtoaboveresults，theisolatedstrainbelongstoPVC2andnamed

7、PCV2JL01and02strainAccordingtothepublishedORF2genesequenceofPCV2，apairofprimerweredesignedsynthesizedandORF2genewasamplifiedbyPCRTheproductwasabout07kbinsizedetectedbyagarosegelelectrophoresisItwasaccordwiththeanticipate

8、dfragmentTheproductswerepurifiedandsequencedTheresultshowedthattheORF2genesofJL01andJL02isolatedstrainsare702bpinsizeandtheyshared999％homologywiththereferentialstrainsand919994％homologywithotherisolatedstrainsThattheviru

9、seswereisolated，identifiedandsequenceanalysisofORF2genewillsupplygoodfoundationforaetiologydiagnosisandcontrolofPCV2AndtheresultalsogivessomehelponresearchingthebioactivityofORF2protein—codeandestablishingthediagnosticki

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