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1、中國(guó)農(nóng)業(yè)大學(xué)博士學(xué)位論文豬圓環(huán)病毒Ⅱ型的分離與鑒定及全基因組序列測(cè)定與分析姓名:呂艷麗申請(qǐng)學(xué)位級(jí)別:博士專業(yè):預(yù)防獸醫(yī)學(xué)指導(dǎo)教師:楊漢春郭鑫2002.6.1璺查些查蘭堡主蘭絲絲壅英文摘要SummaryPhDStudent:LUYanliSupervisor:ProlessorYangHanchunAssociateprofessorGuoxinMajor:PreventiveVeterinaryMedicinePorcinecircov
2、irustype2isanewemergencevirusItWaSlinkedtopostweaningmultisystemiewastingsyndrome(PMWS),arecentlyidentifieddiseaseofpigsAspecificPCRforPCV2WasdevelopedtotestPCV2DNAfromeliniealsamplesinthispaperThePCV2wasisolatedandident
3、ifiedthroughPeR,indirectfluorescentantibodytestandtransmissionelectronmicroscopy(TEM)examinationThecompletegenomeofthetingeisolates,BFHRandBX,werealsosequencedandanalysis1Twoprimersweredesignedbasedonthepublishedgenomics
4、equencesofPCVIandPCV2andaspecificPCRforPCV2WaSdevelopedTheexpectedDNAfragmentswerereplicatedfromthelymphnodeandspleensamplesthatweresimilartothosepigswitllPMWSThesePCRproductswereidentifiedwimrestrictenzymeEcoRI111eposit
5、ivesamplesthatwereexaminedbyPCRwerehomogenateandthesupematantwereinoculatedtothePK15cellsthatwerenotcontaminatedwithPCVTheresultsofthereplicationofthePCV2wereshownbyPCRmethodTheceilsinoculatedwiththefourthgenerationPCV2w
6、ereharvestedtomakesectionforTEMexamination111einclusionbodyswerediscoveredinthec),toplasmaespeciallyintheperinuelearcytoplaSmThePCV2replicatedOilPK15cellswerealsoexaminedthroughtheindirectfluorescentantibodytestThespecif
7、icimmunofiuoresc2ncewaswatchedmostlyinthecytoplasma2TheDNAfragmentswimthelengthof989bpor1165bpnucleotideswereamplifiedbyPeRfromtheinfectedPK一15cellsTheywereclonedintopGEMTeasyvectorrespectivelyBeingconfirmedbydigestionwi
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