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1、動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)和單克隆抗體的制備動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)和單克隆抗體的制備學(xué)習(xí)目標(biāo):學(xué)習(xí)目標(biāo):1、舉例說(shuō)出動(dòng)物細(xì)胞融合與單克隆抗體的原理和應(yīng)用。學(xué)習(xí)重點(diǎn)學(xué)習(xí)重點(diǎn):1、單克隆抗體的制備和應(yīng)用。2、單克隆抗體的制備過(guò)程。一、預(yù)習(xí)案一、預(yù)習(xí)案1、動(dòng)物細(xì)胞的融合動(dòng)物細(xì)胞的融合(1)概念:指或動(dòng)物細(xì)胞結(jié)合形成一個(gè)細(xì)胞的過(guò)程,也稱為細(xì)胞雜交。(2)結(jié)果:形成細(xì)胞。(3)過(guò)程:不同的兩個(gè)細(xì)胞細(xì)胞。(4)意義:克服了雜交的不親和性,成為研究、、腫瘤和生物培育的重要手
2、段。2、單克隆抗體單克隆抗體(1)抗體:由淋巴細(xì)胞(漿細(xì)胞)產(chǎn)生,成分為球蛋白,具有。從血清中分離出來(lái)的抗體產(chǎn)量低、純度低、特異性差。(2)單克隆抗體的制備a.過(guò)程b.雜交瘤細(xì)胞的特點(diǎn):既能大量,又能產(chǎn)生。A單個(gè)骨髓瘤細(xì)胞增殖產(chǎn)生的抗體B單個(gè)淋巴細(xì)胞增殖產(chǎn)生的抗體C單個(gè)雜交瘤細(xì)胞增殖產(chǎn)生的高度單一的抗體D單個(gè)抗體通過(guò)克隆,產(chǎn)生大量抗體2、細(xì)胞合成DNA有D和S兩種途徑,其中D途徑能被氨基嘌呤阻斷。人淋巴細(xì)胞由這兩種DNA的合成途徑,但一
3、般不分裂增殖。骨髓瘤細(xì)胞盡管沒(méi)有S途徑,但能不斷的分裂增殖,將這兩種細(xì)胞在試管的培養(yǎng)液中混合,加聚乙二醇促融,再加入氨基嘌呤可篩選出某種細(xì)胞。在培養(yǎng)液中存在的細(xì)胞種類及篩選出的細(xì)胞分別是(細(xì)胞融合是僅考慮兩個(gè)細(xì)胞的融合)A三種雜交瘤細(xì)胞B五種骨髓瘤細(xì)胞C五種雜交瘤細(xì)胞D一種雜交瘤細(xì)胞3.(多選)將小鼠骨髓瘤細(xì)胞與一種B淋巴細(xì)胞融合,可使融合的細(xì)胞經(jīng)培養(yǎng)產(chǎn)生單克隆抗體,其依據(jù)是AB淋巴細(xì)胞可以產(chǎn)生抗體,但不能無(wú)限增殖B淋巴細(xì)胞只有與骨髓瘤
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