藥物分析六雜質(zhì)

1、24.3.19,1,第三章藥物的雜質(zhì)檢查,第三章 藥物的雜質(zhì)檢查,第一節(jié) 概述（雜質(zhì)和雜質(zhì)的限量檢查）第二節(jié) 一般雜質(zhì)的檢查方法第三節(jié) 特殊雜質(zhì)檢查方法,3、甚至對(duì)人體健康有害的物質(zhì)。,1、藥物中存在的無(wú)治療作用,2、影響藥物的療效和穩(wěn)定性,,影響藥物質(zhì)量,反應(yīng)藥物生產(chǎn)過(guò)程中存在的問(wèn)題,雜質(zhì)檢查,鑒別,真?zhèn)?純度,,,雜質(zhì)檢查的目的：保證用藥的安全有效；為生產(chǎn)、流通過(guò)程的質(zhì)量保證和企業(yè)管理提供依據(jù)。,藥物研

2、究設(shè)計(jì)、開(kāi)發(fā)實(shí)施,工廠 企管,藥品原料藥典檢驗(yàn),藥品劑型藥典檢驗(yàn),藥品使用安全、有效,,,6,第一節(jié). 概述 雜質(zhì)和雜質(zhì)的限量檢查,一、藥物純度的概念與要求二、藥物中雜質(zhì)的來(lái)源與種類三、雜質(zhì)的限量,一、藥物純度的概念與要求,概念雜質(zhì)來(lái)源雜質(zhì)危害檢查雜質(zhì)要求與純度控制藥物雜質(zhì)（或純度）與新藥研究純度控制,8,1、純度（Purity）：藥物純凈的程度。 它是判定藥品質(zhì)量?jī)?yōu)劣的一個(gè)重要指標(biāo)。對(duì)藥物純度

3、的要求是隨著生產(chǎn)工藝的改進(jìn)、變化以及分離分析技術(shù)的發(fā)展而不斷提高、完善的。,,一、藥物的純度要求,2、雜質(zhì)來(lái)源,生產(chǎn) 貯藏過(guò)程中引入 過(guò)程中引入使用試劑、原料 光、熱分解中間體、副產(chǎn)物例

4、: (1)aspirin中salicylic acid (2)生產(chǎn)中的 HCl, H2SO4 ?胃刺激?變色 ? ?

5、 氯化物 硫酸鹽 無(wú)毒,但使藥物含量降低,,,,腸溶片,3、雜質(zhì)危害,沒(méi)有治療作用影響藥物的療效、穩(wěn)定性對(duì)人體健康有害檢查雜質(zhì)、控制純度必要性 確保用藥安全、有效，保證藥品質(zhì)量,11,對(duì)于規(guī)定中的各種雜質(zhì)檢查項(xiàng)目，系

6、指該藥品在按既定工藝進(jìn)行生產(chǎn)和正常貯藏過(guò)程中可能含有或產(chǎn)生并需要控制的雜質(zhì)（如殘留溶劑、有關(guān)物質(zhì)等）；改變生產(chǎn)工藝時(shí)需另考慮增、修訂有關(guān)項(xiàng)目?！袊?guó)藥典凡例,藥品質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)中的雜質(zhì)不包括變更生產(chǎn)工藝或變更原輔料而產(chǎn)生的新的雜質(zhì)，也不包括參入或污染的外來(lái)物質(zhì)。,4、雜質(zhì)檢查要求與純度控制,12,藥物性狀理化常數(shù)含量測(cè)定等,主要指標(biāo),雜質(zhì),雜質(zhì)檢查項(xiàng)目名稱檢查方法雜質(zhì)允許限量,其它指標(biāo),,,,,,純度評(píng)價(jià),收載在“檢查”項(xiàng)下,

7、“氯化物”“砷鹽”“有關(guān)物質(zhì)”,綜合整體評(píng)價(jià)藥物純度,13,藥物純度、穩(wěn)定性,新藥質(zhì)量研究的重要組成部分可能引入雜質(zhì)？ 影響藥物變質(zhì)的因素？分離，結(jié)構(gòu)？ 變質(zhì)的過(guò)程？毒性？ 分解的產(chǎn)物？控制的方法？ ?選擇適合的貯藏條件,,,,5、藥

8、物雜質(zhì)（或純度）與新藥研究,分析技術(shù)的發(fā)展,14,雜質(zhì),制劑,安全性有效性,藥理學(xué)、微生物學(xué)、免疫學(xué)、生物化學(xué)等,質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)中檢查項(xiàng),藥物分析,藥劑學(xué),,,,,,,,,雜質(zhì)檢查和質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)的關(guān)系,不能用試劑代替藥品,藥物的純度與化學(xué)試劑的純度,藥物的純度考慮雜質(zhì)的生理作用，藥品只有兩個(gè)等級(jí)：合格或不合格。 化學(xué)試劑有很多等級(jí)，如基準(zhǔn)試劑、優(yōu)級(jí)純（GR）、分析純（AR）、化學(xué)純（CP）、色譜純、光譜純。,二、藥物中雜質(zhì)的來(lái)源和

9、種類雜質(zhì)的主要來(lái)源,,,(一)生產(chǎn)過(guò)程中引入 原料藥生產(chǎn)（合成：未反應(yīng)完的原料、反應(yīng)的中間體、副產(chǎn)物、殘留溶劑；提取：藥物結(jié)構(gòu)、性質(zhì)相近的物質(zhì)、殘留溶劑） 制劑生產(chǎn)*注意：生產(chǎn)設(shè)備也可能引入雜質(zhì),例:1. 殘留溶媒 2.生產(chǎn)中所用金屬器皿、裝置以及其他不耐酸、堿的金屬工具所帶來(lái)的雜質(zhì)?金屬雜質(zhì) 3. 鹽酸普魯卡因注射劑?水解、高溫滅菌?對(duì)氨基苯甲酸;二乙氨基乙醇

10、,(二)貯藏過(guò)程,二、藥物中雜質(zhì)的來(lái)源和分類雜質(zhì)的主要來(lái)源,,,(一)生產(chǎn)過(guò)程中引入,易發(fā)生水解的結(jié)構(gòu)：環(huán)酰胺、苷類、酯、內(nèi)酯、酰胺易發(fā)生氧化的結(jié)構(gòu)：醛基、長(zhǎng)鏈共軛雙鍵、酚羥基、 巰基、亞硝基,(二)貯藏過(guò)程(外界條件，微生物)溫度 濕度日光 空氣水解、氧化、分解、異構(gòu)化、晶型轉(zhuǎn)變、聚合、潮解、發(fā)霉有關(guān)物質(zhì),,,18,1）按雜質(zhì)來(lái)源：一般雜質(zhì)和特殊雜質(zhì)。 一般雜質(zhì)：自然界分

11、布廣泛、在多種藥物的生產(chǎn)和儲(chǔ)藏過(guò)程中容易引入的雜質(zhì)。 特殊雜質(zhì)：指在特定藥物的生產(chǎn)和貯藏 過(guò)程中容易引入的雜質(zhì)。2）按雜質(zhì)理化性質(zhì)：無(wú)機(jī)雜質(zhì)，有機(jī)雜質(zhì)和殘留溶劑。3）按雜質(zhì)毒性：信號(hào)雜質(zhì)和毒性雜質(zhì)。,（三）雜質(zhì)的種類,雜質(zhì)分類,一般雜質(zhì)：自然界分布較廣泛，容易引入——酸、堿、水分、來(lái)源 氯化物、硫酸鹽、砷鹽、重金屬——檢查方法—中國(guó)藥典附錄

12、 特殊雜質(zhì)：個(gè)別藥物的生產(chǎn)和貯藏過(guò)程中引入——檢查方法收藏在該藥 質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)中

13、 無(wú)機(jī)雜質(zhì)：氯化物、硫酸鹽、硫化物、氰化物、重金屬性質(zhì) 殘留溶劑 有機(jī)雜質(zhì)：有機(jī)藥物中引入原料、中間體、副產(chǎn)物、分解產(chǎn)物 異構(gòu)體 信號(hào)雜質(zhì)：一般無(wú)害，含量多少?藥物純度水平，氯化物、硫酸鹽毒性 毒性雜質(zhì)：重金屬、砷鹽、氰化物?應(yīng)嚴(yán)格控制，保證用藥安全,,,,說(shuō)明

14、：,1.藥典未規(guī)定的雜質(zhì)：一般不需要檢查。2.遇特殊情況：需要進(jìn)一步追蹤、檢查。如：改變了原料、生產(chǎn)方法。3.新藥研究：要對(duì)純度、穩(wěn)定性進(jìn)行考察。,藥典中藥物雜質(zhì)檢查項(xiàng)目的前提：GMP,,按既定工藝生產(chǎn)按正常條件貯藏,藥典中藥物雜質(zhì)檢查項(xiàng)目未列入的雜質(zhì),含量極少臨床限量允許較寬,從生產(chǎn)實(shí)踐到檢驗(yàn)方法，認(rèn)識(shí)不夠,,時(shí)代發(fā)展,22,三、雜質(zhì)的限量,*1．雜質(zhì)限量的概念 在不影響藥物療效和不發(fā)生毒性的前提下，藥物中

15、所含雜質(zhì)的最大允許量，叫做雜質(zhì)限量。通常用百分之幾（％）或百萬(wàn)分之幾（ppm）來(lái)表示。 藥物中雜質(zhì)的檢查，一般也不要求測(cè)定其含量，而只檢查雜質(zhì)的量是否超出限量——雜質(zhì)限量檢查（Limit Test),雜質(zhì)量 ≤ 雜質(zhì)限量 ＜ 雜質(zhì)量,,,藥品合格,藥品不合格,24.3.19,24,2.雜質(zhì)限量制定,砷：不超過(guò)百萬(wàn)分之一重金屬：不超過(guò)百萬(wàn)分之五十,,依據(jù)：,雜質(zhì)自身的性質(zhì)生產(chǎn)能達(dá)到的水平參照各國(guó)藥典慣例,3.雜質(zhì)限量的檢查,

16、1）與雜質(zhì)對(duì)照品溶液進(jìn)行對(duì)比2）以檢測(cè)條件下正反應(yīng)的靈敏度控制,24.3.19,25,,3.雜質(zhì)限量的檢查,1）與雜質(zhì)對(duì)照品溶液進(jìn)行對(duì)比,一定量被檢雜質(zhì)的對(duì)照品溶液,一定量供試品溶液,,相同條件：平行原則試劑相同、反應(yīng)溫度相同、放置時(shí)間等相同,,,特點(diǎn)：不需知道雜質(zhì)的準(zhǔn)確含量,2）以檢測(cè)條件下正反應(yīng)的靈敏度控制 在供試品溶液中加入試劑，在一定條件下反應(yīng)，觀察有無(wú)正反應(yīng)出現(xiàn)，以不出現(xiàn)正反應(yīng)為合格，即以該檢測(cè)條件下反應(yīng)

17、的靈敏度來(lái)控制雜質(zhì)限量。例：純化水中檢查氯化物，是在50ml水中加入硝酸與硝酸銀試液，不得發(fā)生渾濁。由于50ml水中含有0.2mg的CL-時(shí)，所顯渾濁已比較明顯，所以此檢查限制了純化水中氯化物的含量小于0.2mg/50ml=0.004mg/ml，4ug/ml。,24.3.19,27,,4．雜質(zhì)限量的計(jì)算,28,示例：,例1.茶苯海明中的氯化物的檢查取本品0.30g置200ml量瓶中，加水50ml時(shí)、氨試液3ml和10%硝酸溶液6ml

18、時(shí)，置水浴上加熱5min，加硝酸銀試液25ml，搖勻，再置水浴上加熱15min，并時(shí)時(shí)振搖，放冷，加水稀釋至刻度，搖勻， 放置15min，濾過(guò)，取續(xù)濾液25ml置納氏比色管中，加稀硝酸10ml，加水稀釋成50ml，搖勻，在暗處放置5min，與標(biāo)準(zhǔn)氯化鈉溶液（10μgCL/ml）1.5ml制成的對(duì)照液比較，求氯化物的限量。,,29,例1.茶苯海明中的氯化物的檢查已知：S = 0.3g×25/200；C = 10μg/ml；

19、V = 1.5ml求： L = ？ 解：,,*注意:單位要統(tǒng)一,24.3.19,30,,例2．谷氨酸鈉中重金屬的檢查取本品1.0g，加水23ml溶解后，加醋酸鹽緩沖液（pH3.5）2ml，依法檢查，與標(biāo)準(zhǔn)鉛溶液（10μgPb/ml）所顯顏色相比較，不得更深重金屬限量為百萬(wàn)分之十，求取標(biāo)準(zhǔn)鉛溶液多少毫升？,31,例2．谷氨酸鈉中重金屬的檢查已知：S=1.0g；C=10μg/ml；L= 10×10-6求： V =

20、？解：,,24.3.19,32,第二節(jié) 一般雜質(zhì)的檢查方法,氯化物檢查法硫酸鹽檢查法鐵鹽檢查法重金屬檢查法砷鹽檢查法溶液顏色檢查法,一般雜質(zhì)廣泛存在于藥物中，中國(guó)藥典把檢查方法收載于附錄中,易炭化物檢查法溶液澄清度檢查法熾灼殘?jiān)鼨z查法干燥失重測(cè)定法水分測(cè)定法殘留溶劑測(cè)定法,一般雜質(zhì)檢查規(guī)則,《藥品檢驗(yàn)操作標(biāo)準(zhǔn)》規(guī)定：1. 遵循平行操作原則（1）儀器的配對(duì)性 如納氏比色管應(yīng)配對(duì)，刻度線高低相差不超過(guò)2mm，

21、砷鹽檢查時(shí)導(dǎo)氣管長(zhǎng)度及孔的大小要一致（2）對(duì)照品與供試品的同步操作,2. 正確的取樣及供試品的稱量范圍 ?1g不超過(guò)±2%，＞1g不超過(guò)±1% 3. 正確的比色、比濁方法 4. 檢查結(jié)果不符合規(guī)定或在限度邊緣時(shí)應(yīng)對(duì)供試管和對(duì)照管各復(fù)查二份,一、氯化物(Chloride)的檢查法,,24.3.19,36,一、氯化物的檢查法,1．原理*,,氯化物在硝酸酸性溶液中與硝酸銀試液作用，產(chǎn)生氯化銀白色渾濁液，與一定量標(biāo)準(zhǔn)

22、氯化鈉溶液相同條件下生成的氯化銀渾濁液比較，判斷供試品中的氯化物是否超過(guò)了限量,2.方法：Ch.P藥典附錄 除另有規(guī)定外，取各藥品項(xiàng)下規(guī)定量的供試品，加水溶解使成25ml（溶液如顯堿性，可滴加硝酸使成中性），再加稀硝酸10m1；溶液如不澄清，應(yīng)濾過(guò)；置50ml納氏比色管中，加水使成約40m1，搖勻，即得供試溶液。另取各藥品項(xiàng)下規(guī)定量的標(biāo)準(zhǔn)氯化鈉溶液，置50ml納氏比色管中，加稀硝酸10m1，加水使成40m1，搖勻，即

23、得對(duì)照浴液。,于供試溶液與對(duì)照溶液中，分別加入硝酸銀試液1.0m1，用水稀釋使成50m1，搖勻，在暗處放置5分鐘，同置黑色背景上，從比色管上方向下觀察，比較，即得,24.3.19,39,3．條件控制* ：,(1)標(biāo)準(zhǔn)液：NaCl標(biāo)準(zhǔn)液（每1ml相當(dāng)于10μg的CL—）(2)所加試劑試液的作用和目的：稀硝酸酸性溶液50ml供試溶液中含稀硝酸10ml為宜,氯化物檢查,,,避免弱酸銀鹽（碳酸銀，磷酸銀），及氧化銀沉淀形成而干擾

24、,加速氯化銀沉淀的生成并形成較好的乳濁,(3)操作：觀察前避光（暗處放置5 min）避免光線使單質(zhì)銀析出(4)觀察方法：氯化銀沉淀為白色，黑色背景，從比色管上向下 (5)供試液和對(duì)照液稀釋后，再加硝酸銀溶液，使生成白色渾濁而不是白色沉淀(6)取樣原則：便于觀察或測(cè)量結(jié)果(50μg～80μg) /50ml CL- ，即標(biāo)準(zhǔn)液5 ～8ml，渾濁梯度明顯。）根據(jù)這個(gè)量選擇供試品的量。,氯化物檢查,41,4．供試品處理*目

25、的：排除干擾方法：（1）供試品液混濁：過(guò)濾，用含硝酸的水洗濾紙，以保證氯化物的完全轉(zhuǎn)移。（2）供試品有色：,氯化物檢查,,,根據(jù)藥物的化學(xué)性質(zhì)，設(shè)計(jì)適當(dāng)?shù)呐懦蓴_的方法。,兩份供試品溶液：1.加過(guò)量硝酸銀→洗滌沉淀→無(wú)氯化物的有色溶液→加入標(biāo)準(zhǔn)氯化鈉→對(duì)照品。2.按規(guī)定方法檢查。,24.3.19,42,4．供試品處理*目的：排除干擾方法：（3）有機(jī)藥物中氯化物的檢查溶于水的有機(jī)藥物 不溶于水的有機(jī)藥物,氯化物

26、檢查,（4）有機(jī)氯雜質(zhì)：先破壞，再檢查 （注意與有機(jī)藥物中的氯化物區(qū)別）,,直接檢查,,加水振搖→氯化物溶解→濾除不溶物加熱溶解供試品→冷→沉淀→過(guò)濾→取濾液藥物在稀乙醇或丙酮 中溶解→檢查,二、硫酸鹽檢查法,,24.3.19,44,1.原理*,,硫酸鹽在鹽酸酸性溶液中與氯化鋇試液作用，產(chǎn)生硫酸鋇白色渾濁液，與一定量標(biāo)準(zhǔn)硫酸鉀溶液相同條件下生成的渾濁比較，判斷供試品中的硫酸鹽是否超過(guò)了限量,2.方法：講義或Ch.P

27、,硫酸鹽,45,3.條件控制： 標(biāo)準(zhǔn)硫酸鉀溶液（每1ml相當(dāng)于0.1mg的SO42-），每50ml溶液中含0.1mg ～ 0.5mg 的SO42-）渾濁明顯，相當(dāng)于1.0ml ～ 5.0ml的標(biāo)準(zhǔn)溶液。 酸度（pH≈1）、稀鹽酸防止碳酸鋇或磷酸鋇沉淀的產(chǎn)生,硫酸鹽,,加入氯化鋇試液后，應(yīng)立即充分搖勻,防止局部過(guò)濃，影響產(chǎn)生渾濁的程度,,4．供試品處理目的：排除干擾方法：與氯化物類似供試品如果需要過(guò)濾，用加入

28、鹽酸的酸性水洗滌濾紙上的硫酸鹽,三、鐵鹽檢查法,,,24.3.19,48,鐵鹽檢查法,1．原理,,（一）硫氰酸鹽法*,鐵鹽在鹽酸酸性溶液中與硫氰酸銨生成紅色可溶性硫氰酸鐵配位離子，與一定量標(biāo)準(zhǔn)鐵溶液同法處理后所呈顏色比較，判斷供試品鐵鹽是否超限,2.方法：講義或Ch.P，藥典附錄 除另有規(guī)定外，取各藥品項(xiàng)下規(guī)定量的供試品，加水溶解使成25ml，移置50ml納氏比色管中，加稀鹽酸4ml與過(guò)硫酸銨50mg，用水稀釋使成35m1后，

29、加30%硫氰酸銨溶液3ml，再加水適量稀釋成50ml，搖勻；如顯色，立即與標(biāo)準(zhǔn)鐵溶液一定量制成的對(duì)照溶液（取各藥品項(xiàng)下規(guī)定量的標(biāo)準(zhǔn)鐵溶液，置50ml納氏比色管中，加水使成25ml，加稀鹽酸4ml與過(guò)硫酸銨50mg，用水稀釋使成35m1后，加30%硫氰酸銨溶液3ml，再加水適量稀釋成50ml，搖勻）比較，即得。,24.3.19,50,3.條件控制： 標(biāo)準(zhǔn)鐵溶液：硫酸鐵銨〔FeNH4(SO4)2·12H2O〕,標(biāo)準(zhǔn)鐵溶液（每1

30、ml相當(dāng)于10ug的Fe3+ ），每50ml溶液中含5ug ～ 90ug 的Fe3+ 時(shí)，溶液的吸收度與濃度呈良好線形關(guān)系。 目視比色，以50ml溶液中含10ug ～ 50ug 的Fe3+ 渾濁明顯，易于區(qū)別。,51,3.條件控制： 標(biāo)準(zhǔn)鐵溶液：硫酸鐵銨〔FeNH4(SO4)2·12H2O〕,供試品反應(yīng)加入試液作用：,增加生成配位離子穩(wěn)定性,+硫酸，防止鐵鹽水解,鹽酸,防止Fe3+水解,50ml中加入稀鹽酸4ml,過(guò)

31、硫酸銨（氧化劑）,氧化 Fe2+成 Fe3+,防止由于光線使硫氰酸鐵還原或分解,過(guò)量硫氰酸銨,提高反應(yīng)靈敏度 消除氯化物等的干擾,24.3.19,52,4．供試品處理方法：,（1）色調(diào)不一致或顏色較淺 加正丁醇或異戊醇提取→分別取醇層→比色。,,硫氰酸鐵配位離子在正丁醇等中的溶解度大,增加酸度；增加硫氰酸銨的量；用正丁醇提取后比色,,（2）其它能與Fe3+或SCN-反應(yīng)的酸根陰離子，CL-、枸櫞酸根

32、,（3）某些有機(jī)藥物實(shí)驗(yàn)條件下不溶解→熾灼→殘?jiān)婪z查。,24.3.19,53,（二）巰基醋酸法*,方法靈敏度高，試劑較貴,試劑巰基醋酸還原 Fe3+→ Fe2+，在氨堿性溶液中進(jìn)一步與 Fe2+ 作用生成紅色配位離子，與一定量標(biāo)準(zhǔn)鐵溶液經(jīng)同法處理后產(chǎn)生的顏色進(jìn)行比較，以限制鐵的量。,,四、重金屬(Heavy metals)檢查法,重金屬檢查法,,56,第一法、硫代乙酰胺法,2.原理和方法 對(duì)照法,,1.適用范圍,在實(shí)驗(yàn)條件下，

33、供試液澄清、無(wú)色，對(duì)檢查無(wú)干擾或經(jīng)處理后對(duì)檢查無(wú)干擾的藥物。即溶于水、稀酸和乙醇的藥物。,重金屬檢查,,方法：講義或Ch.P，藥典附錄 除另有規(guī)定外，取25ml納氏比色管兩支，甲管中加標(biāo)準(zhǔn)鉛溶液一定量與醋酸鹽緩沖液(pH3.5) 2ml后，加水或各藥品項(xiàng)下規(guī)定的溶劑稀釋使成25m1，乙管加入按各藥品項(xiàng)下規(guī)定方法制成的供試液25m1；再在甲乙兩管中分別加硫代乙酰胺試液各2ml，搖勻，放置2min，同置白紙上，自上向下透視，乙管中

34、顯出的顏色與甲管比較，不得更深。,,（1）標(biāo)準(zhǔn)硝酸鉛溶液（每1ml相當(dāng)于10ug的Pb2+） 用硝酸鉛配制標(biāo)準(zhǔn)鉛貯備液（加硝酸防止Pb2+水解），臨用前加水稀釋而成。 適宜比色范圍為27ml溶液中含10～20?g的Pb2+，相當(dāng)于加入標(biāo)準(zhǔn)鉛溶液1～2ml。,3. 條件控制,（2） pH值為3～3.5硫化鉛沉淀完全 本法用2ml pH3.5的醋酸鹽緩沖液控制溶液的弱酸性。 供試品如果用強(qiáng)酸溶解、或用過(guò)

35、強(qiáng)酸處理過(guò)→氨水→酚酞中性（無(wú)色）,3. 條件控制,,60,重金屬,4.供試品處理供試品有色：外消色法消除（在對(duì)照管中加稀焦糖溶液或其他無(wú)干擾的有色溶液。）內(nèi)消色法。(2) 供試品有微量Fe3+ Fe3+會(huì)氧化硫化氫生成單質(zhì)硫，干擾比色，加抗壞血酸（Vc）或鹽酸羥胺（0.5～1.0g）使Fe3+ 還原成Fe2+離子，消除干擾再檢查。,(3)供試品為鐵鹽 在相對(duì)密度1.103～1.105的鹽酸中使大部分

36、Fe3+生成 再加氨試液，使溶液成堿性，用氰化鉀掩蔽殘留的微量鐵鹽后，加硫化鈉試液檢查鉛鹽(4)供試品本身也能生成不溶性硫化物 根據(jù)具體情況特殊處理。若藥物本身能生成不溶性硫化物時(shí)，可加入掩蔽劑消除干擾。如ZnSO4中重金屬的檢查，要在堿性下加KCN掩蔽Zn2+后，再依第三法檢查,重金屬,24.3.19,62,第二法、熾灼后的硫代乙酰胺法,2.原理,1.適用范圍,在水、乙醇中難溶，或能與重金屬離子形成配位化合物的有機(jī)藥

37、物。,將供試品破壞后（如熾灼殘?jiān)?xiàng)下遺留的殘?jiān)?，加硝酸加熱處理，使有機(jī)物分解、破壞完全后，再按第一法進(jìn)行檢查,重金屬,操作方法,重金屬,24.3.19,64,3.注意事項(xiàng),重金屬,1）熾灼溫度：500～600℃2）加入試劑的干擾：硝酸、鹽酸3）特殊藥物對(duì)容器的腐蝕含鈉及氟的有機(jī)藥物應(yīng)使用鉑坩堝、石英坩堝或硬質(zhì)玻璃蒸發(fā)皿（因可腐蝕瓷坩堝，帶入大量重金屬）,65,第三法、硫化鈉法,2.原理,1.適用范圍,適用于溶于堿而不溶于稀酸或在

38、稀酸中生成沉淀的藥物。如磺胺類、巴比妥類。,在堿性介質(zhì)中，以硫化鈉為顯色劑，使Pb2+生成PbS微粒的混懸液，與一定量的標(biāo)準(zhǔn)鉛溶液經(jīng)同法處理后所呈顏色比較進(jìn)行檢查,重金屬,24.3.19,66,第三法、硫化鈉法,3.注意事項(xiàng),硫化鈉對(duì)玻璃有一定的腐蝕性；溶液放置過(guò)久會(huì)產(chǎn)生絮狀物，試液應(yīng)臨用新制。,重金屬,24.3.19,67,第四法、微孔濾膜法,使重金屬生成的硫化物富集于微孔濾膜上，比較供試品和一定量的標(biāo)準(zhǔn)鉛溶液經(jīng)同法處理后所產(chǎn)生的色斑

39、深淺，確定重金屬是否超限。,1.適用范圍,適用于2 ~ 5 µg重金屬雜質(zhì)檢查，提高靈敏度。,2.原理,重金屬,第一法：10-20ug,24.3.19,68,3.注意事項(xiàng),供試溶液有顏色或渾濁，應(yīng)用濾膜進(jìn)行預(yù)濾 ；濾膜污染，換濾膜,A：濾器上蓋部分B：連接頭；C：墊圈D：孔徑3.0μm的濾膜E：尼龍墊網(wǎng)(孔徑不限)F：濾器下部,重金屬,24.3.19,69,*五、砷鹽(Arsenic)檢查法 砷鹽——生

40、產(chǎn)過(guò)程使用無(wú)機(jī)試劑引入,標(biāo)準(zhǔn)砷溶液： 三氧化二砷方法：中國(guó)藥典檢查法第一法：古蔡法（Gutzeit法）第二法：二乙基二硫代氨基甲酸銀法（Ag—DDC法） （silver diethyldithio-carbamate）所加試劑的作用： 碘化鉀、氯化亞錫、醋酸鉛棉的作用儀器裝置,(一)古蔡法,1. 原理： Zn + H+ ??H2? + Zn2+

41、 新生態(tài)氫 AsO33- ??AsH3 ? 砷鹽 HgBr2 (溴化汞試紙) As3+ As(HgBr)3 (黃色)

42、 AsH(HgBr)2 (棕色) As2Hg3 (棕黑色),,,,砷斑,,與標(biāo)準(zhǔn)砷斑比較,71,古蔡法 （Gutzeit）：,醋酸鉛棉花： 吸收HsS,2、裝置,A.砷化氫發(fā)生瓶 B.中空磨口塞 C.導(dǎo)氣管 D.具孔有機(jī)玻璃旋塞 E.具孔有機(jī)玻璃旋塞蓋,

43、3、注意事項(xiàng),(1)標(biāo)準(zhǔn)砷溶液:三氧化二砷配制儲(chǔ)備液標(biāo)準(zhǔn)砷溶液臨用前新配：1?gAs/1ml 中國(guó)藥典規(guī)定: 標(biāo)準(zhǔn)砷斑用2ml標(biāo)準(zhǔn)砷溶液(2 ?gAs) ?清晰砷斑。過(guò)深或過(guò)淺均會(huì)影響比色的正確 藥物含砷限量不同?按規(guī)定限量改變供試品取用量(2)氫氣的發(fā)生速度→砷化氫逸出速度→砷斑色澤、清晰,鋅粒的大小和用量,,溶液的酸度,反應(yīng)溫度,,注意事項(xiàng),(3)酸性氯化亞錫SnCl2及碘化鉀KI的作用是還

44、原As5+為As3+，加快反應(yīng)速度 ?As5+ ? As3+ AsO43- + 2I- + 2H+ ?? AsO33- + I2 + H2O AsO43- + Sn2+ + 2H+ ?? AsO33- + Sn4+ + H2O I2 + Sn2+ ?? 2I- + Sn4+ ? 4I- + Zn2+ ??[ZnI4] 2-

45、 穩(wěn)定配位離子?? 利于AsH3?不斷生成 ? Zn + SnCl2 ?鋅粒表面形成鋅錫齊?去極化作用 ?氫氣均 勻連續(xù)發(fā)生,(4)導(dǎo)氣管裝醋酸鉛棉花60mg（裝管高度約60~80mm）醋酸鉛棉花的作用是消除鋅粒及供試品中少量硫化物的干擾。(5)溴化汞試紙 + AsH3反應(yīng)靈敏， 但所形成的砷斑不穩(wěn)定。?溴化汞試紙 保持干燥、避光?保

46、存在棕色磨口瓶中?形成砷斑后，立即比較 。,4、供試品處理(1)供試品若為硫化物、亞硫酸鹽、硫代硫酸鹽時(shí) 加HNO3，△ 使氧化成硫酸鹽，以除去干擾??再檢。如硫代硫酸鈉中砷鹽的檢查。 (2)供試品若為鐵鹽，需先加酸性氯化亞錫試液，將Fe3+還原為Fe2+。鐵鹽 SnCl2 Fe2+如枸櫞酸鐵銨中砷鹽的檢查。,砷鹽,,,24.3.19,76,(3)干擾砷檢查的有機(jī)藥物，先進(jìn)行有機(jī)破壞能溶于水, 不干擾

47、檢查的藥物, 直接依法檢查. 環(huán)狀結(jié)構(gòu)有機(jī)藥物 As 共價(jià)鍵結(jié)合??結(jié)果偏低或難以檢出有機(jī)破壞(堿破壞法; 酸破壞法)堿破壞法：石灰法、無(wú)水碳酸鈉堿融法 酸破壞法：如葡萄糖中砷鹽的檢查,砷鹽,,24.3.19,77,原理： SnCl2 在鹽酸中能將砷鹽還原成棕褐色的膠態(tài) 砷，與一定量標(biāo)準(zhǔn)砷溶液按同法處理后進(jìn)行 比較，即可判斷供試品中含砷限量

48、。 2As3+ + 3SnCl2 + 6HCl ? 2As?+3SnCl4 +6H+,(注意！不加 Zn 粒和 KI ),,(二)二乙基二硫代氨基甲酸銀法(Ag—DDC法) 檢查、含量測(cè)定1.原理,紅色膠態(tài)銀,是利用砷化氫與Ag-DDC吡啶溶液作用，AsH3使Ag-DDC中的銀還原為紅色膠態(tài)銀。試劑的作用同古蔡法。用(1)目視比色法(2)以Ag-DDC溶液為空白，于510nm的波長(zhǎng)處，測(cè)定吸收

49、度，再與一定量標(biāo)準(zhǔn)砷溶液用同法處理后得到的有色溶液進(jìn)行比較,供試溶液的吸收度不得大于標(biāo)準(zhǔn)砷溶液的吸收度。,2.裝置,24.3.19,81,Ag-DDC法 ：二乙基二硫代氨基甲酸銀法,醋酸鉛棉花,Zn、HCl、KI、SnCl2同古蔡氏法,Ag-DDC吡啶溶液,,25℃-40℃水浴反應(yīng)45min,檢查(1)比色(2)510nm測(cè)吸收度,3.注意事項(xiàng)(1)線性關(guān)系 1 ?g ~10 ?g As /40ml線性關(guān)系良好，顏色2小時(shí)穩(wěn)定

50、, 重現(xiàn)性好, 可作為限量檢查和砷鹽含量測(cè)定。(2)有機(jī)堿吸收用有機(jī)堿吸收反應(yīng)產(chǎn)生的HDDC( 二乙基二硫代氨基甲酸)有利于反應(yīng)的進(jìn)行。USP（24）用吡啶，ChP（2000）用三乙胺。 用吡啶檢測(cè)靈敏度: 0.5?g As /30ml用三乙胺檢測(cè)靈敏度略低于吡啶。,24.3.19,83,六、溶液顏色檢查法,目的：控制藥物中有色雜質(zhì)含量方法：[中國(guó)藥典（2005年版）]第一法：目視比色法:與標(biāo)

51、準(zhǔn)比色液進(jìn)行比較的方法第二法：分光光度法:規(guī)定波長(zhǎng)處吸收度值第三法：色差計(jì)法,標(biāo)準(zhǔn)比色液的配制,第一法：目視比色法,觀察方法與標(biāo)準(zhǔn)比色液比較的方法，全波長(zhǎng)范圍定性觀察,85,黃綠色黃色橙黃色橙紅色棕紅色,比色用重鉻酸鉀液,比色用硫酸銅液,比色用氯化鈷液,水,五個(gè)色調(diào)：每個(gè)色調(diào)10個(gè)色號(hào)110淺深,（62.4mg/ml, 藍(lán)色）,（0.8000mg/ml, 黃色）,（59.5mg/ml, 紅色

52、）,,24.3.19,86,色差值,標(biāo)準(zhǔn)液,供試液,水,,,,第二法：使用分光光度法檢查有色雜質(zhì)如果溶解度不好，先過(guò)濾，再在規(guī)定波長(zhǎng)測(cè)定，吸收度不得超過(guò)規(guī)定值。第三法：色差計(jì)法:,本法是通過(guò)色差計(jì)直接測(cè)定溶液的透視三刺激值，對(duì)其顏色進(jìn)行定量表述和分析的方法。,七、易炭化物檢查法,目的:檢查藥物中遇硫酸易炭化或易氧化而呈色的微量有機(jī)雜質(zhì)。,方法:與規(guī)定的對(duì)照液進(jìn)行比色供試品一定量??加入到5ml硫酸中??振搖溶解??靜置15分鐘??

53、與一定量標(biāo)準(zhǔn)比色液比較??不得更深,比色：同置白色背景前，平視觀察比較。,如為固體，應(yīng)先研成細(xì)粉。 如不溶，可加熱。加熱溶解后，放冷 至室溫，再移置比色管中。,注意事項(xiàng)：,對(duì)照液,溶液顏色檢查項(xiàng)的對(duì)照液比色用硫酸銅、重鉻酸鉀、氯化鈷按規(guī)定方法配制的對(duì)照液KMnO4液,,八、溶液澄清度檢查法目的:檢查藥物中的微量不溶性雜質(zhì),用作注射劑的原料藥，一般應(yīng)作此項(xiàng)檢查。

54、 加水 15ml 濁度標(biāo)準(zhǔn)液 濁度標(biāo)準(zhǔn)原液 濁度標(biāo)準(zhǔn)貯備液 稀釋 至1000ml水配制后5分鐘內(nèi)使用

55、 550nm不同級(jí)號(hào) A：0.12~0.15 0.5 1 2 3 4與水配制,,,,檢查方法,室溫 供試品溶液 等量 分別置于配對(duì)的比濁用玻璃管中 濁度標(biāo)準(zhǔn)液

56、 暗室內(nèi)垂直同置于傘棚燈下 照度1000 lx 水平方向觀察、比較

57、 檢查,,,,,,,,,24.3.19,91,濁度標(biāo)準(zhǔn)液,硫酸肼,烏洛托品,水,,*甲醛腙,濁度標(biāo)準(zhǔn)液：貯備液、原液、比濁用液,新沸過(guò)冷水,硫酸高溫?zé)胱?揮發(fā)物質(zhì)逸出有機(jī)藥物 硫酸鹽??熾灼殘?jiān)???硫酸灰分,,,,九、熾灼殘?jiān)鼨z查法,目的:控制有機(jī)藥物和揮發(fā)性無(wú)機(jī)藥物中存在的非揮

58、發(fā)性無(wú)機(jī)雜質(zhì)。,熾灼殘?jiān)?有機(jī)藥物經(jīng)炭化或揮發(fā)性無(wú)機(jī)藥物加熱分解后,高溫?zé)胱?所產(chǎn)生的非揮發(fā)性無(wú)機(jī)雜質(zhì)的硫酸鹽。,方法:稱重量法,方法:,檢查方法：規(guī)定量供試品??置已熾灼至恒重的坩堝中??精密稱定 電爐 緩緩熾灼至炭化 放冷 至室溫 加硫酸 0.5ml濕潤(rùn)??低溫加熱至硫酸蒸氣除盡后??將坩堝置高溫電爐中700~800℃熾灼至恒重??計(jì)算,計(jì)算方法:稱重量法,注意事項(xiàng)：熾灼殘?jiān)蘖? 0.1%~0.2% ,

59、一般使熾灼殘?jiān)?1~2mg（稱量誤差決定），取樣量大，1g（0.1%） ? 用藥劑量小或價(jià)格昂貴的藥品一般不作此項(xiàng)檢查.熾灼殘?jiān)? 緩緩加熱??進(jìn)高溫馬弗爐前要揮盡硫酸 如果??重金屬檢查 , 熾灼溫度500~600 ℃ ， 避免重金屬雜質(zhì)揮發(fā),24.3.19,95,注意事項(xiàng)：坩堝應(yīng)先700～800℃熾灼至恒重?zé)胱浦梁阒兀?供試品連續(xù)兩次熾灼（第二次稱重至

60、少要熾灼30min）后的重量差異在0.3mg以下。含氟藥品——鉑坩鍋瓷坩堝編號(hào)用藍(lán)墨水與FeCl3溶液混合涂寫(xiě)?恒重,十、干燥失重 測(cè)定法目的：檢查藥物中的水分或其 它揮發(fā)性物質(zhì)（乙醇）,指藥物在規(guī)定條件下經(jīng)干燥后所減失的重量，根據(jù)所減失的重量和取樣量計(jì)算供試品干燥失重的百分率。量：恒重——第二次及以后各次稱重均應(yīng)在規(guī)定條件下繼續(xù)干燥1h后進(jìn)行。,,24.3.19,97,熱重分析法（TGA）差示熱分析法（DTA）差示掃

61、描量熱法（DSC）,“恒重”：藥典術(shù)語(yǔ)，指供試品連續(xù)兩次干燥或熾灼后的重量差異在0.3mg以下的重量。干燥溫度：105℃（一般）， 枸櫞酸鈉， 180 ℃ 干燥至恒重。 硫代硫酸鈉，含結(jié)晶水，防熔化，40~50 ℃，漸次升溫??105 ℃恒重器皿：扁形稱量瓶，樣品厚度5mm， 疏松物

62、質(zhì)，不超過(guò)10mm； 大顆粒結(jié)晶，研細(xì)，2mm。置干燥器中放冷至室溫?稱量,干燥失重,（一）常壓恒溫干燥法,適用藥物：受熱較穩(wěn)定的藥物。藥典：40多種,（三）干燥劑干燥法適用藥物：適用于受熱易分解或揮發(fā)的藥物,如氯化銨；苯佐卡因；硝酸異山梨酯；馬來(lái)酸麥角新堿。干燥劑：硅膠、硫酸、五氧化二磷吸水效力：P2O5 >硅膠>硫酸

63、 吸水效果好、使用方便、價(jià)廉 變色硅膠1g??吸水20mg變色 ? 105 ℃干燥吸水容量：硫酸 > P2O5 (貴)

64、 再次使用,,,（二）減壓干燥法真空干燥器適用藥物：適于熔點(diǎn)低、受熱不穩(wěn)定、水分難趕除的藥物,減壓干燥劑干燥 恒溫減壓干燥例:布洛芬：m.p 74.5 ~ 77.5 ℃ 規(guī)定:P2O5干燥器中減壓干燥至恒重 腎上腺素： P2O5干燥器中減壓干燥 18 小時(shí) 地高辛：105 ℃減壓干燥 1 小時(shí)——恒溫減壓干燥 箱減壓壓力：2.67

65、Kpa(20mmHg)以下——一般情況下,,,24.3.19,101,熱分析法是在程序控制溫度下，精確記錄待測(cè)物質(zhì)理化性質(zhì)與溫度的關(guān)系，研究其受熱過(guò)程所發(fā)生的晶型轉(zhuǎn)變、熔融、升華、吸附等物理變化和脫水、熱分解、氧化、還原等化學(xué)變化，用以對(duì)該物質(zhì)進(jìn)行物理常數(shù)、熔點(diǎn)和沸點(diǎn)的確定以及作為鑒別和純度檢查的方法。,干燥失重,（四）熱分析法,24.3.19,102,類型（根據(jù)測(cè)定物理量的不同 ）：熱重分析法（Thermogravimetric

66、 Analysis，TGA）差示熱分析法（Differential Thermal Analysis，DTA）差示掃描量熱法（Differential Scanning Calorimetry，DSC）,1、熱重分析法,在程序控制溫度下，測(cè)量物質(zhì)的質(zhì)量與溫度關(guān)系的方法。熱重分析儀：由安裝在程序升溫爐中的微量分析天平組成，天平不受溫度的影響，經(jīng)過(guò)長(zhǎng)時(shí)間加熱仍有良好的穩(wěn)定性。樣品用量：1~20mg容器：瓷坩堝、鉑坩堝 ?天

67、平盤(pán) 升溫 氮?dú)饬鳎ɑ蚱渌栊詺饬鳎ё邠]發(fā)性物質(zhì),,,,104,,,,,,,,,A,B,C,D,W,T或t,起始溫度,終止溫度,,,平臺(tái),,,熱重曲線：記錄質(zhì)量變化對(duì)溫度（或時(shí)間）的關(guān)系曲線,熱重分析特點(diǎn),能準(zhǔn)確地測(cè)量物質(zhì)的質(zhì)量變化及變化的溫度樣品用量少(1~20mg)測(cè)定速度快（比通常干燥失重法）適用：貴重藥品；在空氣中易氧化的藥物

68、 干燥失重,,,例：USP（24），用TGA法測(cè)定：硫酸長(zhǎng)春堿的干燥失重供試品約10mg??精密稱定??氮?dú)饬鳎魉?0ml/min），5 ℃ /min 恒速升溫??200 ℃范圍內(nèi)記錄TG曲線??減失重量不得過(guò)15.0%,24.3.19,107,2、差示熱分析法（DTA）,概念:差熱分析法是在程序控制溫度下，測(cè)量待測(cè)物質(zhì)（供試品）和參比物之間的溫度差與溫度(或時(shí)間

69、)關(guān)系的熱分析技術(shù)。,差熱分析曲線：記錄樣品與參比物的溫度差(ΔT)變化對(duì)溫度（或時(shí)間）的關(guān)系曲線,參比物：應(yīng)具有惰性，與待測(cè)物有相似的熱容,24.3.19,108,應(yīng)用原理：待測(cè)物的相變(包括熔融、升華和晶型轉(zhuǎn)變等)和化學(xué)反應(yīng)(包括脫水、分解和氧化還原等)可產(chǎn)生特征吸熱和特征放熱峰。 復(fù)雜的化合物常具有比較復(fù)雜的差熱分析曲線，各種吸熱和放熱峰的個(gè)數(shù)、形狀和位置與相應(yīng)的溫度可用來(lái)定性地鑒別待測(cè)物質(zhì)或其多晶型；與其對(duì)照品或標(biāo)準(zhǔn)品差熱