藥物分析藥物的雜質(zhì)檢查

1、Company Logo,www.themegallery.com,一氯化物檢查法,Cl-+Ag+ H+ AgCl,,,1. 原理　 利用氯化物在硝酸酸性條件下與硝酸銀反應, 生成氯化銀膠體微粒而顯白色渾濁液, 與一定量標準氯化鈉溶液在相同條件下產(chǎn)生的氯化銀渾濁程度比較, 判定氯化物是否符合限量,第三節(jié) 藥物中的一般雜質(zhì)檢查,Company Logo,www.themegallery.com,2．操

2、作方法(對照法),樣品管,對照管,葡萄糖中氯化物檢查,1.0mL,用水稀釋至50mL,6.0mL,0.60g,0.010%,(濃度：10?g Cl－/ml),一氯化物檢查法,第三節(jié) 藥物中的一般雜質(zhì)檢查,Company Logo,www.themegallery.com,一氯化物檢查法,3. 結(jié)果觀察方法 暗處放置5min(避免AgCl分解),第三節(jié) 藥物中的一般雜質(zhì)檢查,Company Logo,www

3、.themegallery.com,,4．注意事項及討論,,一氯化物檢查法,①  平行試驗②  加稀硝酸的目的③ 氯化物的最適檢測濃度范圍④  供試品溶液不澄清處理方法⑤  供試品溶液有色時的處理方法,第三節(jié) 藥物中的一般雜質(zhì)檢查,Company Logo,www.themegallery.com,,,一氯化物檢查法,為了保證樣品管與對照管的

4、反應條件一致,要求樣品管與對照管要平行操作——平行試驗.,①  平行試驗,第三節(jié) 藥物中的一般雜質(zhì)檢查,Company Logo,www.themegallery.com,,②  加稀硝酸的目的,,一氯化物檢查法,加速氯化銀混濁的生成，產(chǎn)生較好的乳濁，避免產(chǎn)生碳酸銀、氧化銀、磷酸銀沉淀. 50ml供試液含稀硝酸10ml為宜.過多會增大氯化銀的溶解度，使?jié)岫冉档?,第

5、三節(jié) 藥物中的一般雜質(zhì)檢查,Company Logo,www.themegallery.com,一氯化物檢查法,,③氯化物的最適檢測濃度范圍,50ml供試液中含50~80 ?g的Cl-,　　相當于標準氯化鈉溶液(10 ?gCl-/ml) 5.0~8.0ml 時，所顯渾濁梯度明顯。 根據(jù)限量取用適宜的供試品量, 使氯化物的濃度在適宜的范圍內(nèi).,第三節(jié) 藥物中的一般雜質(zhì)檢查,Company Logo,www.

6、themegallery.com,,④  供試品溶液不澄清處理方法,,一氯化物檢查法,供試品溶解后溶液不澄清，應過濾，過濾時的濾紙要先用含硝酸的水溶液(1→100)洗滌, 除去濾紙中含有的氯化物.,第三節(jié) 藥物中的一般雜質(zhì)檢查,Company Logo,www.themegallery.com,,供試品溶液有色時的處理方法,a.內(nèi)消色法如枸櫞酸鐵銨中氯化物的檢查。,,第三節(jié) 藥物中的一般雜質(zhì)檢查,Compan

7、y Logo,www.themegallery.com,,向供試品溶液中加入某種試劑，使溶液顏色褪去后再依法檢查。,,一氯化物檢查法,例：高錳酸鉀中氯化物的檢查 因溶液呈紫色，加入適量乙醇，使顏色消失后再檢查。,b. 外消色法,第三節(jié) 藥物中的一般雜質(zhì)檢查,Company Logo,www.themegallery.com,二硫酸鹽檢查法,,,硫酸鹽與氯化鋇在稀鹽酸酸性條件下反應，生成硫酸鋇的白

8、色渾濁液,與一定量標準硫酸鉀溶液與氯化鋇在相同條件下生成的渾濁比較.,,1. 原 理,第三節(jié) 藥物中的一般雜質(zhì)檢查,Company Logo,www.themegallery.com,二硫酸鹽檢查法,,,2. 操作法,標準溶液：硫酸鉀，0.1mg/mL SO42-,,,第三節(jié) 藥物中的一般雜質(zhì)檢查,Company Logo,www.themegallery.com,,3．討論,①  平行試驗②

9、60; 加稀鹽酸的目的③ 硫酸根的最適檢測濃度范圍④  供試品溶液不易溶解時⑤  供試品溶液有色時,二硫酸鹽檢查法,0.1mg~0.5mg SO42-/50ml,50ml溶液中含2ml為宜,第三節(jié) 藥物中的一般雜質(zhì)檢查,Company Logo,www.themegallery.com,三鐵鹽檢查法,,硫氰酸鹽法,1. 原理 鐵鹽在鹽酸酸性溶液中與硫氰酸銨生成紅色可溶性硫

10、氰酸鐵配離子,與一定量標準鐵溶液用同法處理后所呈的顏色進行比較.,,第三節(jié) 藥物中的一般雜質(zhì)檢查,Company Logo,www.themegallery.com,三鐵鹽檢查法,,,,,2. 操作,樣品標準溶液,,H2O,,25ml,,d.HCl,4ml,30%硫氰酸銨,,過硫酸銨50mg,H2O,,50ml,,,,,第三節(jié) 藥物中的一般雜質(zhì)檢查,Company Logo,www.themegallery.com,三

11、鐵鹽檢查法,,2) 最佳比色濃度a. 儀器分析線性范圍5~ 90?g Fe3+ /50mlb. 目視比色濃度范圍10~50?g Fe3+ /50ml,3. 討 論,標準鐵溶液——硫酸鐵銨(含硫酸？)濃度10 ?g Fe3+/ml,3）過硫酸銨的作用：氧化供試品中兩價鐵變?nèi)齼r鐵，防止硫氰酸鐵降解,第三節(jié) 藥物中的一般雜質(zhì)檢查,Company Logo,www.themegallery.com,三鐵鹽檢查法,,4)

12、 過量的硫氰酸銨，增加硫氰酸鐵配離子穩(wěn)定性，消除其他酸根離子的干擾5）葡萄糖中用硝酸作氧化劑，但須加熱除去過量硝酸。？6）色調(diào)不一致時或顏色較淺時，須加正丁醇或異戊醇提取比較。7）有機藥物？,3. 討 論,亞硝酸與硫氰酸根反應生成紅色的亞硝酰硫氰化物,熾灼后測定,第三節(jié) 藥物中的一般雜質(zhì)檢查,Company Logo,www.themegallery.com,三鐵鹽檢查法,,巰基醋酸法（BP）,原理：氨堿性下與兩價鐵反

13、應成紅色配位離子，比色測定。加巰基醋酸前先加枸櫞酸溶液。防止產(chǎn)生沉淀。,靈敏度高，但試劑貴。,第三節(jié) 藥物中的一般雜質(zhì)檢查,Company Logo,www.themegallery.com,三鐵鹽檢查法,,2Fe3++2HSCH2COOH→2Fe2++SCH2COOH,Fe(SCH2COOH)2→[Fe(SCH2COO)2]2-+2H2O,,SCH2COOH,Fe2++2HSCH2COOH→Fe(SCH2COOH)2+H+

14、,紅色,,第三節(jié) 藥物中的一般雜質(zhì)檢查,Company Logo,www.themegallery.com,四重金屬檢查法,,重金屬是指在實驗條件下能與硫代乙酰胺或硫化鈉作用呈色的金屬雜質(zhì)。如：Ag、Pb、Hg、Cu、Cd、Bi、Sb、Sn、As、Ni、Co、Zn等. 重金屬存在影響藥物的穩(wěn)定性及安全性. 鉛易在體內(nèi)積蓄中毒，以Pb為代表。,1. 重金屬的概念,第三節(jié) 藥物中的一般雜質(zhì)檢查,Co

15、mpany Logo,www.themegallery.com,四重金屬檢查法,第二法:熾灼后檢查法 適用于含芳環(huán)、雜環(huán)以及不 溶于水、稀酸及乙醇的有機藥物,第一法:硫代乙酰胺法 適用于溶于水、稀酸、乙醇 的藥物,是最常用的方法,第三法:硫化鈉法 適用于難溶于稀酸但能溶于 堿性溶液藥物(巴比妥類、磺胺類),第三節(jié) 藥物中的一般雜質(zhì)檢查,

16、Company Logo,www.themegallery.com,四重金屬檢查法,,適用于溶于水、稀酸和乙醇的藥物.,第一法 硫代乙酰胺法,第三節(jié) 藥物中的一般雜質(zhì)檢查,Company Logo,www.themegallery.com,四重金屬檢查法,,硫代乙酰胺在弱酸性 (pH3.5 醋酸鹽緩沖液)條件下水解，產(chǎn)生H2S，與重金屬離子(以Pb2+為代表)生成黃色到棕黑色的硫化物混懸液，與一定量標準鉛溶液

17、經(jīng)同法處理后所呈顏色比較，判定限量是否符合規(guī)定.,1. 第一法 原 理,第三節(jié) 藥物中的一般雜質(zhì)檢查,Company Logo,www.themegallery.com,,甲管,乙管,丙管,,,,第三節(jié) 藥物中的一般雜質(zhì)檢查,Company Logo,www.themegallery.com,結(jié)果觀察,結(jié)果判定,當丙管中顯出得顏色不淺于甲管時，乙管中顯出的顏色與甲管比較，不得更深；當丙管中顯出得顏色淺于甲管，按第二法重新檢查,

18、第三節(jié) 藥物中的一般雜質(zhì)檢查,Company Logo,www.themegallery.com,四重金屬檢查法,,①  標準鉛溶液濃度②  硫代乙酰胺試液③  溶液的pH④  供試品溶液有顏色時的處理⑤  干擾物的排除方法,3．討論,第三節(jié) 藥物中的一般雜質(zhì)檢查,Company Logo,www.themegallery.com,四

19、重金屬檢查法,,①  標準鉛溶液濃度,適宜目視比色的濃度范圍27ml溶液中 Pb2+標準溶液10?g/ml 1~2ml,第三節(jié) 藥物中的一般雜質(zhì)檢查,Company Logo,www.themegallery.com,四重金屬檢查法,,②  硫代乙酰胺試液,H2S試液：惡臭和毒性；不穩(wěn)定；易被空氣氧化而析出硫；濃度難以控

20、制。,改用硫代乙酰胺為顯色劑（95版藥典）硫代乙酰胺在實驗條件下水解產(chǎn)生H2S，與重金屬離子反應。,第三節(jié) 藥物中的一般雜質(zhì)檢查,Company Logo,www.themegallery.com,四重金屬檢查法,,pH在3.0~3.5時, 呈色較完全； 酸度增大, 呈色變淺甚至不呈色；若經(jīng)強酸處理，需先加氨水至酚酞顯中性，再加醋酸鹽緩沖液。,溶液的pH對于金屬離子與硫化氫呈色影響較大。,③  溶液

21、的pH,第三節(jié) 藥物中的一般雜質(zhì)檢查,Company Logo,www.themegallery.com,四重金屬檢查法,,④ 供試品溶液有顏色時的處理,第三節(jié) 藥物中的一般雜質(zhì)檢查,a. 外消色法Ⅰ. 稀焦糖溶液調(diào)節(jié)Ⅱ. 指示劑調(diào)節(jié) b.內(nèi)消色法,Company Logo,www.themegallery.com,第三節(jié) 藥物中的一般雜質(zhì)檢查,Company Logo,www.themegalle

22、ry.com,四重金屬檢查法,,⑤ 干擾物的排除方法,干擾：弱酸性溶液中Fe3+氧化H2S析出S，產(chǎn)生混濁影響檢查.,a. 供試品中微量高價Fe3+存在,如：葡萄糖酸亞鐵中重金屬的檢查。,排除：加入抗壞血酸或鹽酸羥胺使　　　　Fe3+還原為Fe2+。,第三節(jié) 藥物中的一般雜質(zhì)檢查,Company Logo,www.themegallery.com,,b. 供試品為鐵鹽（大量的Fe3+）,Fe3+在HCl溶液

23、中能形成配位化合物用乙醚提取 Fe3++HCl →[HFeCl6]2-（黃色）　水層加氨試液調(diào)至堿性,殘存的Fe3+可用KCN掩蔽, 按第三法檢查. 如：枸櫞酸鐵銨的重金屬檢查,四重金屬檢查法,第三節(jié) 藥物中的一般雜質(zhì)檢查,Company Logo,www.themegallery.com,四重金屬檢查法,,,1.原理 　　供試品先熾灼破壞后,使有機結(jié)合的重金屬游離, 再按

24、第一法檢查.,第二法 熾灼后的硫代乙酰胺法,適用于含芳環(huán)、雜環(huán)以及不溶于水、稀酸、乙醇的有機藥物.,第三節(jié) 藥物中的一般雜質(zhì)檢查,Company Logo,www.themegallery.com,四重金屬檢查法,,2. 操作,緩緩熾灼 放冷 H2SO4 0.5-1.0ml供試品 炭化

25、 加熱 HNO3 500-600℃H2SO4 除盡 放冷 完全灰化 蒸干HCl 2ml 水15ml 中性 按第一法檢查 蒸干 氨試液注意：做

26、空白試驗,,,,,,,,,甲管,第三節(jié) 藥物中的一般雜質(zhì)檢查,Company Logo,www.themegallery.com,四重金屬檢查法,,a. HNO3處理后,必須蒸干除盡NO.,3. 討論,b. 熾灼溫度嚴格控制：500-600℃,c. 控制酸中重金屬的影響，對照品同法處理 d. 含鈉鹽或氟的有機藥物在熾灼時 改用鉑坩堝或硬質(zhì)玻璃 (瑪瑙) 蒸 發(fā)皿.,第三節(jié) 藥物中的一般雜質(zhì)檢查,Co

27、mpany Logo,www.themegallery.com,四重金屬檢查法,,1. 原理　　在堿性介質(zhì)中,以Na2S為顯色劑, 使Pb2+與S2-作用生成PbS 的混懸液, 與一定量標準鉛溶液經(jīng)同法處理所呈顏色比較, 不得更深.,第三法 硫化鈉法,第三節(jié) 藥物中的一般雜質(zhì)檢查,Company Logo,www.themegallery.com,四重金屬檢查法,,適用于溶于堿性水溶液而難溶于稀酸或在稀酸中即

28、生成沉淀的藥物. 如：磺胺類與巴比妥類藥物,第三節(jié) 藥物中的一般雜質(zhì)檢查,Company Logo,www.themegallery.com,四重金屬檢查法,,2. 方法,取供試品適量,加NaOH試液5ml和水 20ml使溶解后,置納氏比色管中,加Na2S試液5滴, 搖勻, 與一定量標準鉛溶液經(jīng)同法處理所呈顏色比較.,第三節(jié) 藥物中的一般雜質(zhì)檢查,Company Logo,www.themegallery.com,

29、四重金屬檢查法,,3. 討論,Na2S 對玻璃有腐蝕性,久置產(chǎn)生絮狀物,應臨用新配.,第三節(jié) 藥物中的一般雜質(zhì)檢查,Company Logo,www.themegallery.com,第三節(jié) 藥物中的一般雜質(zhì)檢查,Company Logo,www.themegallery.com,(二) Ag-DDC法,(一) 古蔡氏法,(三),(四) 次磷酸法,五砷鹽檢查法,白田道夫法,第三節(jié) 藥物中的一般雜質(zhì)檢查,Co

30、mpany Logo,www.themegallery.com,,五砷鹽檢查法,(一) 古蔡氏法（Gutzeit）,1. 原 理　金屬鋅與酸作用產(chǎn)生新生態(tài)的氫與藥物中微量砷鹽反應生成具揮發(fā)性的砷化氫,遇溴化汞試紙產(chǎn)生黃色至棕色的砷斑,與同條件下一定量標準砷溶液所生成的砷斑比較,判斷砷鹽的量.,第三節(jié) 藥物中的一般雜質(zhì)檢查,Company Logo,www.themegallery.com,反應式如下：,溴化汞試紙,第三節(jié)

31、 藥物中的一般雜質(zhì)檢查,Company Logo,www.themegallery.com,8cm,,,有孔玻璃旋塞,導氣管,AsH3發(fā)生瓶,,,,,溴化汞試紙,,醋酸鉛棉花(60mg),,HCl Zn 粒碘化鉀試液酸性氯化亞錫試液,生成砷斑,吸收硫化氫氣體,2. 裝置,第三節(jié) 藥物中的一般雜質(zhì)檢查,Company Logo,www.themegallery.com,,3. 操作,④ 加鋅粒2g, 立即將裝妥的導氣管 B 密

32、塞于 A 瓶, 置25-40 ℃水浴中, 反應45分鐘, 取出溴化汞試紙, 比較砷斑.,① 導氣管B中裝入醋酸鉛棉花,② 再于旋塞C的平面上放一片溴化汞試紙,③ 樣品、對照品分別置于檢砷瓶中, 加鹽酸5ml與水21ml, 再加2.5%碘化鉀試液5ml 與0.3%酸性氯化亞錫試液5滴, 在室溫放置10分鐘,第三節(jié) 藥物中的一般雜質(zhì)檢查,Company Logo,www.themegallery.com,,4. 討 論,1) 試劑的作用,

33、a. KI的作用——還原劑：As5+→As3+,五價砷生成AsH3的反應速度比三價砷速度慢, 加入 KI 使五價砷還原為三價砷后再與活潑氫反應, 以增大AsH3的生成速度.,,五砷鹽檢查法,第三節(jié) 藥物中的一般雜質(zhì)檢查,Company Logo,www.themegallery.com,五砷鹽檢查法,,①還原劑(表現(xiàn)在2方面)Ⅰ. 將五價砷還原為三價砷(As5+→As3+),b. 酸性SnCl2的作用,第三

34、節(jié) 藥物中的一般雜質(zhì)檢查,Company Logo,www.themegallery.com,,,,進而促進AsH3不斷生成,穩(wěn)定的絡(luò)離子,Ⅱ. 將KI被氧化生成的I2再還原為I-,SnCl2與KI還可抑制銻化氫生成,第三節(jié) 藥物中的一般雜質(zhì)檢查,Company Logo,www.themegallery.com,五砷鹽檢查法,,c.PbAc2棉花的作用,——排除硫化物的干擾(1mg S2- ),第三節(jié) 藥物中的一般

35、雜質(zhì)檢查,Company Logo,www.themegallery.com,,2)  反應最佳條件,a. Zn粒的大小及用量 大?。耗芡ㄟ^1號篩（850~2000?m，40-80目） 用量：約2g,b. 標準砷溶液：2 ml (1 ? g /ml),五砷鹽檢查法,c. 反應時間/溫度：45min/ 25-40℃,第三節(jié) 藥物中的一般雜質(zhì)檢查,Company Logo,www.theme

36、gallery.com,,a. 供試品是硫化物,亞硫酸鹽,硫代硫酸鹽,排除方法：加入濃硝酸處理,3)  干擾物的排除,五砷鹽檢查法,第三節(jié) 藥物中的一般雜質(zhì)檢查,Company Logo,www.themegallery.com,,Fe3+能消耗還原劑(KI、SnCl2), 并能氧化砷化氫.,排除方法：先加酸性SnCl2試液使 Fe3+ → Fe2+,五砷

37、鹽檢查法,b. 供試品是鐵鹽(Fe3+),第三節(jié) 藥物中的一般雜質(zhì)檢查,Company Logo,www.themegallery.com,,c. 共價鍵結(jié)合的砷化物,排除方法：進行有機破壞 ——酸破壞法或堿破壞法,五砷鹽檢查法,第三節(jié) 藥物中的一般雜質(zhì)檢查,Company Logo,www.themegallery.com,,堿破壞法　　a 加入氫氧化鈣 500-600 ?C灼燒

38、 　例：酚磺酞　　b 加入無水碳酸鈉堿融 　　　　例：苯甲酸鈉,五砷鹽檢查法,酸破壞法 加稀硫酸與溴化鉀 例：葡萄糖中砷鹽檢查,第三節(jié) 藥物中的一般雜質(zhì)檢查,Company Logo,www.themegallery.com,,五砷鹽檢查法,Sb干擾,優(yōu)點：靈敏度高 (1 ?g As),4)古蔡氏法特點,缺點：,第三節(jié) 藥物中的一般雜質(zhì)檢

39、查,Company Logo,www.themegallery.com,,(二) 二乙基二硫代氨基甲酸銀法 (Ag-DDC法) silver diethyldithiocarbamate,,紅色膠態(tài)銀,,,目視比色法,510nm 測定A值,第三節(jié) 藥物中的一般雜質(zhì)檢查,Company Logo,www.themegallery.com,,,線性范圍：1～10 μg/40ml,靈敏度高, 0.5g As/30ml 含銻藥物不

40、干擾測定用于砷鹽的限量檢查和微量砷鹽的含量測定,書中沒有D,本法不僅用于砷鹽的限量檢查, 而且可用作微量砷鹽的含量測定.,第三節(jié) 藥物中的一般雜質(zhì)檢查,Company Logo,www.themegallery.com,五砷鹽檢查法,,(三) 白田道夫法,對含銻藥物中砷鹽的檢查不能用古蔡氏法,需用白田道夫法.,第三節(jié) 藥物中的一般雜質(zhì)檢查,Company Logo,www.themegallery.com,,五砷鹽

41、檢查法,白田道夫法原 理,,第三節(jié) 藥物中的一般雜質(zhì)檢查,Company Logo,www.themegallery.com,,白田道夫法的特點,優(yōu)點：不受Sb干擾,缺點：靈敏度低 ——20?gAs2O3/10ml 加入少量HgCl2,靈敏度提高至2 ?gAs2O3（1.5 ?g As）/10ml.,五砷鹽檢查法,第三節(jié) 藥物中的一般雜質(zhì)檢查,Company Logo,

42、www.themegallery.com,,五砷鹽檢查法,(四) 次磷酸法,第三節(jié) 藥物中的一般雜質(zhì)檢查,Company Logo,www.themegallery.com,,特點,用于硫化物、亞硫酸鹽以及含銻藥物等砷鹽檢查；不受S2-,SO32-,Sb干擾,靈敏度較古蔡氏法低,五砷鹽檢查法,第三節(jié) 藥物中的一般雜質(zhì)檢查,Company Logo,www.themegallery.com,六干燥失

43、重,,,第三節(jié) 藥物中的一般雜質(zhì)檢查,Company Logo,www.themegallery.com,六干燥失重,,,,中國藥典采用的測定法 常壓恒溫干燥法減壓干燥法與恒溫減壓干燥法干燥劑干燥法：硅膠、濃硫酸、五氧化二磷,第三節(jié) 藥物中的一般雜質(zhì)檢查,Company Logo,www.themegallery.com,六干燥失重,,,,常壓干燥法：適用于受熱穩(wěn)定的藥物方法：,供試品2-5g,恒重的扁形

44、稱量瓶,100-105oC干燥5h,干燥器30min,100-105oC再干燥1h,稱重W2,稱重W1,根據(jù)減少的重量計算水分百分率,,,,第三節(jié) 藥物中的一般雜質(zhì)檢查,Company Logo,www.themegallery.com,六干燥失重,,,,注意事項：1）平鋪厚度，﹤5 mm；疏松物質(zhì)， ﹤10 mm2）干燥時，瓶蓋置于稱量瓶旁，取出前蓋上3）含較多結(jié)晶水，在相對高溫條件下，先除去部分水分4）含大量其他

45、水分且熔點低，先在低溫除去大量水分，或先減壓干燥再恒溫干燥；5）不易恒重藥物，一定溫度和時間減少重量判斷6）供試品為膏狀物，取洗凈粗砂粒和小玻棒干燥至恒重后用于攪勻和干燥,第三節(jié) 藥物中的一般雜質(zhì)檢查,Company Logo,www.themegallery.com,六干燥失重,,,,減壓干燥法：適于熔點低、受熱分解的供試品。1）采用減壓干燥器（通常為室溫）；或恒溫減壓干燥器（溫度按各品種項下的規(guī)定設(shè)置），壓力一般&

46、lt;2.67kPa。2）干燥劑：無水氯化鈣、硅膠、或五氧化二磷，有時不用干燥劑。恒溫減壓干燥器中常用五氧化二磷。,第三節(jié) 藥物中的一般雜質(zhì)檢查,Company Logo,www.themegallery.com,六干燥失重,,,,干燥劑干燥法：適用于受熱易分解或易升華的供試品。1）置于干燥器中，利用干燥劑吸收水分，干燥至恒重；2）干燥能力：五氧化二磷 ? 硅膠 ? 硫酸,第三節(jié) 藥物中的一般雜質(zhì)檢查,Compa

47、ny Logo,www.themegallery.com,六干燥失重,,,,注意事項：1）使用五氧化二磷是需將干燥劑鋪于培養(yǎng)皿中，置干燥器內(nèi)；2）表層結(jié)塊或出現(xiàn)液滴，應將表層刮去，加入新的再使用；棄去的五氧化二磷不可倒入下水道，應埋入土中，不重復使用；3）硫酸放于培養(yǎng)皿或燒杯中，可重復使用，將含水硫酸置于燒杯中加熱冒白煙，在110oC約30min。,第三節(jié) 藥物中的一般雜質(zhì)檢查,Company Logo,www.the

48、megallery.com,Company Logo,www.themegallery.com,,,,水分包括結(jié)合水和吸附水。藥典收載費休氏法和甲苯法。費休氏法可準確測定藥物中的結(jié)晶水、吸附水和游離水。原理：利用碘將二氧化硫氧化為三氧化硫時，需要一定量的水分參與反應，根據(jù)消耗碘的量來測定水分的含量。H2O+I2+SO2+3C5H5N→2C5H5N·HI+C5H5N·SO3C5H5N·SO3+CH

49、3OH→C5H5N·HSO4CH3,七水分測定法,滴定反應指示終點：自身或永停滴定法,第三節(jié) 藥物中的一般雜質(zhì)檢查,Company Logo,www.themegallery.com,,,,七水分測定法,水與費休氏試液摩爾比：水：碘：二氧化硫：甲醇：吡啶=1：1：1：1：3,第三節(jié) 藥物中的一般雜質(zhì)檢查,A——供試品消耗的Fisher試液的體積B——空白消耗的Fisher試液的體積F——每1ml

50、Fisher試劑相當于水的重量(mg)W——供試品的重量,Company Logo,www.themegallery.com,催化劑,硫酸吡啶，不穩(wěn)定,氫碘酸吡啶,甲基硫酸氫吡啶，穩(wěn)定,Company Logo,www.themegallery.com,指示終點方法：①Fisher試液顏色 淡黃色——紅棕色②永停法(以后講）,催化劑,,Company Logo,www.themegallery.com,,八熾灼殘

51、渣,,,熾灼殘渣（residue on ignition）：有機藥物經(jīng)炭化或揮發(fā)性無機藥物加熱分解后，再經(jīng)高溫熾灼，所產(chǎn)生的非揮發(fā)性無機雜質(zhì)的硫酸鹽。用于控制有機藥物經(jīng)炭化或揮發(fā)性無機藥物中非揮發(fā)性無機雜質(zhì)。,第三節(jié) 藥物中的一般雜質(zhì)檢查,Company Logo,www.themegallery.com,,八熾灼殘渣,,,供試品置已熾灼至恒重的坩堝，精密稱定，緩緩熾灼至完全炭化，放冷至室溫，除另有規(guī)定外，加入硫酸使?jié)駶櫍?/p>

52、低溫加熱除盡硫酸蒸氣后，于高溫（700-800oC）熾灼至完全灰化，在干燥器內(nèi)冷卻至室溫，精密稱定后，再在（700-800oC）熾灼至恒重。,第三節(jié) 藥物中的一般雜質(zhì)檢查,,,0.1%-0.2%,1～2 mg,Company Logo,www.themegallery.com,,八熾灼殘渣,,,藥典要求：ChP和BP均要求恒重；USP和JP殘渣在限度外時才要求恒重。ChP和USP均先炭化后再加硫酸；BP和JP則加硫酸消化

53、兩次；溫度：ChP為700-800oC；USP為800±25oC；BP為800oC；JP為450-550oC,第三節(jié) 藥物中的一般雜質(zhì)檢查,Company Logo,www.themegallery.com,,八熾灼殘渣,,,注意事項：1）供試品取用量由限量和稱量誤差決定。一般應使熾灼殘渣量為1-2mg，限量一般為0.1-0.2%；2）放入高溫爐內(nèi)之前，務(wù)必蒸發(fā)除盡硫酸，以免腐蝕爐膛；3）除盡硫酸蒸氣，應低

54、溫加熱，以防由于溫度過高，影響測定結(jié)果；4）含氟樣品采用鉑坩堝；5）熾灼殘渣留作重金屬檢查是，溫度控制在500-600oC；6）恒重的第二次稱重在繼續(xù)熾灼30min后進行。,第三節(jié) 藥物中的一般雜質(zhì)檢查,Company Logo,www.themegallery.com,,九易炭化物,,,易炭化物（readily carbonizable substances）： 指藥物中存在遇硫酸易炭化或氧化而呈色的微

55、量有機物質(zhì)。多為未知結(jié)構(gòu)的化合物，用硫酸呈色的方法控制他們的含量。目視比色法。,第三節(jié) 藥物中的一般雜質(zhì)檢查,Company Logo,www.themegallery.com,,九易炭化物,,,檢查：甲管：加入各品種項下規(guī)定的對照溶液5ml；乙管：加硫酸（94.5%-95.5%，g/g）5ml，分次緩緩加入規(guī)定量的供試品，振搖使溶解。均靜置15min，甲乙管比較，乙管不得比甲管更深。對照液種類：1）同”溶液顏色檢

56、查項下“標準比色液；2）由比色用氯化鈷、比色用重鉻酸鉀、比色用硫酸銅按規(guī)定配制的對照液；3）高錳酸鉀液,第三節(jié) 藥物中的一般雜質(zhì)檢查,Company Logo,www.themegallery.com,,,,殘留溶劑（residual solvents）：合成原料藥、輔料或制劑生產(chǎn)過程中使用的，但在工藝中未能完全除去的有機溶劑。毒性程度分四類：避免使用、限制使用、推薦使用、其他溶劑前3類按規(guī)定限量使用，第4類根據(jù)生產(chǎn)工藝，制定限度

57、。,十殘留溶劑測定法,第三節(jié) 藥物中的一般雜質(zhì)檢查,Company Logo,www.themegallery.com,,,,十殘留溶劑測定法,第三節(jié) 藥物中的一般雜質(zhì)檢查,Company Logo,www.themegallery.com,,,,藥典規(guī)定：殘留溶劑檢查方法為氣相色譜法（GC）?？刹捎锰畛渲?，也可采用毛細管柱。,十殘留溶劑測定法,檢測器常為氫火焰離子化檢測器（FID）

58、，對含鹵素的殘留溶劑采用電子俘獲檢測器（ECD）。FID使用時，需加尾吹氣，作用：提高靈敏度，消除檢測器死體積的柱外效應,第三節(jié) 藥物中的一般雜質(zhì)檢查,Company Logo,www.themegallery.com,色譜系統(tǒng)與系統(tǒng)適用性試驗(System Suitability Tests; SSTs)以直徑為0.25-0.18mm的二乙烯苯-乙基乙烯苯型高分子多孔小球作為固定相，柱溫為80-170℃；并符合下列條件：

59、 ⑴用待測物的色譜峰計算的N應大于1000； ⑵內(nèi)標物與待測物的兩個色譜峰的R≥1.5； ⑶每個標準溶液進樣5次，所得待測物與內(nèi)標物峰面積之比的RSD≤5%； 若以外標法測定，所得待測物峰面積的RSD≤10%,Company Logo,www.themegallery.com,進行有機溶劑限度測定時，根據(jù)殘留溶劑的限度規(guī)定來確定對照品溶液的濃度；進行定量測定時，應根據(jù)供試品中實際殘留溶劑的實際殘留量確定對照品溶液的濃

60、度。對照品溶液的色譜峰面積與供試品溶液中對應的殘留溶劑的色譜峰面積以不超過2倍為宜。,Company Logo,www.themegallery.com,Company Logo,www.themegallery.com,,,,頂空分析法：將含揮發(fā)性雜質(zhì)的供試品置于一耐壓的密閉系統(tǒng)中，在一定的溫度下，經(jīng)過足夠的時間，該揮發(fā)性雜質(zhì)在氣相或液相中的含量達到平衡并具一定的比值，取其氣相中氣體進行測定，其結(jié)果與液相中含量成正比。此分析方法亦稱

61、液上氣體分析法，常與氣相色譜法聯(lián)用，稱為頂空氣相色譜法。,十殘留溶劑測定法,第三節(jié) 藥物中的一般雜質(zhì)檢查,Company Logo,www.themegallery.com,,,,色譜條件比較：第一法：柱溫一般40-100oC，進樣口溫度200oC；以水為溶劑，頂空瓶平衡溫度70-85oC，時間30-60min；第二法：柱溫先在40oC維持8min，再以8oC/min升至120oC，維持10oC。頂空條件同第一法

62、頂空條件選擇：平衡溫度低于溶解供試品所用溶劑的沸點10oC，注意熱分解產(chǎn)物干擾；平衡時間——足夠以達平衡且氣密性不變差,十殘留溶劑測定法,第三節(jié) 藥物中的一般雜質(zhì)檢查,Company Logo,www.themegallery.com,,,,頂空瓶加熱溫度一般70~85℃，頂空瓶加熱時間30~60分鐘。溶液的制備：通常以水為溶劑；對于非水溶性藥物，可采用N，N-二甲基甲酰胺或二甲亞砜作溶劑。以內(nèi)標法按峰面積比值或外

63、標法的峰面積作限度檢查和定量測定,十殘留溶劑測定法,第三節(jié) 藥物中的一般雜質(zhì)檢查,Company Logo,www.themegallery.com,,,,注意事項：1）未知雜質(zhì)或其揮發(fā)性熱降解物對殘留溶劑干擾的排除：保留時間相同，采用另一種極性相反的色柱系統(tǒng)測定相同樣品，比較結(jié)果，保留時間不同，表明有干擾；產(chǎn)生與殘留溶劑相同的物質(zhì)，利用去除該溶劑的對照樣品的色譜峰來判斷；2）管路對含氮堿性化合物的吸附干擾的排除：

64、采用惰性的硅鋼材料或鎳鋼材料；采用弱極性色譜柱或經(jīng)堿處理后色譜柱，或采用離子色譜法；3）頂空瓶一般不重復使用,十殘留溶劑測定法,第三節(jié) 藥物中的一般雜質(zhì)檢查,Company Logo,www.themegallery.com,十一溶液顏色,,,第三節(jié) 藥物中的一般雜質(zhì)檢查,Company Logo,www.themegallery.com,,,,十一溶液顏色,1、標準比色液比色法： 將

65、藥物溶液與規(guī)定的標準比色液的顏色比較。標準比色液由比色用重鉻酸鉀、硫酸銅、氯化鈷按規(guī)定的比例制備各種色調(diào)標準貯備液，然后用色調(diào)標準貯備液和水按規(guī)定的比例制備各種色調(diào)色號標準比色液,第三節(jié) 藥物中的一般雜質(zhì)檢查,Company Logo,www.themegallery.com,,十一溶液顏色,,,2、分光光度法檢查有色雜質(zhì)： 配制一定濃度的供試品溶液，在規(guī)定波長測定吸收度，吸收度不得過規(guī)定值。3、色差計法：

66、 色差計直接測定溶液的透射三刺激值，對溶液顏色進行定量表述和分析。目視法難以判斷時使用。,第三節(jié) 藥物中的一般雜質(zhì)檢查,Company Logo,www.themegallery.com,,十二溶液澄清度,,,澄清度（clarity of solution）檢查藥品溶液的混濁程度，可反應藥物溶液中的微量不溶性雜質(zhì)，主要用于制備注射劑的原料藥或注射劑檢查。ChP中澄清度的檢查法為比濁法原理：藥物溶液中存在分散的細微

67、顆粒，當直線光通過溶液時，細微顆?？梢鸸獾纳⑸?，測量光散射來測量溶液的濁度。方法：暗室內(nèi)垂直在傘棚燈下，檢查供試品溶液和濁度標準液。,第三節(jié) 藥物中的一般雜質(zhì)檢查,Company Logo,www.themegallery.com,,十二溶液澄清度,,,濁度標準貯備液制備：1.0%的硫酸肼溶液與10%烏洛托品等容量混合，生成的甲醛腙在水中形成白色渾濁，以不同量的水稀釋可得不同濁度的標準液。濁度標準貯備液制備溫度：25

68、±1℃藥典中澄清的定義為：供試品溶液的澄清度相同于所用的溶劑，或不超過0.5號濁度標準液。注意事項：光線，暗處濁度最高；溫度25±1 ℃；溶劑多為水，有時用酸、堿、有機溶劑。水為新沸過的冷水,第三節(jié) 藥物中的一般雜質(zhì)檢查,Company Logo,www.themegallery.com,,一、特殊雜質(zhì)的研究規(guī)范,第四節(jié) 特殊雜質(zhì)的檢查與鑒定方法,,二、特殊雜質(zhì)的鑒定,特殊雜質(zhì)的檢查與鑒定,

69、Company Logo,www.themegallery.com,,雜質(zhì)的表觀含量在0.1%及其以上，或在0.1%以下的具強烈生物作用的雜質(zhì)或毒性雜質(zhì)，要求定性或確證其結(jié)構(gòu)。光學異構(gòu)體檢查多選用手性色譜法，結(jié)合比旋度來控制藥品質(zhì)量,色譜分析法,一、特殊雜質(zhì)的研究規(guī)范,第四節(jié) 特殊雜質(zhì)的檢查與鑒定方法,Company Logo,www.themegallery.com,二、特殊雜質(zhì)的鑒定,對有機雜質(zhì)的鑒定研究時，常需要對雜質(zhì)