水體中多種藻毒素的檢測方法研究.pdf

1、近年來我國各大淡水湖泊的富營養(yǎng)化現(xiàn)象日益嚴(yán)重，富營養(yǎng)化水體中藍(lán)藻水華的爆發(fā)以及有毒藍(lán)藻的代謝產(chǎn)物已經(jīng)成為一個全世界關(guān)注的公眾衛(wèi)生問題。上海地處長江和太湖流域下游，目前主要以黃浦江上游和長江為飲用水水源地，其中黃浦江發(fā)源于太湖流域的淀山湖，其供水量占全市原水取水量的80％左右，而淀山湖的富營養(yǎng)化及藻毒素問題日益嚴(yán)重，因此保障黃浦江上游水源地的水質(zhì)安全對于上海市人民的飲用水安全有重要意義。
　　 微囊藻、節(jié)球藻和柱胞藻毒素是一類具有

2、強(qiáng)肝臟毒性的藍(lán)藻毒素，眾多研究都表明原發(fā)性肝癌的發(fā)病率與飲用藻毒素污染的水有關(guān)，但國內(nèi)除微囊藻毒素外，其他兩類藻毒素的免疫分析方法研究幾乎空白。這三種藻毒素在上海市的地表水中，尤其是在爆發(fā)藍(lán)藻水華的水體中普遍存在。低濃度、高干擾是藻毒素分析中的難題，對此，本文對水體中三大類肝毒素的免疫分析方法進(jìn)行了研究，把SPE技術(shù)和ELISA檢測相結(jié)合，采用比較研究的方法，對微囊藻、節(jié)球藻和柱胞藻藻毒素的富集前處理作了重點(diǎn)研究，建立了快速、靈敏、可靠

3、的用于ELISA分析的前處理方法，同時將該方法用于上海市水源地及自來水中這三種藻毒素的污染狀況調(diào)查，這不僅能為改善供水水質(zhì)提供可靠的參考資料，也為上海地區(qū)水質(zhì)的監(jiān)控提供了強(qiáng)有力的技術(shù)支持，同時本方法的研究結(jié)果也能為建立這三類藻毒素的ELISA檢測標(biāo)準(zhǔn)提供依據(jù)。研究分為兩部分：(1)三種藻毒素免疫分析的前處理研究；(2)上海市供水系統(tǒng)中三種藻毒素污染的初步調(diào)查。
　　 主要研究結(jié)果如下：
　　 1、對微囊藻和節(jié)球藻毒素，首

4、先水樣用0.22μ m水相濾膜過濾，以3-4mL/min的速度流過經(jīng)10mL甲醇和10mL純水活化的C18柱，上樣后10mL純水淋洗，12mL甲醇洗脫，洗脫液在35℃條件下氮?dú)獯蹈珊笥眉兯ㄈ莸?mL，4℃保存待測。結(jié)果表明該方法針對微囊藻和節(jié)球藻毒素的ELISA檢測能保證有較好的回收率，加標(biāo)回收率可分別達(dá)到91.4％和94.3％。
　　 2、對柱孢藻毒素，用10mL甲醇和10mL純水活化碳黑固相萃取柱，水樣過濾后(0.22μ

5、m)以2-3mL/min的速度上樣，用10mL甲醇淋洗后再用12mL含0.1％三氟乙酸的甲醇洗脫柱胞藻毒素，氮?dú)獯蹈珊笥?.1％氨水定容到1mL待測。結(jié)果表明這種前處理方法對柱胞藻毒素的ELISA檢測能保證有較好的回收率，加標(biāo)回收率77％。
　　 3、調(diào)查了上海市8個水源地水樣以及7個市區(qū)居民自來水采樣點(diǎn)的三類藻毒素含量。結(jié)果表明，水源水中的三類藻毒素都具有明顯的季節(jié)性：微囊藻和節(jié)球藻毒素的濃度分別在8月份、9月份達(dá)到最高值，8

6、個采樣點(diǎn)中S5(米市渡)、S6(金山)的濃度較高，S8(南沙港)較低；而柱孢藻毒素12月份含量最高，以S7(松浦大橋)、S6(金山)的濃度較高，S1(淀山湖)、S8(南沙港)較低。自來水中，三類藻毒素也具有明顯的季節(jié)性，都是7-9月份濃度較高，7個采樣點(diǎn)中以徐匯和閔行的三類藻毒素最高，川沙的三類藻毒素含量最低。
　　 總體來說，上海市水源地源水及居民自來水中的微囊藻毒素的濃度都遠(yuǎn)遠(yuǎn)低于我國及WHO規(guī)定的1μg/L的安全標(biāo)準(zhǔn)，也低