農(nóng)產(chǎn)品中赭曲霉毒素A與嘔吐毒素的檢測(cè)方法研究.pdf

1、本論文對(duì)農(nóng)產(chǎn)品中赭曲霉毒素A與嘔吐毒素的檢測(cè)方法研究進(jìn)行了闡述。試驗(yàn)中分別對(duì)檢測(cè)赭曲霉毒素A與嘔吐毒素的高效液相色譜參數(shù)、農(nóng)產(chǎn)品中赭曲霉毒素A與嘔吐毒素的提取與凈化方法、改進(jìn)后的高效液相色譜法與薄層色譜法、酶聯(lián)免疫吸附檢測(cè)方法和我國(guó)進(jìn)出口出入境檢驗(yàn)檢疫局的研究人員建立的高效液相色譜法對(duì)比試驗(yàn)的研究進(jìn)行了探索。具體結(jié)果如下：
　　 選用谷物（大豆、小麥、大麥、玉米、大米）、酒類（白酒、啤酒）、速溶咖啡樣品各8批、豬配合飼料16批。

2、研究檢測(cè)以上各種樣品中赭曲霉毒素A的高效液相色譜方法，建立快速有效的前處理方法以及檢測(cè)過(guò)程中適宜的實(shí)驗(yàn)參數(shù)，并通過(guò)回收率、精密度、重復(fù)性、穩(wěn)定性試驗(yàn)和方法檢測(cè)限來(lái)說(shuō)明建立的高效液相方法是否具有較好的實(shí)用性。同時(shí)，將本試驗(yàn)改進(jìn)的高效液相色譜法與國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)薄層色譜法、ELISA方法、SN/T1746-2006進(jìn)出口大豆、油菜籽和食用植物油中赭曲霉毒素A的HPLC檢驗(yàn)方法進(jìn)行了回收率、精密度和檢測(cè)限對(duì)比。試驗(yàn)結(jié)果表明，在檢測(cè)OTA過(guò)程中，熒光檢

3、測(cè)器的激發(fā)波長(zhǎng)為333nm，發(fā)射波長(zhǎng)為460nm;色譜柱柱溫為30℃；采用乙腈-醋酸鈉(60:40)-1g/L十六烷基三甲基溴酸銨(pH=6.0)為檢測(cè)農(nóng)產(chǎn)品中OTA的流動(dòng)相，流速為1mL/min;分別選擇以氯仿-磷酸、1％聚乙二醇8000-5％NaHCO3和甲醇-3％碳酸氫鈉(1:1)+三氯甲烷溶液作為提取谷物與豬配合飼料、酒類（白酒、啤酒）和速溶咖啡中OTA的較為優(yōu)化的提取溶劑系統(tǒng)，選擇免疫親和柱凈化法檢測(cè)農(nóng)產(chǎn)品中的OTA具有較高回

4、收率。改進(jìn)的HPLC法的檢測(cè)限為0.53μg/kg（ELISA法為2.5μg/kg,SN/T法為1μg/kg）；精密度實(shí)驗(yàn)的相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)偏差(RSD)為0.91％；回收率實(shí)驗(yàn)中，大豆的回收率為90.8％～96.2％，小麥的回收率為92.5％～96％，大麥的回收率為93.0％～98.2％,玉米的回收率為92.7％～96.8％，大米的回收率為97.5％～99.2％，豬配合飼料的回收率為90.1％～97.2％，白酒的回收率≥99.0％，啤酒的回收

5、率≥98.5％，速溶咖啡的回收率≥97.3％。從檢測(cè)限、精密度和回收率對(duì)比得知，改進(jìn)的HPLC法優(yōu)于ELISA法、SN/T1746方法。
　　 選用谷物（大豆、小麥、大麥、玉米、大米）樣品各8批、豬、鴨配合飼料樣品各16批、酒類（白酒、啤酒）樣品各8批。研究檢測(cè)以上各種樣品中嘔吐毒素的高效液相色譜方法，并通過(guò)回收率、精密度、重復(fù)性、穩(wěn)定性試驗(yàn)和方法檢測(cè)限來(lái)說(shuō)明建立的高效液相方法是否具有較好的實(shí)用性。同時(shí)，與國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)薄層色譜法、E

6、LISA方法、SN/T1571-2005《進(jìn)出口糧谷中嘔吐毒素檢驗(yàn)方法液相色譜法》進(jìn)行了回收率、精密度和檢測(cè)限對(duì)比。試驗(yàn)結(jié)果表明，在檢測(cè)DON過(guò)程中，紫外檢測(cè)波長(zhǎng)為220nm;色譜柱柱溫選擇為35℃；選擇采用乙腈-水(84:16)為檢測(cè)農(nóng)產(chǎn)品中DON的流動(dòng)相，流速為0.5mL/min;選擇以乙腈-水(84:16)+NaCl作為提取谷物及豬鴨配合飼料、酒類（白酒、啤酒）中DON的較為優(yōu)化的提取溶劑系統(tǒng)，選擇免疫親和柱凈化法檢測(cè)農(nóng)產(chǎn)品中的D

7、ON具有較高回收率。改進(jìn)的HPLC法的檢測(cè)限為0.0175mg/kg（ELISA法為0.1mg/kg,SN/T法為0.040mg/kg）；精密度實(shí)驗(yàn)的相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)偏差(RSD)為0.36％；回收率實(shí)驗(yàn)中，大豆的回收率為95.6％～98.2％，小麥的回收率為93.8％～99.6％，大麥的回收率為93.0％～99.2％，玉米的回收率為95.5％～98.9％，大米的回收率為94.7％～99.9％，豬配合飼料的回收率為94.1％～99.7％，鴨配合