因子脅迫對櫛孔扇貝(Chlamys farreri)血細胞免疫響應(yīng)的影響.pdf

1、本論文研究了水溫突變、不同溫度干露、饑餓及繁殖后，櫛孔扇貝全血細胞數(shù)量、顆粒血細胞數(shù)量及比例的變化；以及不同溫度下兩種濃度鰻弧菌感染后，櫛孔扇貝血細胞數(shù)量、顆粒血細胞數(shù)量及血細胞6種免疫相關(guān)基因，脂多糖β-1,3葡聚糖結(jié)合蛋白（LGBP）、C-型凝集素（Lec-2）、Toll樣受體（TLR）、溶菌酶（LYZ）、超氧化物歧化酶（SOD）和酚氧化酶（PO）表達量的變化。
　　1．四種因子變化對櫛孔扇貝血細胞數(shù)量變化
　　血細胞及

2、其亞群的數(shù)量是櫛孔扇貝（Chlamys farreri）重要的免疫指標(biāo)之一。本章研究了櫛孔扇貝在17℃下，分別經(jīng)水溫突變（11℃、23℃、28℃），不同溫度（5℃、11℃、17℃、23℃）干露、饑餓和雌雄扇貝繁殖刺激，應(yīng)用以抗櫛孔扇貝全血細胞單抗、顆粒血細胞單抗分別為第一抗體的間接酶聯(lián)免疫吸附實驗和流式細胞術(shù)測定全血細胞數(shù)量、顆粒血細胞數(shù)量及比例的變化。結(jié)果表明：水溫突變后全血細胞數(shù)量均先增加然后逐漸下降，水溫變化幅度大全血細胞數(shù)量變化

3、較大，顆粒血細胞數(shù)量及比例在11℃組始終顯著高于對照組，23℃和28℃組表現(xiàn)出先下降后上升的趨勢。不同溫度干露后全血細胞和顆粒血細胞數(shù)量均顯著降低，海水恢復(fù)后5℃組較11℃、17℃組更接近對照組，23℃組干露12 h扇貝全部死亡。饑餓處理組、產(chǎn)卵或者排精后過夜全血細胞數(shù)量、顆粒血細胞數(shù)量及比例均顯著降低。結(jié)論認為：全血細胞及顆粒血細胞數(shù)量對溫度變化的反應(yīng)敏感；較低水溫有利于細胞數(shù)量的提升，較高水溫下細胞數(shù)量下降顯著；低溫干露后細胞數(shù)量恢

4、復(fù)較好，高溫干露扇貝存活率差。饑餓和繁殖壓力會導(dǎo)致全血細胞數(shù)量、顆粒血細胞數(shù)量及比例及減少。
　　2.弧菌感染后櫛孔扇貝血細胞數(shù)量及免疫相關(guān)基因表達的變化
　　本章研究了11℃、17℃、23℃、28℃下，櫛孔扇貝（Chlamys farreri）分別注射104、107 CFU/ml的鰻弧菌(Vibrio anguillarum)和PBS后，應(yīng)用以抗櫛孔扇貝全血細胞單抗和顆粒血細胞單抗分別為第一抗體的間接酶聯(lián)免疫吸附實驗（EL

5、ISA）測定全血細胞和顆粒血細胞數(shù)量的變化，同時應(yīng)用實時定量熒光PCR技術(shù)檢測免疫相關(guān)基因（LGBP、Lec-2、TLR、SOD、LYZ和PO）表達量的變化。結(jié)果表明：感染104 CFU/ml鰻弧菌全血細胞及顆粒血細胞數(shù)量無顯著變化；107 CFU/ml組全血細胞數(shù)量除28℃均顯著增加后下降，且23℃增加更明顯；28℃36 h下降至最低值然后增加；107 CFU/ml組顆粒血細胞數(shù)量均降低，溫度越高降低幅度越大；17℃、23℃基因的表達