在ox-LDL致內(nèi)皮細(xì)胞損傷中HSP22的保護作用及他汀的干預(yù)作用.pdf

1、目的:
　　研究熱休克蛋白22(HSP22)在ox-LDL致人臍靜脈內(nèi)皮細(xì)胞(HUVECs)損傷中的作用及他汀的干預(yù)作用,并探討其機制。
　　方法:
　　實驗分為三組:正常對照組、空質(zhì)粒轉(zhuǎn)染對照組(con組)、shRNA質(zhì)粒轉(zhuǎn)染組( shRNA組), con組在 HUVECs中加入 Lipo與空質(zhì)粒(pGcsi-U6/Neo/GFp/shRNA),shRNA組在HUVECs中加入Lipo及shRNA質(zhì)粒(pGcsi-U

2、6/Neo/GFp/shRNA/HSP22)。成功轉(zhuǎn)染后,各組分四個亞組:對照組、ox-LDL組、他汀組、他汀+ox-LDL組。采用MTT、Westernblot篩選合適的ox-LDL及阿托伐他汀干預(yù)濃度與時間。觀察ox-LDL誘導(dǎo)環(huán)境下HSP22的表達情況, ELISA檢測TNF-α表達情況,Western blot檢測eNOS、p38MAPK、erk、p-erk表達情況。
　　結(jié)果:
　　1、ox-LDL及阿托伐他汀合適

3、的干預(yù)時間與濃度:
　　(1)選定160μg/mlox-LDL干預(yù)48h時,HSP22表達最高(P<0.01),并對內(nèi)皮細(xì)胞有明顯抑制作用(P<0.05)。
　　(2)選定40μg/ml阿托伐他汀干預(yù)48h時,HSP22表達最低(P<0.01),且對內(nèi)皮細(xì)胞有明顯促進作用(P<0.05)。
　　2、HSP22蛋白的表達:在相同干預(yù)條件下,shRNA組HSP22蛋白表達明顯低于正常對照組與con組(P<0.01)。在各大

4、組中,ox-LDL組HSP22表達均明顯高于對照組及ox-LDL+他汀組(P<0.01)。
　　3、p38MAPK的表達:在相同干預(yù)條件下,shRNA組p38MAPK表達明顯高于正常對照組與con組(P<0.01)。在各大組中,ox-LDL組p38MAPK表達均高于對照組及ox-LDL+他汀組(P<0.01)。
　　4、erk、p-erk的表達:在相同干預(yù)條件下,shRNA組erk、p-erk表達均低于正常對照組與con組(

5、P<0.01)。在各大組中,ox-LDL組erk、p-erk表達均高于對照組及ox-LDL+他汀組(P<0.01)。
　　5、TNF-α的表達:在相同干預(yù)條件下,shRNA組 TNF-α表達顯著高于正常對照組與con組(P<0.01)。在各大組中,ox-LDL組TNF-α表達均明顯高于對照組及ox-LDL+他汀組(P<0.01)。
　　6、eNOS的表達:在相同干預(yù)條件下,shRNA組eNOS表達明顯低于正常對照組與con組

6、(P<0.01)。在各大組中,ox-LDL組eNOS表達均顯著低于對照組及ox-LDL+他汀組(P<0.01)。
　　結(jié)論:
　　1、ox-LDL損傷HUVECs可誘導(dǎo)HSP22表達。
　　2、在ox-LDL誘導(dǎo)環(huán)境下HSP22的保護作用可能與下調(diào)p38MAPK、上調(diào)erk抗凋亡有關(guān),與TNF-α抗炎有關(guān),與eNOS改善內(nèi)皮功能有關(guān)。
　　3、在ox-LDL誘導(dǎo)環(huán)境下他汀的保護作用可能與下調(diào)p38MAPK、erk