HSP22在肺缺血再灌注損傷中作用研究.pdf

1、[背景與目的]:在肺移植術(shù)、肺栓塞溶栓治療等臨床情況下，肺缺血再灌注損傷可引起急性肺功能不全，具有很高的發(fā)病率和死亡率。HSP22過表達在心肌缺血再灌注損傷中有保護作用，但其在肺缺血再灌注損傷中是否有保護作用未知。主要研究HSP22過表達在小鼠肺缺血再灌注損傷中的作用。
　　 [方法]:采用WesternBlot方法檢測HSP22轉(zhuǎn)基因C57BL小鼠和野生型C57BL小鼠肺組織中HSP22的表達情況。取HSP22轉(zhuǎn)基因C57BL

2、小鼠12只，隨機分為2組:假手術(shù)組、缺血再灌注組;野生型C57BL小鼠12只按相同方法分組:假手術(shù)組、缺血再灌注組。建立小鼠左肺原位缺血再灌注損傷模型。于缺血45分鐘并再灌注120分鐘后取動脈血行氧分壓測定，留取左肺組織標本分別測定各組肺組織濕干重比值，丙二醛(MDA)含量，作光鏡觀察組織形態(tài)變化，免疫組織化學方法觀察各組HSP22蛋白的表達情況，TUNEL法測定肺組織細胞凋亡的變化。
　　 [結(jié)果]:WesternBlot法檢

3、測轉(zhuǎn)基因小鼠肺組織中HSP22蛋白含量明顯高于野生型小鼠組(P＜0.05)，且表達量為野生型小鼠組的2.5倍。四組小鼠的動脈血氧分壓無統(tǒng)計學差異(P＞0.05)。WT-I/R組小鼠的濕干重比值、肺泡損傷指數(shù)較WT-SO組顯著升高(P＜0.01、P＜0.01)，TG-I/R組小鼠的濕干重比值、肺泡損傷指數(shù)較TG-SO組明顯升高(P＜0.05、P＜0.01)，均提示轉(zhuǎn)基因小鼠和野生型小鼠的肺缺血再灌注損傷模型成功建立。TG-I/R組小鼠的肺

4、組織濕干重比值、MDA含量、肺泡損傷指數(shù)較WT-I/R組明顯降低（均P＜0.05），提示過表達HSP22可減輕小鼠肺缺血再灌注損傷。免疫組化法示TG-I/R組小鼠HSP22積分光密度值較TG-SO組明顯升高(P＜0.01)，WT-I/R組小鼠HSP22積分光密度值較WT-SO組亦升高(P＜0.01)，說明缺血再灌注損傷時HSP22表達上調(diào)。TUNEL法結(jié)果示:WT-I/R組較WT-SO組小鼠肺組織細胞熒光強度增強，TG-I/R組也較TG

5、-SO組的熒光強度強，然而TG-I/R組較WT-I/R組熒光強度減弱，提示缺血再灌注損傷時細胞凋亡增加，但過表達HSP22可抑制損傷組織的細胞凋亡。
　　 [結(jié)論]:1.HSP22轉(zhuǎn)基因小鼠在F4代穩(wěn)定傳代，明確HSP22在轉(zhuǎn)基因小鼠的肺組織內(nèi)高表達。
　　 2.在國內(nèi)首次建立HSP22轉(zhuǎn)基因小鼠肺缺血再灌注損傷模型。
　　 3.過表達HSP22在肺缺血再灌注損傷中具有保護作用，可能的機制是HSP22抑制脂質(zhì)過氧