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1、目的:研究沙鼠腦缺血再灌注損傷后腦組織中Hsp22和HIF-1α表達的變化、神經(jīng)保護作用及二者之間有無相關(guān)性。 方法: (1)動物分組:健康雄性蒙古沙鼠45只,隨機分為三組:正常對照組,假手術(shù)組和腦缺血再灌注組中假手術(shù)組和腦缺血再灌注組又分為四個亞組:六小時組(6h),一天組(1d),三天組(3d)和七天組(7d)。 (2)模型制作:除了正常對照組之外其他動物都用3%戊巴比妥麻醉后做頸正中切口,分離雙側(cè)頸總動脈。
2、腦缺血再灌注組予以夾閉雙側(cè)頸總動脈十分鐘后再灌注恢復(fù)血流。假手術(shù)組僅分離雙側(cè)頸總動脈不予夾閉。在對應(yīng)時間點斷頭處死各組動物,快速取腦組織制作標(biāo)本。 (3)HE染色觀察腦組織的形態(tài)結(jié)構(gòu)。 (4)免疫組織化學(xué)染色觀察Hsp22和HIF-1α的表達情況。 (5)所有統(tǒng)計分析均用SPSS13.0完成。 結(jié)果: (1)腿染色:正常對照組和各假手術(shù)組的腦組織形態(tài)結(jié)構(gòu)沒有明顯的變化;腦缺血再灌注組根據(jù)時間點的不
3、同可見膠質(zhì)細胞增生、肥大,細胞間質(zhì)和細胞水腫,神經(jīng)元壞死。 (2)免疫組化染色Hsp22的表達:正常對照組和各假手術(shù)組的前腦皮質(zhì)均有Hsp22的表達,但表達很低。缺血再灌注后Hsp22的表達上調(diào),于第三天達到高峰,七天開始下降,但仍高于正常對照組和假手術(shù)組。 (3)免疫組化染色HIF-1α的表達:正常對照組和各假手術(shù)組的前腦皮質(zhì)偶可見HIF-1α的表達。缺血再灌注后表達明顯增高,于第三天達到高峰,七天開始下降,但仍明顯高
4、于正常對照組和假手術(shù)組。 (4)Hsp22和HIF-1α在缺血再灌注腦組織中的表達趨勢相同,呈正相關(guān)的關(guān)系。 結(jié)論: (1)首次觀察到Hsp22在缺血再灌注后的腦組織中表達升高并且可能通過其分子伴侶作用和自身激酶作用發(fā)揮神經(jīng)保護作用; (2)缺血再灌注后腦組織中HIF-1 α表達增高并且通過不同的機制減輕缺血再灌注導(dǎo)致的腦損傷; (3)缺血再灌注后腦組織中Hsp22和HIF-1α的表達具有一定的相
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