15脂氧合酶在阿托伐他汀干預(yù)內(nèi)皮細(xì)胞環(huán)境中的協(xié)調(diào)作用研究.pdf

1、目的:觀察在阿托伐他汀干預(yù)內(nèi)皮細(xì)胞功能中，15脂氧合酶的作用。
　　方法:建立人臍靜脈內(nèi)皮細(xì)胞(HUVECs)內(nèi)皮功能損傷模型。構(gòu)建慢病毒轉(zhuǎn)染的人臍靜脈內(nèi)皮細(xì)胞模型，分別為低表達(dá)組:siRNA-15LO，過表達(dá)組:Lv-15LO，空載體組:Lv-GFP。轉(zhuǎn)染48h后流式細(xì)胞儀測定轉(zhuǎn)染效率，qPCR和western blot測定15-LO的表達(dá)。轉(zhuǎn)染后試驗(yàn)細(xì)胞被分成6組:正常對照， ox-LDL組，ox-LDL+阿托伐他汀組，Lv-

2、GFP+ox-LDL+阿托伐他汀組，siRNA-15LO+ox-LDL+阿托伐他汀組，Lv-15LO+ox-LDL+阿托伐他汀組。通過亞硝酸鹽還原試驗(yàn)測定一氧化氮的表達(dá)，qPCR及western blot測定內(nèi)皮細(xì)胞一氧化氮合酶(eNOS)和細(xì)胞間粘附分子-1（ICAM-1）的表達(dá)。
　　結(jié)果:與對照組相比，ox-LDL組eNOSmRNA(0.41±0.03 vs1.00，P＜0.01)及蛋白質(zhì)水平（0.28±0.22 vs1.6

3、0±0.13，P＜0.01）明顯降低，細(xì)胞液中NO含量減少（1.71±0.17 vs4.79±0.24，P＜0.01），同時(shí)ICAM-1mRNA（4.45±0.23 vs1.00，P＜0.01）和蛋白質(zhì)水平（1.79±0.28 vs0.56±0.07，P＜0.01）均顯著增加。ox-LDL+阿托伐他汀組中的eNOSmRNA及蛋白水平顯著低于siRNA-15LO+ox-LDL+阿托伐他汀組（1.67±0.59 vs3.43±0.91, P

4、＜0.05），(1.07±0.06 vs1.95±0.09, P＜0.05),但高于Lv-15LO+ox-LDL+阿托伐他汀組(1.67±0.59 vs0.59±0.15，P＜0.05),(1.07±0.06 vs0.27±0.12, P＜0.05)。 ox-LDL+阿托伐他汀組中NO表達(dá)顯著低于siRNA-15LO+ox-LDL+阿托伐他汀組(2.73±0.17 vs4.40±0.54, P＜0.01)，高于Lv-15LO+ox-LD

5、L+阿托伐他汀組（2.73±0.17vs1.55±0.06，P＜0.01）; ICAM-1mRNA及蛋白的表達(dá)低于Lv-15LO+ox-LDL+阿托伐他汀組(0.71±0.01 vs1.61±0.06, P＜0.05),（0.88±0.08 vs2.01±0.50, P＜0.05），高于siRNA-15LO+ox-LDL+阿托伐他汀組（0.71±0.01 vs0.25±0.05,P＜0.05），(0.88±0.08 vs0.32±0.0