糖皮質(zhì)激素和硼替佐米體外干預(yù)對(duì)多發(fā)性骨髓瘤細(xì)胞BAFF-APRIL表達(dá)的影響.pdf

1、研究背景：多發(fā)性骨髓瘤是常見(jiàn)的血液惡性腫瘤。它以單克隆漿細(xì)胞惡性增殖伴特征性骨損、血細(xì)胞減少、腎功能不全及體液免疫受損為特點(diǎn)。新藥的介入，如沙利度胺、雷利度胺以及萬(wàn)珂等，使疾病預(yù)后近年來(lái)有所改善。因此進(jìn)一步探討多發(fā)性骨髓瘤的發(fā)病機(jī)制，尋求新的治療靶點(diǎn)，變得越來(lái)越重要。
　　 腫瘤壞死因子家族成員B細(xì)胞活化因子(BAFF)及增殖誘導(dǎo)配體(APRIL)能有效的促進(jìn)正常B細(xì)胞和惡性B細(xì)胞的生長(zhǎng)和長(zhǎng)期存活，同時(shí)對(duì)漿細(xì)胞也有類似作用。我們

2、的前期研究認(rèn)為BAFF和APRIL基因和蛋白在MM表達(dá)明顯升高，且可能與MM患者腫瘤負(fù)荷成正相關(guān)。因此淋系增殖因子BAFF/APRIL與多發(fā)性骨髓瘤細(xì)胞存活有著密切的關(guān)系。
　　 糖皮質(zhì)激素和硼替佐米是臨床上重要的多發(fā)性骨髓瘤治療藥物，它們能顯著抑制瘤細(xì)胞的生長(zhǎng)和增殖。在本研究中將糖皮質(zhì)激素和硼替佐米作用于U266骨髓瘤細(xì)胞株和患者骨髓單個(gè)核細(xì)胞(BMMNCs)，對(duì)BAFF/APRIL的基因表達(dá)進(jìn)行檢測(cè)。
　　 目的：觀

3、察糖皮質(zhì)激素和硼替佐米對(duì)BMMNCs和U266骨髓瘤細(xì)胞株干預(yù)前后BAFF/APRIL的基因表達(dá)，以了解BAFF/APRIL在藥物干預(yù)下的基因表達(dá)變化。探討兩種藥物可能的抑瘤機(jī)制。
　　 方法：在對(duì)U266細(xì)胞進(jìn)行MTT檢測(cè)的基礎(chǔ)上，選擇地塞米松、甲基強(qiáng)的松龍及硼替佐米合適的藥物濃度作用于U266細(xì)胞和7例初治MM患者BMMNCs，根據(jù)MTT結(jié)果選擇最合適的作用時(shí)間(48小時(shí))，提取RNA經(jīng)過(guò)逆轉(zhuǎn)錄后用realtime PCR檢

4、測(cè)在不同藥物及濃度干預(yù)時(shí)細(xì)胞株和病人原代細(xì)胞BAFF/APRIL基因表達(dá)變化。
　　 結(jié)果：1)MTT結(jié)果顯示地塞米松、甲基強(qiáng)的松龍及硼替佐米均抑制U266細(xì)胞，以時(shí)間及濃度依賴方式。與硼替佐米聯(lián)用后，地塞米松和甲基強(qiáng)的松龍對(duì)U266細(xì)胞的抑制率均有明顯升高，與單用地塞米松及甲基強(qiáng)的松龍相比有顯著性差異。地塞米松、甲基強(qiáng)的松龍單獨(dú)干預(yù)U266細(xì)胞48小時(shí)后，抑制細(xì)胞生長(zhǎng)的IC50分別為93.33 ug/ml和206.54ug/m

5、l。顯示體外條件下，U266細(xì)胞可能對(duì)地塞米松敏感性高于甲基強(qiáng)的松龍。2)U266細(xì)胞及7例初治的MM病人均高表達(dá)BAFF/APRIL基因。3)地塞米松，甲級(jí)強(qiáng)的松龍，硼替佐米單獨(dú)作用于U266細(xì)胞后，BAFF/APRIL基因表達(dá)較未干預(yù)前降低(P<0.01)，其中硼替佐米干預(yù)后BAFF/APRIL表達(dá)最低(P<0.05)。4)地塞米松或甲基強(qiáng)的松龍和硼替佐米聯(lián)用后BAFF/APRIL基因表達(dá)較單獨(dú)干預(yù)時(shí)低(P<0.01)；地塞米松和硼

6、替佐米聯(lián)用干預(yù)后，BAFF/APRIL基因表達(dá)的抑制強(qiáng)度大于甲基強(qiáng)的松龍和硼替佐米聯(lián)用的抑制強(qiáng)度(P<0.05)。
　　 結(jié)論：糖皮質(zhì)激素和硼替佐米對(duì)骨髓瘤細(xì)胞都有抑制作用，且呈時(shí)間和濃度依賴性，聯(lián)用后有抑瘤作用相加效應(yīng)。糖皮質(zhì)激素和硼替佐米干預(yù)后的骨髓瘤細(xì)胞，BAFF/APRIL基因表達(dá)下降，結(jié)果提示糖皮質(zhì)激素和硼替佐米除了存在已知的GR和蛋白酶體作用靶點(diǎn)外，可能還存在BAFF/APRIL及其受體這種新的作用位點(diǎn)，從而增強(qiáng)了藥