EGFR抑制劑N-[3-(2-嘧啶氨基)苯基]丙烯酰胺類化合物的設(shè)計(jì)、合成及活性研究.pdf

1、表皮生長(zhǎng)因子受體(EGFR, ErbB)是Ⅰ類表皮生長(zhǎng)因子家族的細(xì)胞外蛋白配體的細(xì)胞表面受體，具有酪氨酸激酶活性，是一種重要的跨膜受體。EGFR的高表達(dá)可以促進(jìn)腫瘤細(xì)胞的增殖、血管生成、黏附、侵襲和轉(zhuǎn)移，因此EGFR酪氨酸激酶抑制劑成為了抗腫瘤藥物研究的熱點(diǎn)。
　　研究認(rèn)為EGFR基因T790M位點(diǎn)的突變是此類藥物耐藥的主要誘因，為了克服現(xiàn)有藥物的耐藥原因，本論文以EGFR抑制劑AZD-9291為先導(dǎo)化合物，進(jìn)行結(jié)構(gòu)修飾，旨在發(fā)現(xiàn)

2、活性好、對(duì)耐藥腫瘤選擇性高的EGFR抑制劑。
　　在EGFR抑制劑信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)機(jī)理的指導(dǎo)下，通過對(duì)嘧啶丙烯酰胺類酪氨酸激酶小分子抑制劑構(gòu)效關(guān)系的研究，結(jié)合EGFR抑制劑AZD-9291的結(jié)構(gòu)特征，同時(shí)對(duì)AZD-9291與EGFR晶體結(jié)合位點(diǎn)進(jìn)行分析，進(jìn)行目標(biāo)化合物的設(shè)計(jì)。在保持N-[3-(2-嘧啶氨基)苯基]丙烯酰胺主體結(jié)構(gòu)不變的基礎(chǔ)上，設(shè)計(jì)了三個(gè)系列化合物，A系列以小分子氮雜環(huán)取代AZD-9291中的吲哚環(huán)，B、C系列以鏈狀的芳香環(huán)

3、取代AZD-9291中的吲哚環(huán)。在參考AZD-9291合成方法的基礎(chǔ)上，進(jìn)行實(shí)驗(yàn)條件的優(yōu)化，合成了A、B和C三個(gè)系列11個(gè)目標(biāo)化合物，均未被文獻(xiàn)報(bào)道，并經(jīng)1HNMR和LCMS確認(rèn)。
　　以AZD-9291作為陽(yáng)性對(duì)照藥，對(duì)目標(biāo)化合物進(jìn)行突變的EGFRT790M活性測(cè)試。藥理篩選結(jié)果表明，化合物A1、A2和C2具有很好的抑制EGFRT790M活性，其IC50在2.5nM～2.9nM之間。進(jìn)一步對(duì)這三個(gè)化合物進(jìn)行野生的EGFRWT活性

4、測(cè)試，結(jié)果發(fā)現(xiàn)其IC50在18.4nM～154 nM之間;而AZD-9291對(duì)EGFRT790M和EGFRWT的IC50活性分別為0.6nM和1.7nM。這三個(gè)化合物對(duì)于EGFRT790M的選擇性優(yōu)于陽(yáng)性對(duì)照藥AZD-9291，分別提高了20.1倍、20.7倍和2.2倍。
　　對(duì)化合物A1和A2進(jìn)行突變型EGFR癌細(xì)胞株NCI-H1975T790M細(xì)胞和野生型EGFR癌細(xì)胞株細(xì)胞增殖抑制活性的測(cè)試，發(fā)現(xiàn)其對(duì)NCI-H1975T79

5、0M細(xì)胞的IC50分別為71.3nM和142.8nM，對(duì)A431WT細(xì)胞抑制活性分別為2138.5nM和2578nM，對(duì)NCI-H1975T790M細(xì)胞的選擇性比A431 WT細(xì)胞分別大30倍和18倍。化合物A1的選擇性比化合物AZD-9291高1.7倍。
　　結(jié)論:合成的目標(biāo)化合物A1、A2和C2具有較好的EGFRT790M抑制活性和選擇性，且化合物A1對(duì)突變的NCI-H1975T790M細(xì)胞也具有很好的活性和選擇性，可以作為候