柴樸湯對(duì)氣道上皮細(xì)胞中MAL表達(dá)的調(diào)控作用.pdf

1、目的:闡明柴樸湯調(diào)控氣道上皮細(xì)胞表達(dá) T細(xì)胞成熟相關(guān)蛋白(T-lymphocyte maturationassociated protein T,MAL)的分子機(jī)制,明確柴樸湯上調(diào)MAL能減少氣道上皮細(xì)胞分泌轉(zhuǎn)化生長(zhǎng)因子-β1(Transfoming growth factor-β1,TGF-β1)。
　　方法:健康雄性SD大鼠32只，體重(250±10) g，隨機(jī)分為4組，每組各8只，即柴樸湯高（3.00g/kg）、中（1.50

2、g/kg）、低（0.75g/kg）劑量組、生理鹽水組，一日2次，連續(xù)7天灌胃。所取血清分別為柴樸湯高、中、低劑量血清組、生理鹽水血清組。健康雄性SD大鼠32只，體重(250±10)g，卵蛋白、氫氧化鋁致敏，復(fù)制哮喘模型后，分離血清為哮喘血清組，并取肺組織行 HE染色。取生長(zhǎng)良好的大鼠氣道上皮細(xì)胞進(jìn)行實(shí)驗(yàn)分組，共分5組： A組（正常血清組），B組（柴樸湯高劑量血清組+哮喘血清組）、C組（柴樸湯中劑量血清組+哮喘血清組）、D組（柴樸湯低劑量

3、血清組+哮喘血清組）、E組（生理鹽水血清組+哮喘血清組）、F組（哮喘血清組）。用半定量 RT-PCR檢測(cè) RTE中MAL、TLR-4、NF-κB、TGF-β1mRNA的表達(dá)。用免疫細(xì)胞化學(xué)檢測(cè)MAL、TLR-4、NF-κB、TGF-β1蛋白在氣道上皮細(xì)胞中的表達(dá)。
　　結(jié)果:
　　1、大鼠肺組織病理變化情況
　　正常大鼠氣道管壁結(jié)構(gòu)完整，周圍無炎癥細(xì)胞浸潤(rùn)，肺泡結(jié)構(gòu)形態(tài)未見破壞；哮喘模型組大鼠氣道壁及平滑肌明顯增厚，管

4、腔變窄，大部分肺泡破壞、融合，肺泡腔擴(kuò)大，肺泡間隔斷裂。
　　2、大鼠氣道上皮細(xì)胞中MAL、TLR-4、NF-κB、TGF-β1mRNA和蛋白的表達(dá)水平
　　MAL mRNA和蛋白在A組中表達(dá)最強(qiáng)，與其余組比較差異有顯著性（P＜0.05）；哮喘血清干預(yù)后 E、F組MALmRNA和蛋白明顯減弱；柴樸湯血清干預(yù)后B、C、D組MALmRNA和蛋白較E、F組有所增強(qiáng)（P<0.05），B、C、D組分別與E、F組比較差異有顯著性（P＜0

5、.05）。
　　TLR-4、NF-κB、TGF-β1mRNA和蛋白在A組表達(dá)最弱，與其余組比較差異有顯著性（P＜0.05）；哮喘血清組干預(yù)后E、F組TLR-4、NF-κB、TGF-β1mRNA和蛋白的表達(dá)明顯增強(qiáng)，均高于柴樸湯干預(yù)后B、C、D組（P<0.05）。B、C、D組TLR-4、NF-κBmRNA和蛋白的表達(dá)分別與E、F組比較差異有顯著性（P＜0.05）。B、C組TGF-β1mRNA和蛋白的表達(dá)分別與E、F組比較差異有顯著性