小窩蛋白1對氣道上皮細(xì)胞黏液高分泌的影響.pdf

1、目的：探討小窩蛋白1(Cav-1)對脂多糖(LPS)誘導(dǎo)的氣道黏液高分泌的影響。
　　方法：體外培養(yǎng)人氣道上皮細(xì)胞（16HBE），用 LPS刺激細(xì)胞構(gòu)建黏液高分泌模型，以Toll樣受體4（TLR4）抑制劑E5564、核轉(zhuǎn)錄因子-κB（NF-κB）抑制劑PDTC、轉(zhuǎn)染Cav-1質(zhì)粒和siRNA為干預(yù)因素，將細(xì)胞隨機(jī)分為對照組、LPS刺激組、LPS+Cav-1質(zhì)粒組、LPS+Cav-1 siRNA組、LPS+陰性siRNA組、LPS+

2、空質(zhì)粒組、LPS+ E5564組及LPS+PDTC組。四甲基偶氮唑鹽法（MTT）檢測各組細(xì)胞的活力；RT-PCR檢測粘蛋白（MUC）5AC的轉(zhuǎn)錄水平；western blot檢測Cav-1、TLR4、磷酸化IκBα(p-IκBα)蛋白的相對含量；ELISA檢測MUC5AC的分泌水平；激光共聚焦技術(shù)檢測細(xì)胞內(nèi)MUC5AC蛋白的分布和含量。
　　結(jié)果：LPS刺激組細(xì)胞內(nèi)TLR4、p-IκBα、NF-κB、MUC5AC轉(zhuǎn)錄及蛋白水平和對

3、照組相比較顯著增高（P值均<0.05），過表達(dá) Cav-1可進(jìn)一步增加上述指標(biāo)的表達(dá)量，而下調(diào)Cav-1及給予E5564、PDTC可以抑制LPS引起的上述效應(yīng)（P<0.05）。
　　結(jié)論：
　　（1）在16HBE中LPS可以誘導(dǎo)MUC5AC高分泌
　?。?）TLR4/NF-κB信號通路參與LPS所誘導(dǎo)的MUC5AC高分泌的調(diào)控。
　?。?）Cav-1可通過上調(diào)TLR4/NF-κB信號通路而加重LPS誘導(dǎo)的MUC5