硫芥和燒傷對大鼠小腸的聯(lián)合損傷作用研究.pdf

1、硫芥是外軍裝備的最重要的化學(xué)戰(zhàn)劑，既往研究發(fā)現(xiàn)，硫芥全身吸收中毒可引起消化道損傷，進而加重傷員的臨床反應(yīng)。硫芥全身吸收中毒引起的消化道損傷主要表現(xiàn)在腸道，其中又以小腸最敏感。中毒程度越嚴(yán)重，腸道損傷越明顯。因此，小腸是硫芥中毒的危象器官之一。另有大量研究證實，燒傷后由于應(yīng)激反應(yīng)腸粘膜屏障受到損害，而燒傷后腸上皮機械屏障和粘膜免疫屏障的損害是腸源性感染發(fā)生的主要因素，并可加劇傷者的病情進而導(dǎo)致死亡?，F(xiàn)代戰(zhàn)爭條件下，若遭受敵人的多武器復(fù)合襲

2、擊，不僅可以發(fā)生單純硫芥中毒，也可能造成硫芥中毒合并熱燒傷的化學(xué)毒劑復(fù)合傷，而該類復(fù)合傷對腸道的損傷情況尚未見報道，這為硫芥中毒的救治研究增加了更大的難度。 目的: 我們以大鼠小腸為研究目標(biāo)，從單純燒傷、單純硫芥中毒及硫芥復(fù)合燒傷情況下研究其對整體動物及小腸的影響，以進一步明確硫芥中毒及其相應(yīng)復(fù)合傷所致的消化道損傷的可能機制，初步探討致傷條件下乙酰半胱氨酸(NAC)對腸上皮細(xì)胞的保護作用，以期為硫芥中毒及復(fù)合燒傷的臨床救

3、治提供理論依據(jù)。 方法: (1)建立大鼠硫芥中毒復(fù)合燒傷的在體致傷模型，運用改良寇氏法測定硫芥的LD50，以明確復(fù)合傷對動物的整體損傷情況。(2)采用HE染色、電鏡、免疫組化、紫外分光光度計法、逆轉(zhuǎn)錄聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)(RT-PCR)等實驗技術(shù)，觀察到單純硫芥、燒傷及硫燒復(fù)合傷對大鼠致傷后，腸道組織的形態(tài)學(xué)和超微結(jié)構(gòu)的改變、腸道通透性改變、腸上皮細(xì)胞凋亡發(fā)生情況、氧化應(yīng)激狀態(tài)的變化特點。(3)建立乙酰半胱氨酸(NAC)干預(yù)模

4、型，采用HE染色、電鏡、免疫組化、紫外分光光度計法、逆轉(zhuǎn)錄聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)(RT-PCR)等實驗技術(shù)，觀察致傷大鼠腸道組織的形態(tài)學(xué)和超微結(jié)構(gòu)的改變、腸道通透性改變、腸上皮細(xì)胞凋亡發(fā)生情況、氧化應(yīng)激狀態(tài)的變化特點。 結(jié)果: (1)成功建立大鼠硫芥中毒復(fù)合燒傷的在體致傷模型，大鼠皮下硫芥中毒及硫芥中毒復(fù)合燒傷情況下的LD50分別為：11.42mg/kg和4.98mg/kg，其95％可信限分別為：11.00～11.86mg/kg

5、和4.32～5.74mg/kg。(2)采用4mg/kg硫芥染毒，傷后72h內(nèi)單純及復(fù)合燒傷均導(dǎo)致大鼠體重減少，小腸含水量、通透性增加，小腸組織結(jié)構(gòu)損傷明顯，單純硫芥中毒組24h出現(xiàn)明顯損傷，復(fù)合傷組則在12h即有明顯損傷，Bcl-2表達減少，大鼠血漿MDA含量、DAO活性顯著上升，SOD活力明顯下降，損傷程度與損傷時間呈正相關(guān)，復(fù)合傷組的改變較同時相點單純損傷組強烈。(3)采用5mg/kg、6mg/kg硫芥染毒大鼠72h，上述指標(biāo)較同時

6、相點4mg/kg硫芥染毒時改變更為劇烈。(4)采用NAC可部分改善上述指標(biāo)，減輕腸粘膜組織的病理學(xué)改變，維護腸粘膜屏障的完整性。 結(jié)論: 上述結(jié)果提示：(1)硫芥全身中毒早期，小腸即受到損傷，其損傷程度隨致傷時間的增加而加重，隨硫芥染毒劑量的增加而加重。硫芥中毒復(fù)合燒傷導(dǎo)致的小腸損傷均較單純中毒更為嚴(yán)重，復(fù)合傷加劇了動物的死亡。(2)單純致傷或硫芥復(fù)合燒傷均可導(dǎo)致腸上皮細(xì)胞的凋亡，進而導(dǎo)致腸上皮細(xì)胞死亡，該過程伴隨有全身