甘氨酸對燒傷大鼠器官功能保護作用的研究.pdf

1、大面積燒傷所產(chǎn)生的病理變化不僅發(fā)生在皮膚和皮下等直接受熱力損傷的組織和器官，還可引起全身各系統(tǒng)臟器的一系列變化。MODS已經(jīng)成為燒傷患者的主要死亡原因。目前，對于MODS還沒有公認的特異性治療方法，還是以預防為主。近年來大量研究表明，燒傷后早期腸內(nèi)營養(yǎng)對胃腸道粘膜有明顯的保護作用，可防止應(yīng)激性潰瘍，胃腸道出血及腸道細菌毒素移位，能明顯降低傷后的高分解代謝，改善全身營養(yǎng)狀況。目前研究較多的是免疫營養(yǎng)制劑谷氨酰胺、精氨酸等。最近證實，甘氨酸

2、能夠?qū)箖?nèi)毒素血癥、失血性休克、中毒性休克和膿毒癥等損傷，改善內(nèi)毒素等因素引起的抗炎/致炎免疫失衡，對抗可能發(fā)生的MODS。 目的：探討嚴重燒傷大鼠應(yīng)用甘氨酸拮抗內(nèi)毒素、保護臟器功能的作用。 方法： 1.實驗動物造模及分組：Wistar大鼠96只(北京軍事醫(yī)學科學院實驗動物中心)，雌雄不拘，大鼠造成20％深I(lǐng)I度以上燒傷，傷后6h腹腔注射乳酸林格氏液(40ml/kg)延遲復蘇，復蘇后3h腹腔注射LPS溶液10mg

3、/kg，治療組在LPS攻擊的同時分別給予濃度為1g/3ml的Gln溶液、Gly溶液(日本味之素公司)灌胃。于相應(yīng)時相點活殺動物，留取血液以及各器官組織標本。將動物按實驗設(shè)計隨機分為4組：單純燒傷組(A組)；燒傷+LPS攻擊組(B組)；燒傷+LPS攻擊+谷氨酰胺治療組(C組)；燒傷+LPS攻擊+甘氨酸治療組(D組)，每組再分為四個亞組，即傷后3h、6h、12h、24h，各時相點n=6。 2.實驗動物血漿內(nèi)毒素水平測定：采用鱟試劑基

4、質(zhì)顯色定量測定各處理組大鼠血漿LPS含量。 3.實驗動物肝、腎功能測定：應(yīng)用全自動生化分析儀對留取實驗動物血漿BUN、Cr、ALP、ALT水平測定。 4.組織病理形態(tài)學檢查：實驗動物活殺后取肺、肝、腎組織，以15％福爾馬林固定，而后經(jīng)AF液固定4小時，80％乙醇4小時，95％乙醇10小時，無水乙醇I、無水乙醇II和丙酮各1小時逐級脫水；二甲苯I和二甲苯II各40分鐘透明；浸蠟包埋。最后，蠟塊經(jīng)Leitz1516切片機切5

5、um厚切片，常規(guī)HE染色，然后光鏡下觀察組織形態(tài)改變。 結(jié)果： 1.各組大鼠血漿LPS水平的變化：各組血漿LPS水平3h均升高，A組3h為峰值，B組6h達峰值，C、D組均在12h達峰值，其中B組6h顯著高于24h(P<0.05)。各組血漿LPS水平均在24h回落，B組LPS水平在各時相點均顯著高于A、C、D組(P<0.05)；C組、D組比較無顯著性差異(P>0.05)。 2.不同實驗條件下實驗動物肝腎功能的變化：

6、大鼠單純燙傷后，肝、腎功能在24小時內(nèi)輕度異常，LPS攻擊后肝、腎功能顯著異常，LPS攻擊同時給予Gln或Gly灌胃后，肝、腎功能有所好轉(zhuǎn)。 3.實驗動物在不同實驗條件下臟器組織病理形態(tài)學改變：大鼠單純燙傷后肝、腎、肺各臟器在24小時后從總體上均呈現(xiàn)間質(zhì)淤血、炎癥反應(yīng)的病理形態(tài)學改變，表現(xiàn)為：肺間質(zhì)血管擴張淤血，部分肺泡間隔增寬，少量中性粒細胞浸潤；肝淤血，部分肝細胞空泡變性，肝竇擴張淤血，中央靜脈淤血；腎間質(zhì)血管擴張、充血，小

7、灶性出血局部腎小管上皮細胞變性，個別腎小球萎縮。LPS攻擊后各器官淤血、炎癥反應(yīng)加重，甚至有些組織出現(xiàn)局灶性壞死。而同時給Gln或Gly灌胃治療后，各器官淤血、炎癥反應(yīng)程度明顯減輕。Gln、Gly治療效果無明顯差別。 結(jié)論： 1.成功復制了20％深I(lǐng)I度大鼠燒傷模型和燒傷后MODS大鼠模型，觀察B、C、D組各時相點血漿LPS水平及肝腎功能指標水平均顯著高于A組。 2.GLn、Gly具有器官功能保護作用。能降低燒傷