萊菔硫烷對(duì)汞致大鼠腎損傷保護(hù)作用的實(shí)驗(yàn)研究.pdf

1、目的:汞是一種危險(xiǎn)的工業(yè)和環(huán)境污染物，人和動(dòng)物均有機(jī)會(huì)暴露并可引起明顯的中毒性改變。汞的毒性取決于汞存在的形式，其中無(wú)機(jī)汞主要蓄積在腎臟中，可以引起急性腎衰竭等改變。無(wú)機(jī)汞在腎臟中的攝取、蓄積和毒性與其可與內(nèi)源性含硫醇分子相結(jié)合有關(guān)，汞離子與硫醇基的結(jié)合可能導(dǎo)致抗氧化酶活性降低，導(dǎo)致活性氧水平增加，例如超氧化物陰離子自由基、過(guò)氧化氫等，從而引發(fā)脂質(zhì)、蛋白質(zhì)、脫氧核糖核酸和核糖核酸氧化。萊菔硫烷是一種異硫氰酸鹽，可在十字花科蔬菜中提取，具

2、有抗氧化和抗腫瘤等生物特性。萊菔硫烷已被廣泛用作化學(xué)預(yù)防藥物，并應(yīng)用于多項(xiàng)研究中。同時(shí)在食物中，萊菔硫烷也被證實(shí)具有很強(qiáng)的激活核轉(zhuǎn)錄因子Nrf2的能力。目前，應(yīng)用萊菔硫烷對(duì)汞中毒的預(yù)防和治療機(jī)理的研究十分少見(jiàn)，我們?cè)谟^察汞所致機(jī)體損傷的同時(shí)，探討萊菔硫烷對(duì)汞所致腎臟的損傷是否具有保護(hù)作用。
　　研究方法:健康成年wistar大鼠60只，雌雄各半，體重180±10 g，按體重隨機(jī)分組，每組12只，即為1組為對(duì)照組、2組為低劑量染汞組

3、(0.6 mg/kg HgCl2)、3組為中劑量染汞組（1.2 mg/kg HgCl2）、4組為高劑量染汞組（2.4 mg/kg HgCl2）、5組為SFN干預(yù)組（2 mg/kg SFN+2.4 mg/kg HgCl2）。正式實(shí)驗(yàn)時(shí)，1-4組皮下注射生理鹽水，5組皮下注射2 mg/kg SFN。2h后，1組腹腔注射生理鹽水，2-5組分別腹腔注射0.6、1.2、2.4、2.4 mg/kg HgCl2，注射容量5 ml/kg。干預(yù)及染毒持續(xù)

4、3天。最后一次染毒結(jié)束后，將大鼠置于代謝籠內(nèi)，測(cè)定尿液中汞及尿蛋白含量，尿液中β-N-乙酰氨基葡萄糖苷酶(NAG)、堿性磷酸酶(ALP)和乳酸脫氫酶(LDH)活力;乙醚麻醉大鼠，腹主動(dòng)脈采血測(cè)定血清尿素氮(BUN)含量;處死大鼠，切取大鼠腎皮質(zhì)，測(cè)定腎皮質(zhì)中汞含量和谷胱甘肽(GSH)、丙二醛(MDA)水平及超氧化物歧化酶(SOD)、谷胱甘肽過(guò)氧化物酶(GSH-Px)活力;測(cè)定腎皮質(zhì)細(xì)胞ROS水平和凋亡率;測(cè)定腎皮質(zhì)Nrf2、HO-1、γ

5、-GCS、Gpx-1的mRNA和蛋白表達(dá)水平。所得實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)用(x)±s表示，采用單因素方差分析及q檢驗(yàn)對(duì)數(shù)據(jù)進(jìn)行統(tǒng)計(jì)學(xué)處理，以P＜0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。
　　結(jié)果:大鼠染毒后，與對(duì)照組相比，各劑量染汞組腎皮質(zhì)汞含量和尿汞含量顯著升高（P＜0.01）， NAG、ALP和LDH活力均顯著升高（P＜0.05或P＜0.01），尿蛋白和BUN含量均顯著升高（P＜0.01），GSH含量均顯著升高(P＜0.01)，SOD和GSH-Px活力

6、均明顯降低(P＜0.05或P＜0.01)，MDA含量顯著升高(P＜0.01)，大鼠腎皮質(zhì)細(xì)胞內(nèi)ROS平均熒光強(qiáng)度明顯升高(P＜0.01)，細(xì)胞凋亡水平顯著升高(P＜0.01)，大鼠腎皮質(zhì)Nrf2、HO-1、γ-GCS mRNA及蛋白表達(dá)水平均升高(P＜0.05或P＜0.01)，Gpx-1的mRNA及蛋白表達(dá)水平均下降(P＜0.05)。大鼠經(jīng)SFN干預(yù)后，與2.4 mg/kg HgCl2組相比，SFN干預(yù)組腎皮質(zhì)汞含量和尿汞含量無(wú)顯著性差

7、異（P＞0.05），而尿蛋白和BUN含量，NAG、ALP和LDH活力、GSH含量均顯著降低（P＜0.05或P＜0.01），SOD和GSH-Px活力均明顯升高(P＜0.01)，MDA含量顯著降低（P＜0.01），大鼠腎細(xì)胞內(nèi)ROS平均熒光強(qiáng)度，細(xì)胞凋亡水平顯著降低(P＜0.05或P＜0.01)，大鼠腎皮質(zhì)Nrf2、HO-1、γ-GCS及Gpx-1 mRNA和蛋白表達(dá)水平均升高(P＜0.01)。
　　結(jié)論:
　　1大鼠經(jīng)3天染汞