中藥腎華對5-6腎切除大鼠腎保護作用的實驗研究.pdf

1、背景與目的：各種慢性腎臟病進展至慢性腎衰的病理改變均以彌漫性腎小球硬化和間質(zhì)纖維化為特征。健存腎單位代償性增生和高濾過導致腎小球硬化和間質(zhì)纖維化進一步加重。血管緊張素轉(zhuǎn)化酶抑制劑(ACEI)和血管緊張素Ⅱ受體阻斷劑(ARB)可以打破這一惡性循環(huán)，延緩疾病的進展。近來年發(fā)現(xiàn)腎臟局部的炎癥反應與腎小球、腎小管間質(zhì)及腎功能的損傷程度密切相關。無論是免疫機制還是非免疫機制啟動的腎損傷，多數(shù)都伴有大量炎細胞浸潤。局部浸潤的炎細胞和活化的腎臟固有細

2、胞可以產(chǎn)生多種細胞因子，促進腎小球硬化和間質(zhì)纖維化的進程。因此抑制腎臟局部的免疫炎癥反應可能是延緩慢性腎病進展的有效方法。治療慢性腎炎的中成藥腎華片含有多種具有免疫調(diào)節(jié)作用的成分。前期研究表明腎華可以抑制腎炎模型大鼠的炎癥反應和系膜細胞增殖，減少細胞外基質(zhì)的積聚。因此，我們推測腎華可以通過抑制腎臟局部的炎癥反應、細胞因子的表達，延緩慢性腎病的進展。為此，本文首先觀察腎華對5/6腎切除模型大鼠慢性腎損害的療效，然后以腎臟局部的炎癥反應和細

3、胞因子為切入點探討其作用機制。 材料與方法：雄性Wistar大鼠隨機分為假手術組和手術組。手術組采用兩步法制備5/6腎切除模型后，再隨機分為模型對照組、伊貝沙坦組和腎華高、中、低劑量組。伊貝沙坦組和腎華高、中、低劑量組分別給予伊貝沙坦20mg.kg-1，腎華2，1，0.5g.kg-1，假手術組和模型對照組給予相應量的蒸餾水，共治療12周。觀察大鼠的一般情況、體重、血壓、尿蛋白、血清膽固醇、甘油三酯、血清白蛋白、血清總蛋白、殘腎-

4、體重指數(shù)以及腎臟病理改變，并采用Northernblotting，Westernblotting和免疫組化法檢測腎組織中單核巨噬細胞抗原(ED-1)、增殖細胞核抗原(PCNA)、α-平滑肌肌動蛋白(α-SMA)、巨噬細胞移行抑制因子(MIF)、轉(zhuǎn)化生長因子β1(TGF-β1)，成纖維細胞生長因子(FGF-2)、結(jié)締組織生長因子(CTGF)和Ⅰ型膠原(COL-1)的表達。 結(jié)果：與模型對照組比較，腎華片可以顯著改善模型大鼠的一般情

5、況，降低24h尿蛋白排泄量(68.18±14.99mg/24hvs.120.47±45.13mg/24h，P＜0.01)，血清肌酐(67±5.90μmol/Lvs.193.44±106.78μmol/L，P＜0.05)，血清膽固醇濃度(2.85±0.41mmol.L-1vs.3.86±1.36mmol.L-1，P＜0.05)，升高血清白蛋白(30.43±3.57g.L-1vs.22.17±3.78g.L-1P＜0.05)，減輕腎小球硬化

6、(0.49±0.11vs.0.19±0.08，P＜0.05)及腎小管間質(zhì)病變(0.63±0.37vs.1.26±0.58，P＜0.05)程度，降低平均腎小球截面積，平均腎小球體積[(1.70±0.07)×106μm3vs.(2.12±0.06)×106μm3]和殘余腎臟的重量，但對大鼠的血壓、血清甘油三酯、殘腎-體重指數(shù)的影響無統(tǒng)計學意義。隨著劑量的增加，腎華降尿蛋白、血清肌酐、減輕病理損害作用呈增強趨勢，而降血清膽固醇的作用呈下降趨勢

7、。 與模型對照組比較，腎華可以顯著降低殘余腎臟ED-1(每個腎小球截面ED-1陽性細胞數(shù)5.57±0.65vs.10.14±0.91，P＜0.01；腎小管間質(zhì)每高倍鏡視野陽性細胞數(shù)7.5±0.99vs.29.33±1.20，P＜0.01)、PCNA、α-SMA、TGF-β1(腎小球陽性面積百分比4.49％±0.67％vs.10.86％±1.63％，P＜0.01；腎小管間質(zhì)1.47％±0.22％vs.9.59％±1.44％，P＜0

8、.01)、FGF-2、CTGF、MIF(腎小球陽性面積比4.82％±0.77％vs.13.04％±2.09％P＜0.01；腎小管間質(zhì)陽性面積百分比11.55％±1.96％vs.18.04％±3.07％，P＜0.01)和COL-1的表達水平。 結(jié)論：腎華片可以通過抑制腎組織的慢性炎癥反應，抑制TGF-β1、FGF-2、CTGF以及MIF表達等機制，抑制系膜細胞和間質(zhì)成纖維細胞的增殖和細胞外基質(zhì)的合成，減輕腎小球硬化和腎小管間質(zhì)病變