茶葉功能成分對(duì)5-6腎切除合并高尿酸血癥大鼠腎損傷的治療作用及其機(jī)制研究.pdf

1、目的:觀察茶葉功能成分配方對(duì)5/6腎切除合并高尿酸血癥大鼠腎損傷的修復(fù)作用，并探討其可能機(jī)制。
　　方法:
　　1、96只健康雌性清潔級(jí)SD大鼠隨機(jī)分為四組:假手術(shù)組（Sham組）、5/6腎切除組（RK組）、5/6腎切除+氧嗪酸組(RK+OA組)、氧嗪酸組（OA組）。每組24只，分別于4周、8周、12周三個(gè)時(shí)間點(diǎn)收集24小時(shí)尿液后各處死8只大鼠，留取血、腎組織。
　　2、120只健康雌性清潔級(jí)SD大鼠隨機(jī)分為五組:假手

2、術(shù)組(Sham組)、5/6腎切除組（RK組）、5/6腎切除+氧嗪酸組（RK+OA組）、5/6腎切除+氧嗪酸+茶葉功能成分組（RK+OA+Tea組）、5/6腎切除+氧嗪酸+別嘌呤醇組（RK+OA+AP組）。每組24只，分別于4周、8周、12周三個(gè)時(shí)間點(diǎn)收集24小時(shí)尿液后各處死8只大鼠，留取血、腎組織。
　　3、雙縮脲法測(cè)定尿蛋白含量;全自動(dòng)生化分析儀檢測(cè)血尿酸、肌酐、尿素氮;HE染色及PAS染色檢查腎臟病理改變;免疫組化染色觀察腎小

3、球入球小動(dòng)脈α-SMA表達(dá)、腎間質(zhì)微血管密度（CD34表達(dá)養(yǎng)性）、腎小管上皮細(xì)胞增殖細(xì)胞核抗原(PCNA)和轉(zhuǎn)化生長(zhǎng)因子β(TGF-β)表達(dá)水平;TUNEL法觀察腎小管凋亡情況;ELISA法檢測(cè)血清XO、NADPH氧化酶、腎皮質(zhì)AngⅡ濃度，Western blot法檢測(cè)腎組織KLF-5、磷酸化p38MAPK蛋白表達(dá)。
　　結(jié)果:
　　1、RK組大鼠各時(shí)間點(diǎn)24小時(shí)尿蛋白、血肌酐、尿素氮均較Sham組增高(P＜0.05)，出

4、現(xiàn)明顯的腎小球增生、肥大、硬化，腎小管變性、擴(kuò)張、萎縮，腎間質(zhì)炎性細(xì)胞浸潤(rùn)，纖維化形成;腎小球入球小動(dòng)脈輕度增生，管周毛細(xì)血管丟失，腎小管上皮細(xì)胞凋亡增加，TGF-β表達(dá)增加。
　　2、RK+OA組大鼠各時(shí)間點(diǎn)24小時(shí)尿蛋白（12周除外）、血尿酸、血肌酐、尿素氮均較RK組增高(P＜0.05)，腎小球增生、硬化，腎間質(zhì)纖維化明顯加重;腎小球入球小動(dòng)脈明顯增殖，微血管密度顯著下降，腎小管上皮凋亡明顯增加，而增生減少，TGF-β表達(dá)明顯

5、增加。血尿酸水平與24小時(shí)尿蛋白量、血尿素氮和肌酐水平以及腎小管間質(zhì)評(píng)分呈正相關(guān)性。
　　3、RK+OA+Tea組大鼠各時(shí)間點(diǎn)血尿酸、尿素氮、肌酐及尿蛋白水平明顯減低(P＜0.05)，腎小球增生及間質(zhì)纖維化顯著改善，腎小球入球小動(dòng)脈的增殖，間質(zhì)微血管的丟失明顯改善，腎小管上皮細(xì)胞的凋亡明顯減少而增殖增加，腎小管TGF-β的表達(dá)減少。與RK+OA+AP比較，RK+OA+Tea組大鼠的各項(xiàng)腎損傷指標(biāo)均改善得更為明顯。
　　4、R

6、K+OA組各時(shí)間點(diǎn)血清OX較RK組及Sham組增高，RK+OA+Tea組較RK+OA組明顯減低(P＜0.05)。
　　5、RK+OA組各時(shí)間點(diǎn)血清NADPH氧化酶，腎皮質(zhì)AngⅡ，腎組織磷酸化p38MAPK、KLF-5均較RK組明顯增高(P＜0.05)。
　　6、RK+OA+Tea組各時(shí)間點(diǎn)血清NADPH氧化酶，腎皮質(zhì)AngⅡ，腎組織磷酸化p38MAPK、KLF-5均較RK+OA組明顯減低(P＜0.05)。
　　結(jié)論:

7、
　　1、成功構(gòu)建了5/6腎切除合并高尿酸血癥的動(dòng)物模型。
　　2、茶葉功能成分配方可顯著改善5/6腎切除合并高尿酸血癥大。鼠腎損傷:降低其血清尿酸濃度、減輕其尿蛋白，并明顯改善腎功能、減輕入球小動(dòng)脈平滑肌的增殖及間質(zhì)毛細(xì)血管的丟失、減輕腎小管上皮細(xì)胞的凋亡，并促進(jìn)其增殖、減輕腎間質(zhì)纖維化。
　　3、茶葉功能成分配方可能通過抑制黃嘌呤氧化酶，減少尿酸生成，從而使血尿酸水平降低;通過減少AngⅡ、抑制NADPH氧化酶減輕