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文檔簡介
1、目的:本課題通過組織病理學(xué)、免疫學(xué)及細(xì)菌培養(yǎng)等方法,觀察復(fù)方雙黃溶液(主要成分為大黃和黃芪)對燒傷后大鼠腸粘膜損傷及細(xì)菌移位的影響,探討復(fù)方雙黃溶液保護(hù)腸粘膜及抑制細(xì)菌移位的機(jī)理,為防治嚴(yán)重?zé)齻竽c道粘膜損傷及細(xì)菌移位探索一條新的有效途徑,并為防治嚴(yán)重?zé)齻蠹?xì)菌移位的臨床研究提供客觀的實(shí)驗(yàn)依據(jù)。 方法: 1.實(shí)驗(yàn)動物:雄性健康Sprague-Dawley(SD)大鼠32只,稱重,編號。 2.燒傷大鼠模型制備:10
2、%水合氯醛(0.3ml/100g)腹腔注射麻醉,10%硫化鈉背部脫毛,溫清水擦洗干凈,飼養(yǎng)24小時(shí)后以同法水合氯醛麻醉,取俯臥位固定于木板上,每只大鼠用同樣大小7.5cmX8.5cm的煤油紗布緊帖在脫光毛的大鼠背部皮膚上,周圍其余部分用濕紗布保護(hù),著火燃燒20秒鐘,制成燒傷總面積達(dá)總體表面積20%Ⅲ度皮膚燒傷模型。 3.實(shí)驗(yàn)分組:將大鼠分為四組,每組8只(1)正常對照組:不燙傷,自由進(jìn)食水。(2)燒傷對照組:燒傷前1小時(shí)胃飼1m
3、l生理鹽水,燒傷后6小時(shí)第二次胃飼,4次/日。(3)燒傷胃飼大黃組:燒傷前1小時(shí)胃飼1ml(5g/kg)大黃溶液,燒傷后6小時(shí)第二次胃飼,4次/日。(4)燒傷胃飼雙黃組:燒傷前1小時(shí)胃飼1m1(5g/kg)雙黃溶液,燒傷后6小時(shí)第二次胃飼,4次/日。 4.檢測方法及觀測指標(biāo):燒傷后72小時(shí)觀察。(1)取出胸腺、脾臟后稱重。計(jì)算脾臟指數(shù)、胸腺指數(shù)。(2)嚴(yán)格無菌操作下,取脾、腎、肝、腸系膜淋巴結(jié)稱重、勻漿、接種,同時(shí)取門靜脈血接種
4、進(jìn)行細(xì)菌培養(yǎng)。(3)留取末端回腸6cm,取其中2cm縱行剖開,置入10%中性福爾馬林固定液中,固定,包埋,石蠟切片,HE染色,光鏡觀察。剩余組織,用4%戊二醛固定后,待做透射電鏡觀察。(4)剪取空回腸約10cm,刮取腸粘液,計(jì)算腸粘液蛋白中SlgA的含量。 5.統(tǒng)計(jì)學(xué)處理:用SPSS10.0統(tǒng)計(jì)學(xué)軟件,對不同類型數(shù)據(jù)進(jìn)行不同的統(tǒng)計(jì)學(xué)處理。 結(jié)論:復(fù)方雙黃溶液可明顯減輕燒傷后大鼠的腸粘膜病理改變,調(diào)整菌群失調(diào),提高機(jī)體免疫
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