細(xì)胞外熱休克蛋白70在嚴(yán)重?zé)齻笫竽c粘膜的表達(dá)變化及其對(duì)腸道T細(xì)胞免疫功能的影響.pdf

1、目的:觀察嚴(yán)重?zé)齻笫竽c粘膜組織細(xì)胞外熱休克蛋白70及IL-2表達(dá)變化情況,另外分離嚴(yán)重?zé)齻蟠笫竽c道淋巴結(jié)CD3+T細(xì)胞,予以細(xì)胞外HSP70(eHSP70)刺激體外培養(yǎng),以此來探討eHSP70對(duì)腸道T細(xì)胞免疫的影響。
　　方法:把60只健康雄性SD大鼠,隨機(jī)分成正常對(duì)照組和燒傷后3小時(shí)、6小時(shí)、12小時(shí)、24小時(shí)、48小時(shí)組,每組各10只,用控時(shí)控溫控壓蒸汽燙傷儀在每只燙傷組大鼠背部造成全身體表面積為30％的III度燒傷,于各

2、時(shí)相點(diǎn)頸椎脫臼處死SD大鼠,提取腸粘膜組織,采用ELISA方法檢測(cè)eHSP70和IL-2的表達(dá)變化。采用流式細(xì)胞分選技術(shù)分選嚴(yán)重?zé)齻?2h后雄性SD大鼠腸道淋巴結(jié)CD3+T細(xì)胞,將體外培養(yǎng)的CD3+T細(xì)胞隨機(jī)分成空白對(duì)照組和eHSP70低濃度、中濃度、高濃度刺激組共4組。其中空白對(duì)照組不加eHSP70,低、中、高濃度組分別加入終濃度為5μg/ml、10μg/ml、20μg/ml的eHSP70,采用流式細(xì)胞技術(shù)檢測(cè)Th1/Th2細(xì)胞比例及

3、CD3+T細(xì)胞凋亡率;采用ELISA方法檢測(cè)IL-2和IL-10在培養(yǎng)液上清中的表達(dá)變化。
　　結(jié)果:
　　(1)大鼠燒傷后各時(shí)相點(diǎn)腸粘膜eHSP70的表達(dá)均降低,與正常對(duì)照組(1278±327.3)比較,燒傷后3h(538±40.4)大鼠腸粘膜eHSP70表達(dá)已經(jīng)下降,燒傷后12h(314±20.5)達(dá)到最低值,約為正常對(duì)照組的1/4,在燒傷后24h(528±40.4)后表達(dá)開始逐步回升,差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)

4、。
　　(2)與正常對(duì)照組(48.63±7.89)比較,各燙傷組大鼠腸粘膜IL-2的表達(dá)均降低,于燒傷后12h(25.36±8.58)達(dá)到最低值,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。
　　(3嚴(yán)重?zé)齻笫竽c粘膜 eHSP70和 IL-2相對(duì)表達(dá)量呈正相關(guān)r=0.920,p<0.01。
　　(4)與空白對(duì)照組比較,eHSP70刺激組Th1的比例均增高,而Th2的比例均降低,并均以終濃度為10μg/ml的中濃度組表現(xiàn)最明顯,

5、差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。
　　(5)與空白對(duì)照組比照,eHSP70刺激組的CD3+T細(xì)胞總凋亡率均下降,其中終濃度為10μg/ml的中濃度組凋亡率最低,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。
　　(6)與空白對(duì)照組比較,eHSP70刺激組的IL-2表達(dá)均增加,其中終濃度為10μg/ml的中濃度組增加最明顯,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05);而eHSP70刺激組中IL-10與空白對(duì)照組比較表達(dá)均無明顯變化,差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意