穿心蓮對肝硬化大鼠腸道通透性、腸道細(xì)菌過度生長和細(xì)菌移位的影響.pdf

1、本研究分為二部分：
　　 第一部分：建立高壓液相色譜方法檢測肝硬化大鼠腸道通透性(intestinal permeability，IP)
　　 目的:鑒于腸道通透性在肝硬化細(xì)菌移位中重要作用，故建立通過雙糖吸收試驗(yàn)評價(jià)肝硬化大鼠腸道通透性的高效液相色譜法（high performance liquid chromatography，HPLC），以研究肝硬化細(xì)菌移位的發(fā)生機(jī)制。
　　 方法:建立大鼠四氯化碳肝硬化模

2、型，成功制得肝硬化大鼠30只，另取正常大鼠30只作為對照。禁食8－12小時(shí)，經(jīng)口灌服2ml乳果糖/甘露醇混合液(含乳果糖100mg，甘露醇50mg)，收集8小時(shí)尿液，通過煮沸和添加離子交換樹脂去除蛋白和離子后送檢。色譜工作條件：色譜柱：NH2柱(4.6mm×250mm×5um，Warters)；流動(dòng)相：乙腈∶水（70∶30V/V）；流速：1.0ml/min；進(jìn)樣量：20ul；柱溫：室溫；檢測儀：示差折光檢測器2000（refractiv

3、e index detector2000，RI2000）。
　　 結(jié)果:在上述色譜條件下，尿樣中甘露醇和乳果糖能得到良好分離，甘露醇和乳果糖的保留時(shí)間分別為6.721min和9.242min。甘露醇和乳果糖的線性范圍分別為5-1000ug/ml、2.5-500ug/ml。甘露醇的加樣回收率在92.7%-98%之間，乳果糖的加樣回收率在91.3%-97.4%之間。肝硬化大鼠腸道通透性（L/M:0.03578±0.01245）較正常

4、大鼠腸道通透性（L/M: 0.02563±0.00871）顯著增高(P<0. 05)。
　　 結(jié)論:成功建立了檢測肝硬化大鼠腸道通透性的高效液相色譜方法，并證實(shí)肝硬化大鼠存在腸道通透性升高。
　　 第二部分：穿心蓮對肝硬化大鼠腸道細(xì)菌腸道通透性、腸道細(xì)菌過度生長(intestinal bacterial overgrowth，IBO)和細(xì)菌移位(bacterial translocation，BT)的影響
　　

5、目的:探討穿心蓮對肝硬化大鼠腸道通透性、腸道細(xì)菌過度生長和細(xì)菌移位的作用，為其臨床應(yīng)用提供依據(jù)。
　　 方法:建立大鼠四氯化碳肝硬化模型。將制得30只肝硬化大鼠隨機(jī)分為4組：AN組（穿心蓮組，n=8,穿心蓮0.5g/kg*d）、NF組(諾氟沙星組，n=8,諾氟沙星0.3g/kg*d）、AN+NF組(穿心蓮+諾氟沙星組，n=8,穿心蓮0.5g/kg*d+諾氟沙星0.3g/kg*d)、CN組（對照組，n=6，生理鹽水4ml/kg*d

6、），給藥2周后結(jié)束。比較各組死亡率，取外周靜脈血檢測血漿TNF-a、NO水平，并獲取腸系膜淋巴結(jié)、血液、肝、脾和回腸內(nèi)容物做細(xì)菌培養(yǎng)。采用高壓液相色譜法檢測腸粘膜通透性，部分肝臟和回腸組織作病理切片。
　　 結(jié)果:與CN組相比，AN組、NF組和AN+NF組的TNF-a、NO的濃度顯著降低（P<0.05），回腸細(xì)菌計(jì)數(shù)和細(xì)菌移位發(fā)生率顯著下降（P<0.05）；AN組和NF組的腸道通透性顯著下降（P<0.05）。病理檢查發(fā)現(xiàn)CN組肝