白血病多藥耐藥細(xì)胞K562-ADM誘導(dǎo)凋亡中線粒體的作用.pdf

1、蘭州大學(xué)碩士學(xué)位論文白血病多藥耐藥細(xì)胞K562ADM誘導(dǎo)凋亡中線粒體的作用姓名：郭璐申請(qǐng)學(xué)位級(jí)別：碩士專業(yè)：生物化學(xué)與分子生物學(xué)指導(dǎo)教師：魏虎來(lái)20060601G1期和Gl期細(xì)胞增多，提示細(xì)胞發(fā)生G1阻滯和凋亡。K562／ADM細(xì)胞經(jīng)40flmol／LVES處理后，凋亡細(xì)胞線粒體的形態(tài)結(jié)構(gòu)出現(xiàn)顯著改變，可見(jiàn)線粒體內(nèi)外膜融合，縮小，甚至碎片化，嵴減少且紊亂。K562／ADM細(xì)胞經(jīng)2嘰mol／L和40ktmol／LVES作用12h線粒體跨膜

2、電位(△vm)顯著降低，陽(yáng)性細(xì)胞由999％分別降至798％；fn493％，熒光強(qiáng)度減低。激光共聚焦顯微鏡檢測(cè)到胞漿內(nèi)細(xì)胞色素C增多。RTPCR檢測(cè)發(fā)現(xiàn)，caspase9mRNA表達(dá)也隨VES劑量增加而增高。20≯tmol／L和40#mol／LVES作用后，mdrlmRNA表達(dá)下降，P—gp合成顯著降低，72h時(shí)Pgp表達(dá)陽(yáng)性率由982％降低至878％一751％。caspase3mRNA表達(dá)明顯增高，caspase一3活性顯著增強(qiáng)，活化c

3、aspase3由531％增高至25O％和326％。VES顯著提高K562／ADM細(xì)胞對(duì)阿霉素(ADM)的敏感性。結(jié)論：VES可能通過(guò)改變K562／ADM耐藥細(xì)胞線粒體的形態(tài)結(jié)構(gòu)和穩(wěn)定性，導(dǎo)致線粒體膜電位降低，細(xì)胞色素C釋放，caspase一9激活及下游caspase3活化從而誘發(fā)K562／ADM細(xì)胞凋亡。同時(shí)VES抑制耐藥基因mdrl表達(dá)，降低P—gp合成和功能，解除pgP對(duì)caspase3的抑制效應(yīng)，逆轉(zhuǎn)因mdrl／PgP高表達(dá)所介導(dǎo)