脈沖磁場對白血病細胞K562-ADR多藥耐藥逆轉(zhuǎn)作用的研究.pdf

1、中國協(xié)和醫(yī)科大學(xué)碩士學(xué)位論文脈沖磁場對白血病細胞K562ADR多藥耐藥逆轉(zhuǎn)作用的研究姓名：宋保民申請學(xué)位級別：碩士專業(yè)：放射醫(yī)學(xué)指導(dǎo)教師：劉曉秋李進20080501中田醫(yī)掌科掌院生京協(xié)和醫(yī)掌院(清華大掌醫(yī)掌部)硬士研究生平業(yè)論文中文摘要白血病治療過程中，白血病細胞對化療藥物產(chǎn)生耐藥是導(dǎo)致化療失敗的主要原因，產(chǎn)生耐藥的腫瘤細胞對結(jié)構(gòu)和功能上截然不同的藥物也表現(xiàn)出耐藥性，即多藥耐藥(multidrugresistance，～ff)R)，如何

2、克服和逆轉(zhuǎn)白血病細胞的多藥耐藥性成了臨床化療急需解決的難題，亦是目前研究的熱點。用脈沖磁場(pulsedmagneticfields，PMF)逆轉(zhuǎn)腫瘤細胞的MDR是新的設(shè)想，初步顯示有一定潛力，但研究工作起步晚，國外文獻也極少，僅限于效應(yīng)研究。因此開展PMF逆轉(zhuǎn)腫瘤細胞MDR將會有廣闊前景。本研究以白血病K562細胞系作為研究對象，研究脈沖磁場對多藥耐藥腫瘤細胞K562／ADR的MDR逆轉(zhuǎn)作用及機制。K562細胞系為LozzioCB等人

3、在1957年建立的人類慢性髓源性白血病細胞系，其主要特征之一是具有費城染色體(ph)。該細胞系已廣泛用作高度未分化的慢性髓源性白血病實驗研究的細胞模型。本論文包括兩個實驗部分：1脈沖磁場對白血病細胞K562／ADR多藥耐藥逆轉(zhuǎn)的效應(yīng)研究2脈沖磁場逆轉(zhuǎn)白血病細胞K562／ADR多藥耐藥機理研究目的：研究脈沖磁場對多藥耐藥腫瘤細胞K562／ADR的MDR逆轉(zhuǎn)作用及機制方法：MTT法測定敏感株K562／S和耐藥株K562／ADR對阿霉素(Ad

4、riamycine，ADR)的IC∞；觀察PMF對腫瘤細胞增殖的影響；測定不同頻率PMF照射的K562／ADR耐藥細胞株對ADR的IC舳，分析PMF的逆轉(zhuǎn)效果。然后，采用流式細胞儀(Flowcytometry，F(xiàn)CM)技術(shù)檢測細胞內(nèi)藥物ADR的濃度。最后，RTPCR法和瓊脂糖凝膠電泳檢測K562／S、K562／ADR、PMF處理的K562／ADR等腫瘤細胞中MDRl基因mRNA表達。結(jié)果：K562／ADR細胞的耐藥倍數(shù)是2936；PMF

5、對耐藥株腫瘤細胞增殖沒有影響；相同磁場強度、不同頻率的PMF對耐藥株K562／ADR的IC翮影響不同，在相同的時間里，70HzPMF影響作用最明顯；70HzPMF處理的K562／ADR細胞中藥物濃度高于對照組。MDRl基因在K562／S中不表達，而在K562／ADR中高表達；K562／ADR經(jīng)PMF處理后，MDRI基因的mRNA表達量降低。結(jié)論：脈沖磁場通過降低MDRl基因mRNA的表達量，提高藥物在細胞內(nèi)的蓄積量，從而對多藥耐藥腫瘤細