脈沖磁場(chǎng)對(duì)白血病細(xì)胞HL60-ADR多藥耐藥的逆轉(zhuǎn)效果及分子機(jī)制研究.pdf

1、白血病細(xì)胞對(duì)化療藥物的多藥耐藥性(multidrug resistance，MDR)是導(dǎo)致白血病化療失敗的主要原因。目前研究表明，急性早幼粒白血病細(xì)胞HL60/ADR MRP1基因的擴(kuò)增和MRP1 mRNA及MRP1蛋白的過(guò)度表達(dá)是導(dǎo)致腫瘤細(xì)胞多藥耐藥的重要原因。 臨床上對(duì)于白血病耐藥的對(duì)策主要是應(yīng)用各種耐藥逆轉(zhuǎn)劑，但是往往因?yàn)槟孓D(zhuǎn)劑的毒性較強(qiáng)，副作用較大而影響其在臨床上的廣泛應(yīng)用。因此，研究新型的逆轉(zhuǎn)方法成為科學(xué)家們追求的目標(biāo)

2、。本論文采用物理方法——脈沖磁場(chǎng)研究對(duì)白血病多藥耐藥的逆轉(zhuǎn)作用。脈沖磁場(chǎng)本身無(wú)毒害作用，初步研究顯示其逆轉(zhuǎn)白血病MDR具有一定潛力。 目的：探討脈沖磁場(chǎng)(pulsed magnetic fields，PMF)對(duì)白血病細(xì)胞HL60/ADR多藥耐藥的逆轉(zhuǎn)效果及其可能的分子機(jī)制。 方法：生長(zhǎng)曲線法檢測(cè)PMF的細(xì)胞毒性作用，MTT法測(cè)定HL60、HL60/ADR的IC50及經(jīng)不同參數(shù)PMF作用后HL60/ADR的IC50，計(jì)算耐

3、藥倍數(shù)和逆轉(zhuǎn)倍數(shù)，流式細(xì)胞術(shù)檢測(cè)PMF作用前后HL60/ADR細(xì)胞內(nèi)藥物蓄積變化及多藥耐藥相關(guān)蛋白(Multidrug Resistance Related Protein1，MRP1)陽(yáng)性表達(dá)率的變化，RT-PCR法檢測(cè)MRP1基因表達(dá)的變化。 結(jié)果：?jiǎn)为?dú)PMF對(duì)HL60/ADR細(xì)胞的生長(zhǎng)沒(méi)有明顯抑制作用，說(shuō)明其本身沒(méi)有毒副作用。不同參數(shù)(頻率為110Hz、150Hz和250Hz，場(chǎng)強(qiáng)均為40mT，照射時(shí)間30min和th)的

4、PMF均能有效逆轉(zhuǎn)HL60/ADR的多藥耐藥，110Hz和150Hz兩個(gè)頻率效果較好，250Hz不明顯，說(shuō)明PMF具有“窗口效應(yīng)”；且1h均比30min的效果顯著，說(shuō)明PMF的作用效果具有時(shí)間依賴(lài)性。其中110Hz/1h作用最為明顯，逆轉(zhuǎn)倍數(shù)為7.855倍。PMF作用后Rh123在HL60/ADR細(xì)胞內(nèi)的蓄積增加了近8.0％，而MRP1基因表達(dá)下調(diào)了68.3％，蛋白陽(yáng)性表達(dá)率下調(diào)23.6％。 結(jié)論：PMF能夠通過(guò)下調(diào)MRP1基因