漢防己甲素聯(lián)合屈洛昔芬逆轉(zhuǎn)白血病細胞多藥耐藥機理研究.pdf

1、目的:本課題旨在研究漢防己甲素(Tetrandrine,Tet)和屈洛昔芬(Droloxifen,DRL)單獨及聯(lián)合應(yīng)用對人慢性粒細胞白血病急性紅白血病變細胞株K562及其耐藥細胞株K562/A02的核因子κ B(nuclear factor kappaB,NF-κ B)表達的影響,以探討它們逆轉(zhuǎn)多藥耐藥的作用機理,為Tet和DRL作為耐藥逆轉(zhuǎn)劑的臨床應(yīng)用提供理論依據(jù).方法:(1)采用免疫細胞化學(xué)(Immunocytochemistry

2、,ICC)法檢測Tet(1 μ M)、DRL(5 μ M)單獨及聯(lián)合作用于K562細胞和K562/A02細胞一定時間細胞NF-κ B核轉(zhuǎn)位水平變化;(2)采用蛋白印跡法(Western blotting)檢測Tet(1 μ M)、DRL(5 μ M)單獨及聯(lián)合作用于K562細胞和K562/A02細胞一定時間細胞胞核NF-κ B蛋白表達水平的變化.結(jié)果:(1)免疫細胞化學(xué)法檢測Tet、DRL單獨及聯(lián)合應(yīng)用對K562和K562/A02細胞N

3、F-κ B核轉(zhuǎn)位水平的影響:①K562/A02細胞NF-κ Bp65核轉(zhuǎn)位水平明顯高于K562細胞(P<0.01);②Tet、DRL單獨及聯(lián)合作用6小時、12小時,對K562細胞的NF-κ B核轉(zhuǎn)位水平無明顯影響(P>0.05);③兩藥單獨及聯(lián)合作用6小時、12小時,可明顯降低K562/A02細胞NF-κ B蛋白核轉(zhuǎn)位水平(分別為P<0.05和P<0.01),兩藥聯(lián)合作用增強(P<0.05),作用于K562/A02細胞12小時較作用6小

4、時效果更顯著(P<0.05);(2)Western blotting檢測Tet、DRL單獨及聯(lián)合應(yīng)用對K562和K562/A02細胞胞核NF-κ B蛋白的影響:①K562/A02細胞的胞核NF-κ B蛋白表達明顯高于K562細胞(P<0.01);②Tet、DRL單獨及聯(lián)合作用6小時、12小時,對K562細胞胞核NF-κ B蛋白表達水平無明顯影響(P>0.05);③兩藥單獨及聯(lián)合作用6小時、12小時,明顯下調(diào)K562/A02細胞胞核的NF