枸杞多糖抗氧化延緩皮膚衰老的實(shí)驗(yàn)研究.pdf

1、[目的]本研究擬借助現(xiàn)代科學(xué)技術(shù)與方法、儀器設(shè)備等，從整體到細(xì)胞、分子，從代謝、機(jī)能到形態(tài)結(jié)構(gòu)多方面進(jìn)行多層次的綜合研究和分析，觀察研究枸杞多糖(Lyciumbarbarumpolysaccharides,LBP)對(duì)D-半乳糖擬衰老小鼠皮膚組織在抗氧化能力的生物學(xué)效應(yīng)和延緩皮膚衰老作用，從生化酶角度探討LBP對(duì)衰老小鼠皮膚組織的保護(hù)機(jī)理，為開發(fā)研制枸杞多糖資源提供科學(xué)的實(shí)驗(yàn)依據(jù)，以便開發(fā)更多的抗皮膚衰老藥品和保健食品。 [方法]

2、80只2月齡昆明種小鼠隨即分為四組：正常組(N)，衰老模型組(C)，低劑量LBP抗衰老組(L)和高劑量LBP抗衰老組(H)。衰老模型組與抗衰老用藥組每日頸背皮下注射D-半乳糖溶液制造衰老模型。抗衰老用藥組在注射D-半乳糖期間以LBP灌胃。42天后取小鼠背部皮膚作病理切片，觀察皮膚組織形態(tài)變化，檢測(cè)皮膚組織含水量、成纖維細(xì)胞計(jì)數(shù)，測(cè)定超氧化物歧化酶(superoxidedismutase,SOD)活力，檢測(cè)羥脯氨酸(hydroxyprol

3、ine,Hyp)、丙二醛(malondialdehyde,MDA)、脂褐質(zhì)(lipofuscin,Lf)含量，CuZn-SODmRNA在皮膚中的表達(dá)水平。 [結(jié)果]1.衰老模型組、低、高劑量LBP抗衰老組小鼠皮膚含水量、表皮厚度、真皮厚度以及成纖維細(xì)胞數(shù)較正常對(duì)照組均明顯減少，差異有顯著性意義(P＜0.01)。高、低劑量LBP抗衰老組分別與衰老模型組比較，小鼠皮膚含水量、表皮厚度、真皮厚度以及成纖維細(xì)胞數(shù)均增加，差異有顯著性意義

4、(P＜0.01)。而高劑量LBP抗衰老組小鼠皮膚含水量、表皮厚度、真皮厚度以及成纖維細(xì)胞數(shù)亦明顯高于低劑量LBP抗衰老組，差異具有顯著性意義(P＜0.01)。 2.皮膚病理切片鏡下觀察結(jié)果示：正常對(duì)照組小鼠皮膚表皮層次清晰，結(jié)構(gòu)完好，表皮突可見，真皮膠原纖維排列緊密；衰老模型組小鼠表皮及真皮萎縮變薄，表皮突消失，膠原纖維斷裂，分布不均勻，皮下結(jié)構(gòu)疏松；低、高劑量LBP抗衰老組小鼠多數(shù)表皮各層細(xì)胞結(jié)構(gòu)較好，表皮變薄，基底膜與真皮乳

5、頭層分界欠明顯，真皮內(nèi)膠原纖維分布較均勻。 3.衰老模型組、低、高劑量LBP抗衰老組小鼠皮膚SOD活力較正常對(duì)照組均明顯降低，差異有顯著性意義(P＜0.01)。高、低劑量LBP抗衰老組分別與衰老模型組比較，小鼠皮膚SOD活力均增加，差異有顯著性意義(P＜0.01)。而高劑量LBP抗衰老組小鼠皮膚SOD活力亦明顯高于低劑量LBP抗衰老組，差異具有顯著性意義(P＜0.01)。 4.衰老模型組、低、高劑量LBP抗衰老組小鼠皮膚

6、羥脯氨酸、丙二醛及脂褐質(zhì)含量較正常對(duì)照組均明顯增加，差異有顯著性意義(P＜0.01)。高、低劑量LBP抗衰老組分別與衰老模型組比較，小鼠皮肽羥脯氨酸、丙二醛及脂褐質(zhì)含量均降低，差異有顯著性意義(P＜0.01)。而高劑量LBP抗衰老組小鼠皮膚羥脯氨酸、丙二醛及脂褐質(zhì)含量亦明顯低于低劑量LBP抗衰老組，差異具有顯著性意義(P＜0.01)。 5.衰老模型組、低、高劑量LBP抗衰老組小鼠皮膚組織Cu-ZnSODmRNA/GAPDHmRN

7、A相對(duì)光密度值較正常對(duì)照組均明顯降低，差異有顯著性意義(P＜0.01)。而高、低劑量LBP抗衰老組分別與衰老模型組比較，Cu-ZnSODmRNA/GAPDHmRNA相對(duì)光密度值均顯著升高，差異有顯著性意義(P＜0.01)。而高劑量LBP抗衰老組小鼠皮膚Cu-ZnSODmRNA/GAPDHmRNA相對(duì)光密度值亦明顯高于低劑量LBP抗衰老組，差異具有顯著性意義(P＜0.01)。 [結(jié)論]證實(shí)了D-半乳糖誘導(dǎo)的亞急性衰老模型是可靠的衰