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文檔簡介
1、[目的]
建立D-半乳糖擬衰老小鼠衰老模型,評估衰老模型的可靠性和實用性。以國內(nèi)外公認(rèn)的抗氧化劑維生素E為陽性對照藥物,借助現(xiàn)代科學(xué)技術(shù)與方法、儀器設(shè)備等,通過對皮膚組織結(jié)構(gòu)、彈力纖維面積,皮膚組織SOD及MDA水平,CuZn-SOD mRNA的表達(dá),p53的表達(dá),β-半乳糖苷酶活性的檢測,觀察研究靈芝多糖(Ganoderma lucidum Polysaccharide,GLP)對D-半乳糖擬衰老小鼠皮膚組織在抗氧化能力
2、的生物學(xué)效應(yīng)和延緩皮膚衰老作用,從組織學(xué)、分子學(xué)角度探討GLP對衰老小鼠皮膚組織的保護(hù)機(jī)理,為靈芝多糖的進(jìn)一步開發(fā)應(yīng)用提供實驗依據(jù)。
[方法]
44只2月齡昆明種小鼠隨即分為四組:正常組(Z),衰老模型組(S),VE組(V)和靈芝多糖組(G)。衰老模型組與抗衰老用藥組每日頸背皮下注射D-半乳糖溶液制造衰老模型??顾ダ嫌盟幗M在注射D-半乳糖期間分別以VE、GLP灌胃。42天后取小鼠背部皮膚作病理切片,觀察皮膚組
3、織形態(tài)變化,檢測表皮、真皮厚度及彈力維面積,測定超氧化物歧化酶(SOD)、丙二醛(MDA)含量,CuZn-SODmRNA在皮膚中的表達(dá)水平,免疫組化檢測各組中p53的表達(dá),檢測細(xì)胞相關(guān)的β-半乳糖苷酶活性。
[結(jié)果]
靈芝多糖能增加表皮和真皮厚度,改善皮膚組織結(jié)構(gòu),增加皮膚彈力纖維面積;能提高皮膚組織SOD水平,降低MDA水平;能提高CuZn-SOD mRNA的表達(dá),降低p53的表達(dá);降低β-半乳糖苷酶活性。
4、
[結(jié)論]
靈芝多糖能改善D-半乳糖擬衰老小鼠皮膚組織結(jié)構(gòu);顯著提高皮膚SOD活力,降低MDA含量,提高其抗氧化能力;能顯著提高CuZn-SOD mRNA在皮膚中的表達(dá)量,提示靈芝多糖對SOD基因表達(dá)呈現(xiàn)出正調(diào)節(jié)作用,加快SOD蛋白在細(xì)胞中的合成,使SOD量增加而導(dǎo)致酶活性的提高;降低p53的表達(dá)和β-半乳糖苷酶活性,又一次證實了p53、β-半乳糖苷酶是衰老的特異性基因,進(jìn)一步驗證了靈芝多糖的抗衰老作用。結(jié)果
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