桑椹多酚類化合物抗氧化及延緩衰老作用研究.pdf

1、多酚是一類廣泛存在的化合物。多數(shù)多酚存在于植物中，目前，已報(bào)道的植物酚類化合物就有8000多種，每年仍有大量新的酚類化合物不斷被發(fā)現(xiàn)，這些酚類化合物多數(shù)具有抗氧化，抗誘變，抗腫瘤、降低心血管疾病風(fēng)險(xiǎn)等活性。根據(jù)國(guó)家疾病檢測(cè)系統(tǒng)的報(bào)告資料顯示，心血管疾病在我國(guó)位居死亡率首位，是現(xiàn)代社會(huì)中老年人口健康的最大威脅，而衰老是心血管疾病產(chǎn)生的主要原因。多酚是桑椹中的重要抗氧化活性成分之一，并且含量豐富，因此，開發(fā)桑椹多酚具有重要的理論價(jià)值和研究意

2、義。本研究從桑椹品種選擇出發(fā)，選擇大10、塘10和臺(tái)桑三個(gè)品種在五個(gè)不同成熟階段的桑椹進(jìn)行多酚化合物的提取及其抗氧化活性的研究，之后對(duì)塘10完全成熟的桑椹進(jìn)行不同干燥方式處理后進(jìn)行多酚化合物的提取及其抗氧化活性的研究，確定合適的干燥方式，在此基礎(chǔ)上建立高效簡(jiǎn)便提取桑椹多酚的工藝技術(shù)，并考察其對(duì)衰老小鼠的延緩衰老作用，為研制與開發(fā)具有醫(yī)療和保健功效的桑椹多酚產(chǎn)品提供技術(shù)支持。主要研究結(jié)果如下：
　　1.不同品種不同成熟階段對(duì)桑椹多酚

3、含量及其抗氧化活性的影響：選取大10、塘10、臺(tái)桑三品種五個(gè)成熟階段的桑椹進(jìn)行試驗(yàn)，測(cè)定其色度、可溶性固溶物含量、pH值、可滴定酸的變化規(guī)律，以及游離酚、結(jié)合酚、總酚和總黃酮含量變化及多酚清除DPPH自由基能力、FRAP抗氧化能力和ORAC抗氧化能力的差異。結(jié)果表明，桑椹隨著成熟過程的推移可溶性固溶物含量呈S型增長(zhǎng)趨勢(shì)，可滴定酸呈先升后降的趨勢(shì)，pH呈下降趨勢(shì)；并且酚類物質(zhì)不斷變化，桑椹的酚類化合物是呈現(xiàn)S型增加趨勢(shì)的，在成熟期達(dá)到最大

4、；黃酮類物質(zhì)的含量變化不明顯。通過多酚含量與三種抗氧化活性評(píng)價(jià)方法之間做相關(guān)性分析得出，多酚含量與抗氧化活性存在較強(qiáng)的正相關(guān)性。通過此試驗(yàn)研究，確定塘10品種完全成熟時(shí)的桑椹適合本課題其他內(nèi)容的研究。
　　2.不同干燥方式對(duì)桑椹多酚及其抗氧化活性的影響：對(duì)新鮮成熟桑椹（品種為塘10）采取-40℃冷凍干燥(FD)及四種溫度（45℃、50℃、55℃和60℃）的真空干燥(VD）、熱風(fēng)干燥(HA）、熱泵干燥(HP）四種干燥方式處理，分析處

5、理過后的桑椹色度變化，測(cè)定其游離酚、結(jié)合酚、總酚和總黃酮的含量變化及其清除DPPH自由基能力、FRAP抗氧化能力和ORAC抗氧化能力差異。結(jié)果表明，與新鮮桑椹相比，四種干燥方式處理后的桑椹色度均有較大變化（ΔE*>9），分別用VD、HA和HP干燥方式處理桑椹，溫度越高，色度變化越明顯（P<0.05）；不同干燥方式處理后的桑椹中游離酚、結(jié)合酚、總酚及總黃酮含量均存在差異（P<0.05），并且干燥溫度對(duì)結(jié)合酚和總黃酮的影響較大。桑椹多酚清除

6、DPPH自由基能力、FRAP抗氧化能力、ORAC抗氧化能力與多酚含量之間存在顯著相關(guān)性。綜合考慮色度，酚類物質(zhì)含量及能源消耗等因素，實(shí)際生產(chǎn)中建議采取45℃低溫?zé)犸L(fēng)干燥處理桑椹，有利于保護(hù)桑椹色澤，并減少桑椹中活性酚類物質(zhì)的損失。
　　3.桑椹多酚提取工藝優(yōu)化：以桑椹為原料，采用超聲波輔助乙醇提取法提取桑椹多酚。在單因素試驗(yàn)的基礎(chǔ)上，以桑椹多酚提取得率為考察指標(biāo)，采用Box-Benhnken中心組合試驗(yàn)設(shè)計(jì)法優(yōu)化提取工藝條件，建立

7、了包括乙醇體積分?jǐn)?shù)、提取溶液pH值、原料質(zhì)量濃度、超聲波功率和提取時(shí)間5個(gè)因素回歸模型。利用Design-Expert軟件對(duì)數(shù)據(jù)進(jìn)行回歸分析并結(jié)合驗(yàn)證試驗(yàn)結(jié)果，確定超聲輔助乙醇提取桑椹多酚的最佳工藝條件為：乙醇體積分?jǐn)?shù)60.0％，提取溶液pH5.0，原料質(zhì)量濃度0.025 g/mL，超聲波功率405W，提取時(shí)間30min。在此工藝條件下提取桑椹多酚的實(shí)際得率為3.016%，預(yù)測(cè)值為3.161%。建立的回歸模型可以較好地對(duì)響應(yīng)值進(jìn)行預(yù)測(cè)，

8、優(yōu)化的提取工藝條件具有一定的實(shí)用價(jià)值。
　　4.桑椹多酚提取物對(duì)D-半乳糖誘導(dǎo)的致衰小鼠實(shí)驗(yàn)研究：采用小鼠頸背部皮下注射10%D-半乳糖建立衰老模型，觀察桑椹多酚提取物對(duì)小鼠腦，肝，心和血清的丙二醛（MDA）含量，過氧化氫酶（CAT）、總超氧化物歧化酶（T-SOD）、單胺氧化酶（MAO）活性的影響。測(cè)定結(jié)果顯示，和模型組相比，桑椹多酚提取物能降低小鼠血清、肝臟、腦組織及心臟中的MDA含量，提高小鼠血清、肝臟、腦組織和心臟中的T-S