葡萄糖神經(jīng)酰胺合成酶基因在多藥耐藥腫瘤細(xì)胞株K562-AO2中的表達(dá)及其與白血病多藥耐藥的關(guān)系.pdf

1、目的：觀察葡萄糖神經(jīng)酰胺合酶(glucosylceramide synthase，GCS)基因在人紅白血病多藥耐藥細(xì)胞株K562/AO2中的表達(dá)及其與腫瘤多藥耐藥性(multidrugresistance，MDR)的關(guān)系，并初步研究GCS基因?qū)е掳籽《嗨幠退幍姆肿硬±頇C(jī)制。 方法：運(yùn)用Alamar Blue<'TM>多功能細(xì)胞染色法證實(shí)K562/AO2細(xì)胞株的多藥耐藥性；采用半定量RT-PCR技術(shù)檢測K562/AO2及其親本K

2、562細(xì)胞株的GCS基因、MDR1基因、Bcl-2基因、Bax基因的表達(dá)水平及其差異。ELISA法檢測耐藥和野生細(xì)胞株中Bcl-2蛋白的表達(dá)情況及培養(yǎng)上清液中Caspase-3的表達(dá)水平。應(yīng)用半定量RT-PCR技術(shù)檢測K562/AO2細(xì)胞經(jīng)不同劑量(均小于毒性劑量)苯基棕櫚酰胺嗎啡丙醇(PPMP)作用后GCS基因的表達(dá)水平，運(yùn)用Alamar Blue<'TM>多功能細(xì)胞染色法分析K562/AO2細(xì)胞經(jīng)PPMP處理前后多藥耐藥性的變化。

3、 結(jié)果：1．證實(shí)了K562/AO2細(xì)胞的多藥耐藥性；2．K562/AO2細(xì)胞GCS基因和MDR1基因的表達(dá)明顯強(qiáng)于K562細(xì)胞；3．K562/AO2細(xì)胞抑凋亡基因Bcl-2基因的表達(dá)強(qiáng)于K562細(xì)胞，而促凋亡基因Bax基因的表達(dá)則弱于K562細(xì)胞；4．K562/AO2細(xì)胞株的Bcl-2蛋白表達(dá)水平高于K562細(xì)胞株(P<0.01)；K562/AO2細(xì)胞株的Caspase-3表達(dá)水平低于K562細(xì)胞株(P<0.05)；5．2.5μm