CD147對白血病細胞U937 MMPs活性的調(diào)節(jié)及其生長侵襲能力的影響.pdf

1、目的：研究在脂多糖LPS誘導(dǎo)條件下，CD147的表達對白血病細胞U937基質(zhì)金屬蛋白酶MMPs分泌及其活性的調(diào)節(jié)作用，以及對細胞生長和侵襲能力的影響，從而探討CD147在白血病細胞生長、浸潤中的作用及其機制。 方法：U937細胞按照不同的處理方式分為以下四組：正常U937細胞組(對照組)，LPS(50μg/ml)誘導(dǎo)組(LPS組)，CD147單克隆抗體(10μg/ml)阻斷組(CD147 mAb組)，LPS誘導(dǎo)及CD147單克隆

2、抗體阻斷組(LPS+CD147 mAb組)。分別使用RT-PCR和流式細胞術(shù)在mRNA和蛋白水平檢測各組中CD147的表達情況；應(yīng)用RT-PcR和明膠酶譜分析MMPs的表達及活性；使用流式細胞術(shù)檢測LPS和CD147mAb作用下U937細胞周期的變化；MTT法對各組細胞的生長狀況進行分析；將細胞經(jīng)皮下接種于裸鼠體內(nèi)，對各組間腫瘤生長速度、腫瘤體積及裸鼠存活時『自J進行統(tǒng)計分析；體外細胞侵襲實驗檢測細胞在體外運動和侵襲能力的變化；將DAP

3、I標(biāo)記的u937細胞經(jīng)尾靜脈注射入SCID小鼠體內(nèi)，觀察細胞在各組織器官中的轉(zhuǎn)移情況。 結(jié)果：LPS在體外能夠誘導(dǎo)白血病細胞U937表而CD147的表達，同時增強MMP-2和MMP-9的表達、活化和分泌；使用CD147抗體阻斷CD147后，MMP-2和MMP-9的分泌及活性下降。U937細胞在體外經(jīng)LPS誘導(dǎo)后，細胞增殖旺盛，但細胞凋亡數(shù)增加；使用CD147抗體阻斷CD147之后，能夠?qū)⒓毎芷谧钄嘣贕0/G1期，細胞活力下降，

4、并誘導(dǎo)細胞凋亡。CD147抗體體外預(yù)處理能夠抑制u937細胞在裸鼠體內(nèi)生長，使小鼠存活時間延長。U937細胞經(jīng)LPS誘導(dǎo)后，其體外侵襲能力增強；尾靜脈注射SCID小鼠后發(fā)生肺部浸潤和轉(zhuǎn)移，并檢測到CD147、MMP-2和MMP-9的表達增強，CD147抗體在一定程度上能夠抑制上述現(xiàn)象。 結(jié)論：LPS可誘導(dǎo)U937細胞表面CD147分子表達增加，CD147通過上調(diào)U937細胞MMP-2和MMP-9的分泌和活性，從而促進U937細胞