UPP對(duì)U937細(xì)胞oxLDL相關(guān)受體表達(dá)和凋亡的影響.pdf

1、目的:越來越多的研究表明UPP與人類多種疾病的發(fā)生發(fā)展有關(guān),該實(shí)驗(yàn)室曾用人髓系白血病細(xì)胞U937細(xì)胞與氧化低密度脂蛋白(oxidized low density lipoprotein,oxLDL)溫育,建立單核細(xì)胞源性泡沫細(xì)胞模型,并且采用抑制消減雜交法篩選U937細(xì)胞經(jīng)oxLDL孵育形成泡沫細(xì)胞過程中差異表達(dá)的基因,在獲得的二十多個(gè)EST中,有編碼與脂蛋白代謝有關(guān)的蛋白酶即E2A的差異表達(dá).E2屬于泛素-蛋白酶體途徑的主要組分之一,

2、最近的研究發(fā)現(xiàn)泛素-蛋白酶體途徑可能參與動(dòng)脈粥樣硬化(atherosclerosis,AS)病變的發(fā)生發(fā)展.動(dòng)脈粥樣硬化性心血管疾病是目前危害人類健康的"頭號(hào)殺手",闡明動(dòng)脈粥樣硬化斑塊的發(fā)生發(fā)展機(jī)制將為疾病的預(yù)防和治療提供重要的理論依據(jù),而泡沫細(xì)胞的形成、堆積、凋亡及其所分泌的細(xì)胞因子等對(duì)于斑塊的成熟及穩(wěn)定具有重要意義.大量的研究也證實(shí),臨床上急性冠脈事件的發(fā)生與冠狀動(dòng)脈的不穩(wěn)定性斑塊破裂出血,繼而血栓形成有關(guān).雖然動(dòng)脈粥樣硬化是以增

3、殖為主的血管疾病,但研究發(fā)現(xiàn)在動(dòng)脈粥樣硬化斑塊中,細(xì)胞凋亡現(xiàn)象常見.該實(shí)驗(yàn)分為兩個(gè)部分,第一部分以泡沫化細(xì)胞為研究對(duì)象,先觀察UPP相關(guān)基因在oxLDL孵育過程中的時(shí)序表達(dá),再應(yīng)用蛋白酶體抑制劑MG132干預(yù)UPP,觀察細(xì)胞脂質(zhì)蓄積及相關(guān)受體表達(dá)的變化;第二部分應(yīng)用不同濃度MG132處理細(xì)胞,觀察細(xì)胞凋亡率的改變,并進(jìn)行初步的機(jī)制探討.結(jié)論:1.oxLDL能夠下調(diào)U937細(xì)胞內(nèi)UPP相關(guān)的Ub、E1、E2、E3、26s蛋白酶體mRNA水